论文摘要
通过秋水仙素水溶液处理普通黄瓜（Cucumis sativus L．），获得了8种基因型的同源四倍体黄瓜，四倍体‘P01’自交留种后可获得饱满种子。对二倍体衍生出来的单倍体、四倍体进行减数分裂染色体行为、育性方面的相关研究及不同倍性材料DNA基础上遗传差异比较。1．黄瓜同源四倍体的创制及其育性稳定性在室温条件下，通过用0.4％的秋水仙素水溶液处理黄瓜已萌动种子4h，获得8种基因型的黄瓜同源四倍体材料；其中，四倍体‘P01’自交后得到了饱满种子。新合成的同源四倍体的侧枝数减少、叶柄变短、叶面积增大、花器变大，存在一定比率的4孔花粉粒，与以前所得的四倍体类似；但其4孔花粉粒的比率较高（29-54.7％），花粉可染率、萌发率均显著提高。表明新合成的四倍体的育性较高。2．黄瓜单倍体减数分裂及育性研究以3种基因型单倍体黄瓜（2n=x=7）为材料，比较研究减数分裂染色体的行为特征和雌雄配子的育性。与二倍体相比，单倍体花粉母细胞中染色体主要以单价体存在，3种单倍体平均染色体构型公式为：2n=x=6.22Ⅰ+0.37Ⅱ+0.01Ⅲ，32.85％的花粉母细胞可以观察到二价体。终变期，核仁周围有2-4条NOR染色体。中期Ⅰ染色体以3种排列方式分布在细胞中。后期Ⅰ染色体主要以（4+3）形式分向两极，并且经常出现滞后、游离及断裂等异常分离行为。后期Ⅱ主要发生染色单体分离。黄瓜单套单倍体减数分裂染色体行为与二倍体明显不同。单倍体染色体组内部分染色体间有同源性。研究发现，H1单倍体花粉没有活力；H2花粉染色率为2.26％，子房可发育形成果实，但胚败育不能形成种子；H3雌配子有育性，胚能够发育完全，培养后可获得植株。单倍体7条染色体的姊妹染色单体在后期Ⅱ均可发生分离，并且减数分裂过程中有八字形等异常纺锤体的出现。减数分裂后可形成单分孢子到九分孢子，其中四分孢子的比例在各基因型单倍体中均最高。H3单倍体二分孢子、三分孢子的形态异常，比例分别达19.37％和19.72％，接近四分孢子比例。单倍体雌雄配子的育性因基因型而异。其育性的形成可能是7条染色体在后期Ⅱ发生全部染色单体分离的过程中，纺锤体由十字型变异成八字形的结果。3．黄瓜不同倍性材料遗传差异的AFLP分析采用AFLP（Amplified Fragment Length Polymorphism）技术对黄瓜（Cucumis sativus L．）品种‘津绿4号’的单倍体、二倍体和四倍体进行基因组DNA多态性比较。从35对引物扩增获得2188条60-500bp的条带，但多态性位点仅有20个，占0.92％，其中22对引物组合扩增的不同倍性材料的AFLP指纹没有明显差异。在多态性位点表现中，以二倍体的条带存在，单倍体和（或）四倍体的条带丢失为主，在四倍体中扩增出1条特异带。与相应的二倍体相比，单倍体和四倍体有特异片段的消失和增加。