论文摘要
南方红豆杉（T．chinensis var．mairei）中不仅含有紫杉醇，还含有多糖类生物活性物质。本文研究了红豆杉总多糖的提取、脱色、分离、红豆杉单多糖（PST-1）的模拟移动床（SMB，Simulated Moving Bed）离子交换色谱分离工艺以及PST-1的结构鉴定。研究了红豆杉多糖提取分离的工艺。首先，四因素、三水平实验得到红豆杉多糖的最佳条件为温度100℃、料液比1：30、加醇量85％、提取时间2h，在此条件下，红豆杉多糖的得率为4.68％；接着，进行5k超滤膜的脱色工艺研究，得到最佳脱色条件为温度25℃，压力20psi，pH值6.8，浓度10g/L条件下，反复超滤4次，R和F可以达到87.2％和75.6％；将脱色后的红豆杉多糖经过DEAE-Sepharose-FF离子交换层析分离，用0.3N NaCl的Tirs-HCl缓冲液洗脱得到酸性单多糖，命名为PST-1，GPC（凝胶渗透色谱）分析该多糖为单一多糖。建立了模拟移动床（SMB）离子交换色谱分离PST-1的工艺。自行设计和开发由可控制编程器（PLC）控制的SMB离子交换色谱分离设备，并对设备控制参数通过PCSS软件非线性技术进行优化；设备线速度可达218cm/h，处理浓度10g/L的红豆杉多糖溶液速度为4.17L/h，100.08L/d，实验所得产品平均纯度可以达到99％以上，收率为50.9％，分析72小时的连续分离实验数据，发现技术参数稳定，可进一步扩大工业化规模。结合GPC、旋光度测定、IR、GC-MS、13CNMR、1HNMR、高碘酸氧化法、Smith降解以及甲基化方法等分析测试方法，得到PST-1的单糖组成及结构表征，实验结果如下：红豆杉多糖PST-1是重均分子量为3.44×106Da的支链多糖，旋光度为[α]20D=+0.1100（c0.1，H2O）；PST-1单糖组成为：2，4-Dimethoxy-Mannose：Rhamnose：Arabinose：Xylose：Galactose：D-Galacturonic acid：Mannose：D-glucuronic acid=2％：5％：24％：9％：3％：1％：46％：10％；PST-1的骨架结构为：具有1，3，6-连接的β-D-甘露糖残基骨架，侧链分枝包括非还原末端的呋喃型α-L-阿拉伯糖残基、吡喃型α-L-阿拉伯糖残基、β-D-木糖残基、β-D-甘露糖残基、2，4-二氧甲基-β-D-甘露糖残基和α-D-葡萄糖醛酸残基；侧链的糖残基也可能存在2，5-二氧-取代呋喃型α-L-阿拉伯糖基、3-氧-取代的β-D-木糖残基、6-氧-取代的α-D-半乳糖醛酸残基、6-氧-取代的α-D-半乳糖残基、4-氧-取代的α-D-葡萄糖醛酸残基和2-氧-取代的α-L-鼠李糖残基，同时后者也可能穿插在主链上。
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标签：南方红豆杉论文; 多糖论文; 提取脱色分离论文; 离子交换色谱分离论文; 结构鉴定论文;