色素上皮衍生因子与脂代谢及胰岛素抵抗相关性研究

论文摘要

目的:探讨多囊卵巢综合征（PCOS）患者血清色素上皮衍生因子（PEDF）水平与脂代谢及胰岛素抵抗（IR）的相关性。方法:纳入96例PCOS患者和63例年龄匹配的健康女性进行研究。测定身高、体重、血压、腰围（WC）、空腹血浆葡萄糖（FBG）、血清胰岛素（Fins）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）及PEDF。计算体重指数（BMI）和胰岛素抵抗指数（HOMA2-IR）。其中所有PCOS患者及20例对照行高胰岛素正葡萄糖钳夹术并以稳态期120-180分钟葡萄糖输注率（M值）评估胰岛素敏感性。结果:PCOS患者血清PEDF水平高于对照组（5.45±1.85 vs. 3.97±0.98μg/ml, P < 0.01）。TG水平及HOMA2-IR明显高于对照组、而HDL-c及M值则明显低于对照组。Spearman相关分析提示:PCOS患者血清PEDF与BMI、WC、HOMA2-IR、TG、TC、LDL-c及SBP呈正相关（P < 0.05）,而与M值及HDL-c呈负相关（P < 0.05）。多元线性回归分析提示在PCOS患者中,校正BMI、SBP后,PEDF仍与血脂指标（TG、TC、LDL-c和HDL- c）及IR指标（M值或HOMA2-IR）相关。结论:PCOS患者血清PEDF水平增高与脂代谢紊乱及IR相关。PEDF可能参与了PCOS患者脂代谢紊乱及IR发生。目的:探讨色素上皮衍生因子（PEDF）对人HepG2肝细胞脂代谢及胰岛素抵抗的影响。方法:分别用重组人PEDF细胞因子和PEDF抗体干预HepG2肝细胞,采用荧光定量PCR和Western Blotting方法检测脂质合成和分解的关键酶mRNA及蛋白水平的变化;裂解细胞,酶法测定细胞内甘油三酯（TG）含量;在基础状态下和胰岛素刺激状态下检测PEDF处理后胰岛素信号通路中胰岛素受体底物-1（IRS1）和AKT mRNA、总蛋白及蛋白磷酸化的变化。结果:1. PEDF对脂代谢的影响:PEDF干预人HepG2肝细胞后,固醇调节元件结合蛋白1（SREBP1）、脂肪酸合成酶（FAS）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、羟甲基戊二酰辅酶还原酶（HMGR） mRNA表达较正常对照分别降低39%、38%、61%、32%（P < 0.05）,而脂肪甘油三酯脂酶（ATGL）表达则增加了98%（P < 0.05）;用PEDF抗体干预后,SREBP1、FAS、ACC、HMGR mRNA水平表达分别较正常对照增加92%、56%、67%、42% （P < 0.05）,ATGL的表达减少51% （P < 0.05）。在蛋白水平,PEDF干预后FAS、ACC、HMGR表达较正常组分别减少58%、54%、43%,ATGL的表达增加20%（P < 0.05）;用PEDF抗体干预后,FAS、ACC、HMGR表达较正常组分别增加41%、39%、48%,ATGL的表达减少40%（P < 0.05）。同时PEDF的干预使细胞内TG明显减少（410.4±13.43 mg/g vs. 234.70±35.70 mg/g, P <0.05）,而PEDF抗体干预后,细胞内TG含量无明显变化（410.4±13.43 mg/g vs. 440.32±25.67 mg/g,P = 0.67）。2. PEDF对胰岛素信号通路的影响: PEDF在基础状态下对胰岛素信号通路中的IRS1、AKT的mRNA、总蛋白及蛋白磷酸化均无显著影响,在胰岛素刺激下PEDF对IRS1、AKT的mRNA、总蛋白仍无明显影响,但可引起IRS1 （Tyr632）、及AKT （Ser 473）的磷酸化分别增加97%和65% （P < 0.05）,但与单纯胰岛素刺激组相比差异仍无统计学意义（p-IRS1: 1.97±0.47 vs. 1.78±0.44, p-AKT: 1.65±0.16 vs.1.47±0.21, P > 0.05）。结论:PEDF在HepG2肝细胞中可通过抑制脂肪酸的合成,并促进脂肪分解,从而降低细胞内TG的含量;同时,PEDF在基础状态及胰岛素刺激状态下对胰岛素信号通路中的IRS1-AKT信号途径均无显著影响。

论文目录

• 英汉缩略语名词对照
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 多囊卵巢综合征人群血清色素上皮衍生因子水平与脂代谢及胰岛素抵抗相关性研究
• 对象与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二部分 色素上皮衍生因子对人 HepG2 肝细胞脂代谢及胰岛素信号通路的影响
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 全文总结
• 文献综述 色素上皮衍生因子与肝脏疾病
• 参考文献
• 致谢
• 攻读博士学位期间发表的论文