杨梅等6种木本植物提取物抗植物病原活性筛选与研究

论文摘要

植物源农药具有毒性低、选择性强、环境相容性好等优点,成为农药研究领域的一个热点。为从木本植物中寻找抗植物病原活性物质,为开发植物源农药提供线索和理论依据,本文在用丙酮对杨梅Myrica rubra、乌桕Sapium sebiferum、青冈Quercus glauca、女贞Ligustrum lucidum、栀子Gardenia jasminoides、构树Broussonetia papyrifera 6种植物进行成分提取的基础上,以水稻纹枯Rhizoctonia solani等11种病原真菌为测试菌,采用生长速率法筛选出抑菌效果最强的植物种类杨梅,并对其粗提物和杨梅素作系统的室内抑菌活性测定,同时采用药液浸泡法测试两者对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus的致死活性,用HPLC对杨梅叶丙酮粗提物进行杨梅素含量检测,初步得出以下结论:（1）在测试浓度为1.0×105mg干样. L-1时,杨梅叶粗提物具有最强的抑制菌丝生长活性,对水稻纹枯等7种病菌的抑制率均为100%,对番茄早疫Alternaria solani等3种病菌的抑制率大于99%,对玉米大斑病菌Helminthospirium turcicum的抑制率为60.93%;其它提取物对某种或某几种病原真菌表现出一定的活性。（2）杨梅叶粗提物和杨梅素对菌丝生长有较强的毒力作用:杨梅叶粗提物对6种病菌的EC50值在19847.2325858.30mg干样. L-1之间,其中对油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum作用最强,对番茄灰霉病菌Botrytis cinerea作用最弱;杨梅素对6种病菌的EC50值差异较大,对水稻纹枯等3种病菌的效果较好,EC50值在315.86342.77mg . L-1之间,对小麦赤霉Fusarium graminerum、番茄灰霉、棉花枯萎Fusarium oxysporum f. sp. Vasinfectum 3种病菌的EC50值分别为690.40 mg . L-1、1087.18 mg . L-1和2088.82 mg . L-1。（3）杨梅叶粗提物和杨梅素对番茄灰霉和水稻稻瘟Pyricularia oryzae 2种病菌孢子萌发的抑制作用不显著:杨梅叶粗提物浓度为20000 mg干样. L-1时,对番茄灰霉和水稻稻瘟孢子萌发的抑制率分别为10.00%和11.11%,杨梅素浓度为400 mg . L-1时,抑制率分别为5.00%和9.16%。（4）杨梅叶粗提物和杨梅素在活体实验中对番茄和黄瓜灰霉病、柑桔青霉病Penicillium italicum都有一定疗效,保护作用高于治疗作用:在番茄组织法实验中,杨梅叶粗提物浓度为40000 mg干样. L-1时,对番茄灰霉病的保护和治疗作用分别为45.61%、42.25%,杨梅素1042.62 mg . L-1时,保护和治疗作用分别为20.02%、18.54%;在黄瓜盆栽法实验中,40000 mg干样. L-1的杨梅叶粗提物对黄瓜灰霉病保护和治疗作用分别为40.00%、35.13%,1042.62 mg . L-1杨梅素保护和治疗作用分别为19.34%、17.90%;在桔子组织法实验中,40000 mg干样. L-1的杨梅叶粗提物对柑桔青霉病的保护和治疗作用分别为33.92%、31.01%,1042.62 mg . L-1杨梅素保护和治疗作用分别为18.55%、17.86%。（5）杨梅叶粗提物和杨梅素对松材线虫的致死活性不明显,当杨梅叶粗提物浓度为20000 mg . L-1时,对松材线虫的校正死亡率为15.88%,杨梅素浓度为200 mg . L-1时,校正死亡率为12.05%（6）用HPLC测定杨梅叶丙酮粗提物中的杨梅素含量,结果测得其含量为1.12%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 1 文献综述
• 1.1 植物源杀菌剂的研究概况
• 1.1.1 抗菌植物资源
• 1.1.2 植物主要抑菌成分及分析
• 1.1.2.1 植物主要抑菌成分
• 1.1.2.2 植物抑菌成分分析
• 1.1.3 抑菌活性测定方法
• 1.1.3.1 传统的测定方法
• 1.1.3.2 测定方法的新发展
• 1.1.4 植物源杀菌剂的作用机理
• 1.1.5 植物源杀菌剂的开发利用
• 1.1.5.1 植物源杀菌剂的研发模式
• 1.1.5.2 部分已商品化的植物源杀菌剂
• 1.2 植物源杀线虫活性研究
• 1.3 杨梅研究概况
• 1.3.1 我国杨梅种质资源及分布
• 1.3.2 杨梅的研究及开发利用
• 1.3.2.1 杨梅的成分研究
• 1.3.2.2 杨梅的生物活性研究
• 1.3.3.3 杨梅的开发利用
• 1.4 问题的提出及论文设计思路
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 供试植物样品
• 2.1.2 供试杨梅素
• 2.1.3 供试菌种
• 2.1.4 供试果实及盆栽植物
• 2.1.5 供试松材线虫
• 2.1.6 实验仪器与试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 植物样品制备
• 2.2.2 离体抑菌活性测定方法
• 2.2.2.1 生长速率法
• 2.2.2.2 孢子萌发法
• 2.2.3 活体抑菌活性测定方法
• 2.2.3.1 番茄组织法
• 2.2.3.2 桔子组织法
• 2.2.3.3 黄瓜盆栽法
• 2.2.4 松材线虫致死活性测定方法
• 2.2.5 杨梅叶丙酮提取物中杨梅素含量测定方法
• 2.2.5.1 色谱条件
• 2.2.5.2 对照品溶液制备
• 2.2.5.3 供试品溶液制备
• 2.2.5.4 标准曲线的绘制
• 3 结果与分析
• 3.1 离体抑菌活性测定结果
• 3.1.1 植物粗提物对11 种病原菌的抑制效果
• 3.1.2 杨梅叶粗提物对6 种病原菌毒力测定结果
• 3.1.3 杨梅素对6 种病原菌毒力测定结果
• 3.1.4 杨梅叶粗提物和杨梅素对水稻稻瘟、番茄灰霉孢子萌发的抑制作用
• 3.2 活体抑菌活性测定结果
• 3.2.1 杨梅叶粗提物和杨梅素的水乳剂对番茄灰霉病的治疗、保护作用
• 3.2.2 杨梅叶粗提物和杨梅素的水乳剂对柑桔青霉病的治疗、保护作用
• 3.2.3 杨梅叶粗提物和杨梅素的水乳剂对黄瓜灰霉病的治疗、保护作用
• 3.3 杨梅叶粗提物和杨梅素对松材线虫的致死活性
• 3.4 杨梅叶丙酮提取物中杨梅素含量测定结果
• 4 讨论与结论
• 4.1 讨论
• 4.2 结论
• 参考文献
• 附图及说明
• 个人简介
• 致谢