论文摘要
目的探讨紫杉醇同步放疗治疗小鼠H22肝癌的有效性及安全性,并观察其放射增敏效应。方法（1）将复苏的H22肝癌细胞进行传代培养,分别给予0.006mg/l、0.06mg/l、0.6mg/l、6mg/l、60mg/l、600mg/l浓度的紫杉醇预处理24h,倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法测定紫杉醇对H22细胞的生长抑制作用,计算IC50、IC10值及IC50下的细胞抑制率。用IC10浓度的紫杉醇预处理H22细胞6h、12h、24h、36h、48h后分别给予γ射线照射2Gy,倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT法观察紫杉醇的放射增敏作用。（2）建立小鼠H22皮下移植肝癌模型,随机分为对照组、PTX1、PTX2、PTX3、放疗、同步放化疗1、同步放化疗2、同步放化疗3组（后简称放化疗组）,共8组,每组20只。PTX1-3组分别给予10mg/kg、30mg/kg、60mg/kg紫杉醇;放疗组给予放疗2Gy/d×5d;放化疗1-3组在给予10mg/kg、30mg/kg、60mg/kg紫杉醇后12h给予放疗2Gy/d×5d;对照组不接受治疗。各组于治疗开始后隔日测量肿瘤体积,检测各组肿瘤生长速度,计算q值。第14天各组随机选择8只小鼠,取外周血后处死,剥离肿瘤、摘除小鼠胸腺、脾脏称重,计算各治疗组肿瘤抑制率、胸腺及脾脏指数。血液标本计数白细胞,检测丙氨酸转氨酶活性。肿瘤标本经苏木精-伊红及免疫组化染色后,观察肿瘤标本病理及微血管密度、凋亡指数。并观察各组小鼠治疗后生存期。结果（1）H22细胞抑制率随着紫杉醇浓度的增加而升高,IC50、IC10分别为1.948 mg/l、0.390mg/l,IC50浓度下紫杉醇的细胞抑制率为0.5003。方差分析结果表明不同紫杉醇浓度处理组A值有统计学差异（F=736.945,P=0.000）,除0.006mg/l与0mg/l外（P=0.272）,其他各浓度预处理组间A值两两比较均有统计学差异（P=0.000）。紫杉醇预处理6 h、36h、12 h、24 h、48 h后照射,方差分析结果显示不同预处理时间组间A值有统计学差异（F=53.165,P=0.000）,除24h与48h（P=0.080）、36h与48h（P=0.442）时间组外,其余各组两两比较均有统计学差异（P<0.05）。从第12h起紫杉醇与放射之间出现交互效应（F=10.843,P=0.011）。各预处理时间组的SER分别为:1.24、1.52、1.87、1.95、2.06,随预处理时间延长,放射增敏比逐渐增加,在预处理6 h～12 h期间放射增敏比增速最快,24h后减缓。（2）不同治疗组小鼠体内肿瘤生长速度不同（F=318.152,P=0.000）,各组两两比较差别均有统计学差异（P<0.05）。3个放化疗组的生长抑制率均有不同程度的增加,各组的q值均大于1（1.30±0.19、1.42±0.17、1.50±0.17）。各组肿瘤重量有统计学差异（F=255.730,P=0.000）,PTX1、PTX2、PTX3、放疗、放化疗1、放化疗2、放化疗3组肿瘤重量均小于对照组,抑瘤率分别为5.19%、16.99%、20.57%、31.37%、52.74%、60.04%、70.81%,紫杉醇与放疗存在交互效应（F=21.201,P=0.000）。各放化疗组小鼠胸腺、脾脏指数及白细胞计数均低于对照组（P<0.05）。除放化疗1组外,各放化疗组丙氨酸转氨酶均高于对照组（P<0.05）。紫杉醇与放疗交互效应对白细胞计数（F=0.078,P=0.271）及丙氨酸转氨酶活性（F=0.206,P=0.892）影响无统计学意义。除放化疗1组外,各放化疗组微血管密度均低于对照组（P<0.05）,紫杉醇与放疗交互效应对MVD影响无统计学意义（F=0.245,P=0.865）。各放化疗组肿瘤细胞凋亡指数均高于非联合组（P<0.05）,放疗与紫杉醇交互效应对AI的影响有统计学意义（F=6.381,P=0.001）。PTX1、PTX2、PTX3、放疗、放化疗1、放化疗2、放化疗3组生命延长率分别为13.25%、44.87%、55.13%、32.91%、73.08%、98.29%、59.83%。放化疗2组生存率与各非放化疗组差别均有统计学意义（P<0.01）。结论（1）紫杉醇对H22肿瘤细胞的IC50为1.948 mg/l,IC10为0.390mg/l。IC50浓度的紫杉醇对H22肿瘤细胞呈现为中到高度敏感。IC10浓度的紫杉醇从第12h起出现放射增敏效应。（2）在体内紫杉醇与放疗同步联合对肿瘤的疗效优于非联合,紫杉醇具有放射增敏作用。副作用以血液毒性为主。30mg/kg紫杉醇与放疗同步对生存率影响最具优势。
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