论文题目: 骨康对骨质疏松性骨折愈合过程Ⅰ、Ⅱ型胶原及CTGF表达的影响
论文类型: 博士论文
论文专业: 中医骨伤科学
作者: 庄洪
导师: 刘庆思
关键词: 骨质疏松性闭合骨折,骨痂体外培养体系,型胶原,结缔组织生长因子
文献来源: 广州中医药大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的:通过建立骨质疏松性闭合性骨折动物模型、建立体外骨痂培养体系,检测骨质疏松性骨折愈合过程中Ⅰ、Ⅱ型胶原及CTGF的表达,探讨中药骨康对Ⅰ、Ⅱ型胶原及CTGF的表达的影响,进一步探讨在骨质疏松背景下骨折的愈合的病理机制,并为防治骨质疏松性骨折提供新的策略。 方法:选择6月龄清洁级雄性SD大鼠80只,均造成闭合性骨折,随机分为四组,即空白组(A组)、骨康治疗组(B组)、睾丸切除组(C组)、睾丸切除+骨康治疗组(D组),每组20只。用10%水合氯醛按0.33ml/100g腹腔注射进行麻醉,剪开鞘膜后,分别将双侧睾丸与附睾分离,切除睾丸,模拟骨质疏松性动物模型,采用骨折发生装置造成闭合性骨折模型,两者结合,模拟骨质疏松性闭合性骨折动物模型,根据分组,术后B、D组灌服骨康溶液,灌胃给药容积为10ml/kg,A、C组按相同容积灌服生理盐水,分别在术后3天、7天、14天、21天处死,在无菌的环境下取出骨痂,于PBS+抗生素(硫酸庆大霉素、链霉素)溶液漂洗2次后,将每个骨痂样本均匀切成1mm大小,放入24孔的组织培养板中,每孔均含有1ml BGJb培养液,置于37℃、95%的空气、5%的CO2的条件下进行培养,24h后进行第一次换液,培养三天后,取出骨痂标本置于液氮冻存。用于以下三个方面的检测:1)用于化学染色,常规石蜡切片,脱蜡脱水,HE和MASSON染色,观察骨痂在不同时相不同干预措施的变化及差异。2)免疫组化,用于检测Ⅰ、Ⅱ型胶原的表达。3)逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Westernblot),分别检测结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA和蛋白质的表达。 结果:1)造模:本次闭合性骨折造模,中段骨折占93.8%,横断骨折占91.3%,其可比性较好。2)骨痂不同时相生长及体外培养情况:骨痂培养体系建立成功,本次实验没有出现污染、组织坏死现象。第一时相(术后第3天),各组均可见断段有淤血块、肿胀,纤维连接,轻微可折断,各组之间无明显差异,B组血肿块相对较小,体外培养生长旺盛。第二时相(术后第7天),A、B、D组可见透明纤维软骨连接,呈竹结样,质地较软,B组平均体积较其他组别大,C、D组仍可见少量暗紫色血肿,机化,体外培养生长旺盛,显微镜下观察B组较其他组别分泌旺盛,A组其次,D、C组较慢,第三时相(术后第14天),C组呈现B组第二时相生长,B、A组骨痂可见钙化沉积显现,质地较硬,体外培养生长速度较第一、第二时相慢,第四时相(术后21天),B、A、D组可见骨样骨痂生长,C组呈现A组第三时相改变,显微镜下观察体外培养生长缓慢,分泌物减少。3)HE染色和MASSON染色:骨折后3天:骨折断端附近骨膜生发层细胞大量增殖,在骨折间
论文目录:
引言
第一部分 文献研究
1 骨质疏松性骨折流行病学
2 骨质疏松性骨折危险因素
3 骨质疏松性骨折病因病理
4 骨质疏松性骨折愈合研究进展
5 骨折愈合过程中生长因子表达的研究进展
6 CTGF的研究进展
7 骨质疏松性骨折与胶原的研究进展
8 骨折愈合的中医理论
9 中药促进骨折愈合的研究进展
第二部分 实验部分
1 实验方法及步骤
1．1 中药骨康方溶液的制备
1．2 闭合性骨折模型的制备
1．3 骨痂组织体外种植体系的建立
1．4 HE染色
1．5 MASSON染色
1．6 Ⅰ、Ⅱ型胶原的检测
1．7 CTGF mRNA和蛋白表达的检测
2 结果与分析
2．1 动物造模结果
2．2 骨痂组织及体外培养情况
2．3 HE染色和MASSON染色
2．4 Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组化结果
2．5 CTGF mRNA和蛋白表达的检测结果
2．6 Western印迹法检测CTGF蛋白的表达结果
3 讨论
3．1 闭合性骨折动物模型的建立
3．2 闭合性骨质疏松骨折愈合的微结构变化及中药骨康的影
3．3 骨折愈合过程中Ⅰ、Ⅱ型胶原的表达及中药骨康的影响
3．4 骨折愈合过程中CTGF的表达及中药骨康的影响
结语
参考文献
中英文对照表
致谢
发布时间: 2005-07-22
相关论文
- [1].中药骨康对骨质疏松骨吸收与骨形成影响的研究[D]. 邵敏.广州中医药大学2001
- [2].骨质疏松骨折愈合过程中IGF-1、TGF-β1、IL-6基因表达及骨痂局部生物力学的实验研究[D]. 张胜利.第四军医大学2001
- [3].原发性骨质疏松症ER和VDR基因多态性、中医证型与骨密度关系的研究[D]. 葛继荣.福建中医学院2004
- [4].氟伐他汀对骨质疏松大鼠骨折愈合影响的实验研究[D]. 杨茂伟.中国医科大学2005
- [5].中药骨康对绝经后骨质疏松症骨质量改善作用的动物实验及临床研究[D]. 刘海全.广州中医药大学2005
- [6].运动加中药骨康对去卵巢大鼠骨质疏松治疗作用的研究[D]. 李爽.广州中医药大学2005
- [7].绝经后骨质疏松症中医证候特征及生存质量研究[D]. 莫传伟.广州中医药大学2005
- [8].骨质疏松对大鼠中晚期骨折愈合的影响及辛伐他汀对大鼠骨质疏松性骨折愈合质量的影响[D]. 王建卫.浙江大学2006
- [9].L-arginine促进骨质疏松性骨折愈合的实验研究[D]. 镐英杰.四川大学2006
- [10].密骨方对去卵巢大鼠骨质疏松性骨折愈合影响的实验研究[D]. 汪学红.湖北中医学院2008
标签：骨质疏松性闭合骨折论文; 骨痂体外培养体系论文; 型胶原论文; 结缔组织生长因子论文;