大黄蛰虫对药拮抗细胞因子促肌瘤有丝分裂的研究

论文摘要

目的:原代培养并建立人子宫平滑肌瘤细胞系,验证生长因子（IGF-I,EGF）对子宫肌瘤细胞增殖的促进作用;采用中药血清药理学方法,观察大黄蛰虫对药含药血清对子宫肌瘤细胞增殖的影响,以及对促子宫肌瘤细胞增殖的刺激因子的影响,旨在从细胞生物学水平探讨大黄蛰虫对药对体外培养的人子宫肌瘤细胞的抑制作用,为临床用药提供实验依据。方法:培养人离体子宫肌瘤细胞,以四唑盐（MTT）比色法检测含药血清作用于体外培养的子宫肌瘤细胞12h、24h、48h、72h的光密度OD值,计算细胞存活率。结果:1、IGF-I、EGF可促进子宫肌瘤细胞增殖。2、大黄蛰虫对药含药血清可直接抑制子宫肌瘤细胞增殖。3、大黄蛰虫对药含药血清可拮抗IGF-I、EGF对子宫肌瘤细胞增殖的影响。结论:1、大黄蛰虫对药含药血清可直接抑制子宫肌瘤细胞增殖,子宫肌瘤细胞是大黄蛰虫对药含药血清发挥治疗作用的靶细胞。2、大黄蛰虫对药含药血清可拮抗IGF-I、EGF对子宫肌瘤细胞的增殖。3、大黄蛰虫对药含药血清可直接抑制子宫肌瘤细胞增殖以及拮抗IGF-I、EGF促肌瘤有丝分裂,部分揭示其破血逐瘀、散结消瘤的分子机制。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 实验设计
• 1 材料和方法
• 1.1 实验材料
• 1.1.1 实验药物
• 1.1.1.1 大黄蛰虫对药
• 1.1.1.2 桂枝茯苓胶囊
• 1.1.2 实验动物
• 1.1.2.1 种属
• 1.1.2.2 分组
• 1.1.2.3 用药方法
• 1.1.2.4 含药血清制备
• 1.1.3 主要试剂
• 1.1.4 主要仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 培养液及试剂配制
• 1.2.1.1 抗菌素液
• 1.2.1.2 无血清DMEM 培养液
• 1.2.1.3 20%完全 DMEM 培养液
• 1.2.1.4 10%完全 DMEM 培养液
• 1.2.1.5 0.25%胰蛋白酶液
• 1.2.1.6 新生胎牛血清
• 1.2.1.7 胰岛素样生长因子-I（IGF-I）
• 1.2.1.8 表皮生长因子（EGF）
• 1.2.1.9 0.01%PBS
• 1.2.1.10 MTT
• 1.3 子宫肌瘤细胞的培养及鉴定
• 1.3.1 子宫肌瘤细胞的培养
• 1.3.1.1 标本来源
• 1.3.1.2 原代培养
• 1.3.1.3 传代培养
• 1.3.2 子宫平滑肌瘤细胞鉴定
• 1.4 实验内容
• 1.4.1 细胞铺板
• 0期'>1.4.2 同步 G₀期
• 1.4.3 检测方法
• 1.4.4 分组与加样
• 1.4.4.1 大黄蛰虫对药含药血清对子宫肌瘤细胞增殖的影响
• 1.4.4.2 大黄蛰虫对药含药血清拮抗刺激因子（IGF-I/EGF）刺激子宫肌瘤细胞有丝分裂的影响
• 试验结果
• 1 统计学处理
• 1.1 大黄蛰虫对药含药血清对子宫肌瘤细胞增殖的影响
• 1.2 大黄蛰虫对药含药血清对IGF-I 刺激子宫肌瘤细胞增殖的影响
• 1.3 大黄蛰虫对药含药血清对EGF刺激子宫肌瘤细胞增殖的影响
• 讨论
• 1 选择大黄、蛰虫对药的依据
• 2 阳性对照药桂枝茯苓胶囊的选定
• 3 大黄蛰虫对药含药血清药理学方法的应用
• 3.1 中药含药血清药理学方法的优越性
• 3.2 中药含药血清药理学实验方法的规范化研究
• 3.3 大黄蛰虫对药含药血清方法的应用
• 4 检测方法的选择
• 5 检测时间的选择
• 6 临床标本的选择
• 7 检测指标的选定
• 7.1 生长因子EGF、IGF-I 与子宫肌瘤
• 7.2 EGF 与子宫肌瘤
• 7.3 IGF-I 与子宫肌瘤
• 8 子宫肌瘤生长的调控因素分析
• 9 大黄蛰虫对药含药血清对子宫肌瘤细胞的抑制作用
• 10 子宫肌瘤的治疗述评
• 11 中医对于子宫肌瘤的认识
• 12 从中西医结合的思路寻找提高疗效的突破点
• 13 正确选择中医治疗子宫肌瘤的适应症
• 问题与展望
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 个人简历
• 发表文章
• 致谢