疾病标记物的化学发光免疫分析方法研究

论文摘要

免疫广泛应用于医疗诊断，环境监测等领域。由于抗体抗原具有靶向选择性，所以免疫的主要优点是能特异性的检测物质。化学发光已被广泛应用于抗原抗体的检测，化学发光法是一个基于临床与放射免疫分析法的基本原则的诊断方法，它具有高灵敏度，高选择性等优点，其灵敏度比传统的ELISA法高。量子点是一种半导体的纳米材料，不同尺寸大小的发射波长不同，具有良好的光学性能，此性能可用在同时检测多种组分。本论文主要围绕着免疫分析新方法的建立和应用开展了一系列的研究，对于癌症的早期筛查有着非常重要的意义。全文共分为四章，分述如下：第一章本章综述了免疫分析的基本原理及应用。化学发光免疫分析和荧光免疫分析是两种主要的标记免疫分析方法，对此两大类反应机理及应用作了详细介绍。且介绍了目前有关多种组份同时进行检测的方法。引用文献53篇。第二章建立了一种基于微孔板的化学发光免疫分析方法，将雌二醇小分子作为固定相，用间接竞争免疫分析方法分析血清中雌二醇（E2）。该方法灵敏度为5.94×10-3μg L-1，批内和批间变异均小于10%，回收率在90-110%之间，实际血清样本分析结果和国外商品试剂盒相关性良好。第三章建立了一种基于微孔板的化学发光免疫分析方法，用夹心法来分析血清中心肌蛋白T（cTnT）。该方法灵敏度为1.6μg L-1，批内和批间变异均小于10%，回收率在90-110%之间，实际血清样本分析结果和国外商品试剂盒相关性良好。第四章建立一种基于荧光猝灭的方法同时检测心肌蛋白T与肌红蛋白。该方法操作简单，选择特异性好。

论文目录

• 论文摘要
• Abstract
• 第一章 免疫分析
• 1.1 引言
• 1.2 化学发光免疫分析基本原理
• 1.2.1 固相免疫分析基本原理
• 1.2.2 化学发光机理
• 1.2.3 鲁米诺化学发光体系
• 1.3 荧光免疫分析基本原理
• 1.3.1 荧光的原理
• 1.3.2 量子点
• 1.3.3 量子点在生命科学中的应用
• 1.4 荧光免疫分析方法建立
• 1.4.1 CdTe 量子点的制备
• 1.4.2 量子点标记技术
• 1.5 量子点在分析中的应用
• 1.5.1 量子点测定无机离子
• 1.5.2 量子点测定生物分子
• 1.5.3 量子点在生物体内成像的应用
• 1.6 多组分免疫分析方法
• 1.7 研究展望
• 第二章 化学发光免疫分析法检测人血清中雌二醇的含量
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器试剂
• 2.2.2 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 间接竞争法的原理
• 2.3.2 优化化学发光免疫分析法的相关参数
• 2.3.3 检测时间的优化
• 2.3.4 方法学评价
• 2.4 小结
• 第三章 微板式化学发光免疫分析法测定人血清中的心肌肌钙蛋白 T 的含量
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器试剂
• 3.2.2 实验方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 包被液的酸碱性影响
• 3.3.2 免疫试剂稀释度的选择
• 3.3.3 温育条件的优化
• 3.3.4 检测时间的优化
• 3.3.5 校准品稳定性实验
• 3.3.6 方法学评价
• 3.4 结论
• 第四章 用荧光猝灭法同时检测心肌蛋白 T 和肌红蛋白
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 仪器试剂
• 4.2.2 缓冲液和标准品
• 4.2.3 CdTe 量子点标记抗 cTnT 和 抗 Mb 抗体
• 4.2.4 HRP 标记鼠抗人 Mb 抗体
• 4.2.5 免疫过程
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 荧光猝灭法同时检测两种组分的原理
• 4.3.2 荧光猝灭法分别检测 cTnT 和 Mb 的浓度
• 4.3.3 不同浓度的 Mb 溶液在免疫前后荧光值的变化
• 4.3.4 荧光猝灭法同时检测 cTnT 和 Mb 浓度
• 4.4 结论
• 全文主要结论
• 参考文献
• 附录一 作者简介
• 附录二 硕士期间主要研究成果
• 致谢