论文摘要
我国是一个能源消耗大国,石油供需严重不平衡,已经成为制约我国国民经济发展的重要因素之一。然而,由于各种原因,采油过程中都会有石油烃类的溢出和大量含油废水排放,造成水体和土壤严重的污染。因此,油田生产迫切需要能够提高采油效率以及减少污染排放的清洁生产技术。微生物采油技术（MEOR）利用环境中微生物对原油的作用提高石油产量,具有消耗低、无二次污染等优点,是目前广受关注的减污降耗的油田清洁生产技术。而对油田环境中原本存在的“本源”微生物群落的解析和调控是研究、开发和利用该技术的关键。同时构建原油高效降解菌群,也为提高采油效率和高效处理含油废水奠定了技术基础。本研究采用分子生物学方法T-RFLP和克隆文库分析方法对来自某采油厂的三个区块（联合站,注入井,油井）的污水样和油井采出液样品中的微生物群落结构进行了分析,发现三个区块水样中的细菌群落T-RFLP图谱相似性比较低,说明其群落结构差异很大,同一个区块不同取样点的细菌群落结构差异也较大,细菌的优势种群也各不相同,其细菌群落主要有四个类群:变形杆菌（proteobacteria）,拟杆菌（Bacteroidetes）,脱铁杆菌（Deferribacteres）,以及未确定分类的类群;而在水样古菌群落结构方面,不同区块的古菌群落结构有着明显的差异。同一区块古菌群落结构相对稳定,来自同一地层环境的样品相似性很高,古菌赖以生存的某种特定极端环境条件是决定其群落结构的主要因素。通过利用T-RFLP的方法对油藏中的微生物群落结构进行分析监控,可以避开微生物传统培养方法的各种缺陷,从而更客观准确的掌握油藏土著微生物的种类数量及其在群落中的分配比例,然后为以后按比例构建混合菌剂,进行外源投加,从根本上刺激提高采油微生物的数量和活性提供可靠的理论基础和技术支持。同时,也为以后筛选构建高效原油降解菌群,解决石油污染生物治理问题奠定了良好的理论基础。本次研究还通过电转化的方法将含有原油降解功能基因Lys的质粒PKsphil-2通过电击导入宿主菌S25A1的感受态中,构建出一株具有原油降解功能的基因工程菌PKS25A1。通过原油降解试验,对其原油降解功能进行鉴定。实验结果表明:该工程菌对复杂结构烷烃有较强的降解能力,为高效处理含油废水提供了理论和参数依据综上所述,通过对微生物群落结构的分析,准确的掌握土著微生物的种类和数量,不仅为后续开发和应用减污降耗的油田清洁生产技术提供了理论基础,也为筛选构建高效原油降解菌群,调控油田废水处理中微生物群落结构以及开发高效废水处理工艺提供了理论依据。而构建原油降解基因工程菌的研究,则为原油中重质成份的降解,改善原油流动性,提高采油率;进一步提高含油废水处理效率提供了可靠的技术支持。