耐甲氧西林表皮葡萄球菌及耐药性检测和同源性分析

论文摘要

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）目前成为医院感染的重要病原菌之一,很多文献报道其发生率持续上升。而凝固酶阴性的耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）的发生率则更高,有报道其发生率为80%或以上。MRSE不仅对甲氧西林耐药,还对其他多种抗菌药物耐药,具耐多药特征,已是临床抗感染化疗的难题之一。本研究对安徽省部分医院临床分离的表皮葡萄球菌进行检测,检出其中的耐甲氧西林表皮葡萄球菌,了解本地区MRSE的检出率,比较两种检测方法,对检出的MRSE进行耐药性检测,为临床防治MRSE感染及合理使用抗生素提供实验依据;并对MRSE进行分子生物学研究,这对于细菌性传染病的监测,传染源追踪、传播途径调查和识别等爆发调查有着非常重要的意义。目的了解本地区MRSE的检出率,比较两种检测方法;对检出的MRSE进行耐药性检测,了解本地MRSE耐药的特点;并对MRSE菌株的同源性进行研究。为临床合理用药和耐药菌的防治提供参考依据。方法采用头孢西丁纸片扩散法及mecA基因PCR法检测出MRSE菌株,并对两种检测方法加以比较。以PCR方法检测出mecA基因作为检测MRSE菌株的金标准,了解头孢西丁纸片扩散法检测MRSE菌株的灵敏度及特异度。采用琼脂稀释法测定分离出的表皮葡萄球菌对17种常用抗生素的最低抑菌浓度（MIC）。以肠道细菌基因间重复一致序列（enterobacterial repetitive integenic consensus,ERIC）为引物结合位点,PCR扩增MRSE基因,并进行同源性分析。结果128株临床分离表皮葡萄球菌中,用头孢西丁纸片法及PCR法对MRSE检出率分别为79.69%（102/128）和85.16%（109/128）,两种方法对MRSE检出率差异无统计学意义。以PCR法检出mecA基因作为判断MRSE的金标准,头孢西丁纸片法灵敏度为88.07%、特异度为68.42%、符合率为88.16%。MRSE对多种抗菌药物耐药显著;除对β-内酰胺类明显耐药外,对红霉素和克林霉素的耐药率均高达98.17%,对氟喹诺酮类（左氧氟沙星和环丙沙星）的耐药率亦超过80%。MRSE对万古霉素、替考拉宁100%敏感,未发现耐药菌株。利用ERIC-PCR检测MRSE的同源性,结果显示部分MRSE菌株间谱型相同。结论头孢西丁纸片法是筛选和确认MRSE菌株的一种可靠、简便的方法。MRSE为多重耐药菌株,耐药形势严峻,部分菌株间存在克隆传播现象,临床必须加强细菌耐药性监测。

论文目录

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• Abstract
• 第一部分 耐甲氧西林表皮葡萄球菌及其耐药性检测
• 1. 前言
• 2. 材料和方法
• 3. 结果
• 4. 讨论
• 参考文献
• 第二部分 耐甲氧西林表皮葡萄球菌分子流行病学研究
• 1. 前言
• 2. 材料和方法
• 3. 结果
• 4. 讨论
• 参考文献
• 附录1
• 附录2
• 附录3 致谢
• 综述 耐甲氧西林表皮葡萄球菌耐药性的研究进展
• 参考文献