（上海市奉贤区古华医院感染科上海奉贤区201499）
【摘要】目的：研究分析结核感染T细胞斑点实验在涂阴结核病患者中的诊断价值。方法：回顾分析本院结核科自2014年1月-2016年3月期间因疑似涂阴结核病而行结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）检查的患者，分析T-SPOT.TB在诊断结核病中的临床价值。结果：最终临床诊断结核病的共69例，排除活动性结核病的患者40例。T-SPOT.TB有反应性64例，T-SPOT.TB无反应性33例。结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）诊断涂阴结核病患者的阳性预测值90.1%，阴性预测值86.8%，灵敏度92.8%,特异度82.5%，准确度89%。结论：结核感染T细胞斑点实验（T-SPOT.TB）在诊断涂阴结核病患者时有较高的临床辅助诊断价值。
【关键词】涂阴结核病；结核感染；T细胞斑点；实验诊断价值
【中图分类号】R521【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2017）08-0200-01
有报道2005年至2014年间我国涂阴肺结核报告发病率增加了24.20%[1]。故对于涂阴结核病患者的早期诊断，寻找一种准确快速可靠的实验室检查显得特别重要。最近几年以结核分枝杆菌特异性γ-干扰素酶联免疫斑点检测技术为基础的T-SPOT.TB试剂盒在我国开始逐步推广使用，已经成为在结核感染诊断方面新的方法。本文通过研究本院109例涂阴疑似结核病患者T-SPOT.TB实验检测结果，评估T-SPOT.TB实验的敏感性及特异性。研究其在涂阴结核病临床诊断价值中的价值。
1.材料与方法
1.1病例资料
选取2014.1至2016.3本院疑似涂阴结核病患者109例，均在其他详细检查基础上同时首次痰三次涂片找抗酸杆菌均为阴性，予以采血样送至上海迪安医学检验所进行T-SPOT.TB实验检测。109例患者中年龄19～91岁，平均年龄（46±21）岁，其中男性65名。见表1。
1.2结核感染T细胞斑点试验方法
利用真空抗凝管采集患者静脉血标本约5ml，通过离心机分离获取外周血单个核细胞，T-SPOT.TB试剂盒由上海复星科技有限公司提供，通过该试剂盒对样本中结核菌致敏T细胞数进行检测。显微镜观察并记录阴性对照孔斑点的数量，同时检测并记录A孔及B孔结核特异性抗原致敏的效应T淋巴细胞的数量。
1.3试验结果判断
根据抗原A孔及抗原B孔的反应判断结果，当无反应性对照孔点斑点数值小于6时，若抗原A孔或抗原B孔斑点数减去无反应性对照孔斑点数大于等于6则为“有反应性”。当无反应性对照孔斑点数大于等于6时，若抗原A或抗原B斑点数大于等于2倍的无反应性对照孔斑点数那检测结果为“有反应性”。检测结果“无反应性”是指血样样本中不含有针对结核杆菌特异的效应T淋巴细胞（阴性）；“有反应性”是指血样样本中含有针对结核杆菌特异的效应T淋巴细胞（阳性）。
2.结果
109例患者中最后有71例临床诊断为结核，38例为排除活动性结核病。71例结核病患者用T-SPOT.TB检测为有反应性有64例，T-SPOT.TB检测无反应性为7例。T-SPOT.TB检测诊断涂阴活动性结核病的灵敏度为92.8％、特异度为82.5％，假阳性率为17.5％，假阴性率为7.2％，正确诊断指数为75.3％，总符合率89％，阳性预测值为90.1％，阴性预测值为86.8％。见表2。
正确诊断指数为75.3％，总符合率89％，阳性预测值为90.1％，阴性预测值为86.8％。
3.讨论
对感染结核杆菌的患者进行早期诊断和治疗是结核病诊治的关键，也是控制结核播散的重要环节。但目前结核病传统诊断方法各有其不足之处。结核菌素试验(PPD)与卡介苗（BCG）和非结核分枝杆菌的抗原成分易发生交叉反应，同时PPD假阳性率高、特异性低。结核分枝杆菌培养是诊断结核病的金标准，但常规培养需要2个月，且细菌培养受到标本细菌数量及质量的影响，部分患者容易出现假阴性。痰涂片检查其敏感性低、特异性差，不能区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌。
T-SPOT.TB是目前γ干扰素释放分析诊断结核感染的最主要方法之一。γ干扰素释放试验是一种利用患者外周血存在的结核杆菌特异性T细胞与结核杆菌特异性抗原CFP-10和ESAT-6反应生成γ干扰素，从而导致患者外周血中γ干扰素水平异常的一种临床结核诊断方法[2～3]。由于在卡介苗菌株及大部分环境分枝杆菌中缺失结核菌特异性抗原ESAT-6和CFP-10片段，故T-SPOT.TB能排除卡介苗接种及大多数非结核分枝杆菌的影响，从而降低假阳性率，提高了该检测的灵敏度及特异度。试验一般2天就能得结果，早期提供了患者结核感染依据，为临床医师及早做出正确的诊断提供帮助，且对于不易获得痰标本的肺结核及痰涂片阴性的肺结核病例的诊断具有重要价值。研究表明，结核感染T-SPOT.TB试验具有高敏感性、特异性。本研究结果显示，T-SPOT.TB检测结核病的灵敏度为９2.7％，特异度为82.5％。
本研究通过对临床数据进行回顾性分析，评价T-SPOT.TB辅助诊断涂阴结核病的临床应用价值，结果显示T-SPOT.TB较其它传统辅助检查方法操作简便、快速,对结核诊断具有较好的敏感度和特异度，值得进一步推广和应用。
【参考文献】
[1]黄飞，刘二勇，夏愔愔，等.2005-2014年全国涂阴肺结核报告发病与死亡现状分析[J].中国防痨杂志，2015，37（5）：473-477
[2]布红丽，智霞萍，张娇月．结核分枝杆菌效应Ｔ细胞斑点试验在临床快速诊断结核病中的应用研究[J].中国药物与临床，2012，12（7）：848-850．
[3]祁明浩，沈凌，叶健，等．γ干扰素释放分析T-SPOT.TB在成年人肺结核诊断中的临床价值[J]．疾病监测，2013，28（2）:115-117．