唑来膦酸联合甲氨蝶呤对骨肉瘤细胞增殖抑制作用研究

论文摘要

目的:1、观察第三代二膦酸盐类药物唑来膦酸（zoledronic acid,ZOL）及甲氨蝶呤（Methotrexate,MTX）单用在体外对人骨肉瘤细胞株MG63生长的影响。2、进一步研究唑来膦酸与甲氨蝶呤合用对MG63细胞的生长抑制是否具有协同作用。为下一步的试验或临床治疗提供依据。方法:本试验分为单一用药试验、联合用药试验、细胞周期检测三个阶段,采用噻唑盐（MTT）比色法。第一阶段,测定单一使用不同浓度的唑来膦酸与甲氨蝶呤分别在48h,72h,96h对MG-63细胞的生长抑制作用,得出结果后计算IC50值,为第二阶段联合用药提供参考。第二阶段,以适宜配比的唑来膦酸与甲氨蝶呤联合应用,测定其在48h,72h,96h对MG-63细胞的生长抑制作用。并进行统计学分析。第三阶段,采用流式细胞仪检测细胞的生长周期。结果:第一阶段的单药试验结果显示唑来膦酸与甲氨蝶呤对骨肉瘤MG63细胞均有不同程度的生长抑制效应。都有时间-效应、浓度-效应关系。相比之下唑来膦酸作用的时间、浓度依赖性更明显。唑来膦酸对MG63细胞作用72h的IC50值为9.39μmol/L,甲氨蝶呤对MG63细胞作用72h的IC50值为IC50值为50.99mg/L。第二阶段,联合用药试验结果显示单药唑来膦酸组剂量为10μmol/L时,MG63细胞凋亡率分别为48.95%,单用甲氨蝶呤（1、10、100mg/L）时细胞凋亡率为37.68%、45.93%、52.418%,当唑来膦酸（10μmol/L）联合甲氨蝶呤（1、10、100mg/L）时.MG63细胞的凋亡率分别为51.96%、66.77%、69.23%,联合用药组与单药组相比差异有显著性（P＜0.05）。第三阶段试验显示唑来膦酸可将细胞周期阻滞在S期,并可引起细胞凋亡。结论:唑来膦酸与甲氨蝶呤均对人骨肉瘤细胞株MG63有生长抑制作用,均呈时间、剂量依赖关系。唑来膦酸可增强骨肉瘤MG63细胞对甲氨蝶呤的敏感性,两者合用有协同作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略词表
• 前言
• 第一阶段试验 唑来膦酸、甲氨蝶呤单一作用于骨肉瘤细胞系MG-63的研究
• （一） 试验目的
• （二） 材料和方法
• （三） 结果
• （四） 结论
• 第二阶段试验 唑来膦酸、甲氨蝶呤联合作用于骨肉瘤细胞系MG-63的研究
• （一） 实验目的
• （二） 材料和方法
• （三） 结果
• （四） 结论
• 第三阶段试验 唑来膦酸、甲氨蝶呤对于MG-63细胞周期作用的研究
• （一） 试验目的
• （二） 材料和方法
• （三） 结果
• （四） 讨论
• 总结
• 参考文献
• 文献综述
• 在读期间发表论文
• 在读期间参加学术会议
• 致谢