二氮嗪预处理抗缺氧复氧后大鼠海马神经元凋亡作用的研究

论文摘要

目的1、探讨二氮嗪预处理抗缺氧复氧后大鼠海马神经元凋亡的同时,是否对Akt、Bcl-2和Bax蛋白表达产生影响。2、在前一实验的基础上,探讨二氮嗪预处理对缺氧复氧后大鼠海马神经元Bcl-2、Bax蛋白表达的影响是否经或部分经Akt信号通路介导的。方法1、将海马神经元分为正常对照组（A组）、缺氧组（B组）、缺氧+DZ预处理组（C组）、缺氧+DZ+5-HD预处理组（D组）、缺氧+5-HD预处理组（E组）,每次实验每组采用16孔或2孔,实验重复3次。自缺氧前2天开始,缺氧组（B组）、缺氧+DZ预处理组（C组）、缺氧+DZ+5-HD预处理组（D组）、缺氧+5-HD预处理组（E组）分别加入终浓度为DZ 0μmol/L、DZ 100μmol/L、DZ 100μmol/L+5-HD 100μmol/L、5-HD 100μmol/L预处理。复氧后24小时,观察海马神经元状态的变化;四唑蓝比色法行细胞活力测定;流式细胞术检测海马神经元的凋亡率;Western blot法测定海马神经元Akt、Bcl-2、Bax蛋白的表达程度。2、将海马神经元分为正常对照组（A组）、缺氧组（B组）、缺氧+DZ预处理组（C组）、缺氧+DZ+LY294002预处理组（D组）,每次实验每组16孔或2孔,实验重复3次。自缺氧前2天开始,缺氧组（B组）、缺氧+DZ预处理组（C组）、缺氧+DZ+LY294002预处理组（D组）分别加入终浓度为DZ 0μmol/L、DZ 100μmol/L、DZ 100μmol/L+LY294002 50μmol/L预处理。复氧后24小时,观察海马神经元状态的变化;四唑蓝比色法行细胞活力测定;流式细胞术检测海马神经元的凋亡率;Western blot法测定海马神经元Akt、Bcl-2、Bax蛋白的表达程度。结果1、C组较其它三组缺氧组,存活的神经元的数目较多,形态较好,细胞坏死脱落较少,细胞间连接存在;C组海马神经元的活力显著低于A组（P<0.01）,但明显高于其它三组缺氧组（P<0.01）;C组海马神经元的早期凋亡率显著高于A组（P<0.01）,但明显低于其它三组缺氧组（P<0.01）;C组海马神经元与A组比较,Akt、Bcl-2、Bax蛋白表达均增强（P<0.01）,与其它三组缺氧组比较,Akt、Bcl-2蛋白表达增强（P<0.01）,Bax蛋白表达减弱（P<0.01）。2、与C组比较,D组中大量细胞坏死脱落,残余细胞稀疏,失去正常形态,细胞间连接减少;D组海马神经元的活力显著低于C组（P<0.01）,与B组比较差别无统计学意义（P>0.05）;D组海马神经元的早期凋亡率显著高于C组（P<0.01）,与B组比较差别无统计学意义（P>0.05）;D组与C组比较,Akt、Bcl-2蛋白的表达均减弱（P<0.01）,Bax蛋白的表达增强（P<0.01）;与B组比较,Akt、Bcl-2、Bax蛋白的表达差别均无统计学意义（P>0.05）。结论1、二氮嗪预处理使缺氧复氧后大鼠海马神经元的活力提高,早期凋亡率降低。二氮嗪预处理使缺氧复氧后大鼠海马神经元的Akt、Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达减弱。2、二氮嗪预处理使缺氧复氧后大鼠海马神经元Bcl-2蛋白表达增强、Bax蛋白表达减弱是经或部分经Akt信号通路介导的。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 正文
• 前言
• 第一部分 二氮嗪预处理对缺氧复氧后大鼠海马神经元Akt、Bcl-2 和Bax蛋白表达的影响
• 一、材料
• 二、方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 Akt 信号通路与二氮嗪预处理抗缺氧复氧后大鼠海马神经元凋亡作用关系的研究
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附1 中英文简写对照表
• 致谢
• 文献综述1 线粒体凋亡途径与Bcl-2 家族蛋白研究进展
• 文献综述2 ATP 敏感性钾通道与缺血性脑损伤研究进展
• 附2 在学期间已发表及待发表的文章
• 在读期间参与的科研课题