苦木化学成分与质量分析研究

论文摘要

苦木,别名苦树、苦皮树、臭辣子（四川）,苦坛木（河南）,苦胆木,熊胆树、赶狗木（广西）,为苦木科苦木属植物Picrasma quassioides （D. Don） Benn.的干燥枝和叶,味苦,性寒,有小毒,具有清热解毒,祛湿的功效,用于风热感冒,咽喉肿痛,湿热泻痢,湿疹,疮疖,蛇虫咬伤。在我国南方地区较常用,临床上用于治疗感冒、上呼吸道感染、急性扁桃体炎、肠炎、细菌性痢疾、高血压等疾病。苦木作为药用,历代本草均未见记载,《中国药典》（1977年版一部、2010年版一部）有收载,其质量控制方法主要为原植物鉴别、药材性状鉴别、显微鉴别（组织、粉末显微鉴别）及以标准药材为对照的薄层色谱鉴别,上述方法由于缺乏专属性和可定量指标,在实际应用中,难以准确鉴别真伪评价优劣。国内外学者对苦木的化学成分及其分析也有报道,但多报道的是中低极性成分,中高极性及高极性成分的报道鲜见；成分分析有报道对其中的2-3个生物碱成分的含量测定。为此,本课题对苦木进行了系统的化学成分分离鉴定,在此基础上,筛选适宜的指标成分,构建苦木薄层色谱指纹图谱及建立多指标成分同时定量分析方法,为苦木药材质量标准建立提供科学依据。研究内容包括苦木化学成分的系统分离、薄层色谱指纹图谱鉴别、主要成分的含量测定。研究结果如下：1.经反复柱层析（硅胶、凝胶、ODS、大孔树脂等吸附材料）,自苦木中分离得到21个单体化合物。通过理化常数和波谱分析确定化合物结构,包括7个生物碱类（4个铁屎米-6-酮型、2个β-咔巴啉型和1个喹诺里西丁型生物碱）：苦木碱F （4-meth oxy-5-hydroxy-canthin-6-one）、苦木碱D （4,5-dimethoxy-canthin-6-one）、5-甲氧基-铁屎米-6-酮（5-methoxy-canthin-6-one）、阿码罗林（11-hydroxy-canthin-6-one）、苦木碱B（1-methoxicabony-β-carboline）、苦木碱L （1-hydroxymethyl-β-carboline）、槐果碱（sopho carpine）;6个黄酮类（2个二氢异黄酮型和4个异黄酮型）：高丽槐素（maackiain）、三叶豆紫檀苷（trifolirhizin）、3’,7-二羟基-4’-甲氧基异黄酮（calycosin）、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷（ononin）、7-[O-β-apiofuranosyl-（1 "→6"）-β-D-glucopyranosyloxy]-4-methox y-isoflavone、苦参醇O（kushenol O）;3个苦木内酯类：苦木内酯F （nigakilactone F）、苦树素B（picrasin B）、苦味素B（picraqualides B）、2个甾醇：Δ5,22豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（stigmasterol-3-O-β-D-glucopyranoside）、β-谷甾醇（β-sitosterol）;1个香豆素类：7-羟基香豆素（umbelliferone）;1个蒽醌类：大黄素（emodin）;1个糖类：甘露醇（mannitol）。其中11个化合物：槐果碱、高丽槐素、三叶豆紫檀苷、3’,7-二羟基-4’-甲氧基异黄酮、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷、7-[O-β-apiofuranosyl-（1"→6"）-β-D-glucopyranosyloxy]-4-methoxy-isoflavone、苦参醇O、Δ5,22豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、7-羟基香豆素、大黄素、甘露醇为首次从该属植物中分离得到。2.采用薄层色谱法,建立了苦木薄层色谱指纹图谱,以苦木老枝样品中稳定出现的13个峰构建其指纹特征。与随行对照品进行比对,辨认其中的5个特征峰分别为：苦木碱L（3#）、阿码罗林（5#）、苦木碱F（7#）、苦木碱D（10#）和苦木碱B（11#）。应用Chromap 1.51指纹图谱解决方案软件将薄层色谱图像转化成轮廓曲线图并进行相似度评价。结果9批药材[7批老枝（平均直径约为6 cm）、2批根和花]的相似度在0.8659～0.9888之间,苦木叶、嫩枝（直径约为0.5 cm）的相似度在0.4000-0.7001之间。利用苦木HPTLC指纹图谱可以对苦木不同药用部位（老枝、嫩枝、叶）进行鉴别。所建立的方法简便、专属性强,可用于苦木的质量控制。3.建立了苦木药材中苦木碱L、苦木碱B、苦木碱F、苦木碱D、高丽槐素的HPLC分析方法,并测定了14批苦木样品中上述5个指标成分的含量。所测结果为14批样品中苦木碱L、苦木碱B、苦木碱F、苦木碱D、高丽槐素的含量范围分别为0.018～0.638 mg·g-1,0.022-0.889 mg·g-1,0.002～4.382 mg·g-1,0.028～0.696 mg·g-1,0.080～3.017 mg·g-1。不同产地与药用部位的苦木药材中5个指标成分的含量差异较大,苦木老枝中上述5个指标成分的平均含量分别为0.297 mg-g-1、0.285 mg-g-1、1.602 mg-g-1.0.241 mg·g-1、1.408 mg·g-1;花中5个成分的含量分别为0.052 mg·g-1、0.054 mg·g-1、0.500 mg·g-1、0.028 mg·g-1、0.602 mg·g-1;而根中指标成分的含量与花相近,只是没有检测出高丽槐素；嫩枝中只能测定苦木碱B（0.019 mg·g-1）、苦木碱F（0.097 mg·g-1）的含量；叶能检测出苦木碱F外,其余成分均未能检测出。含量顺序为：老枝>花>根)嫩枝>叶。进一步研究发现,同一药用部位,广西收集的样品中4个指标成分的含量比广东样品高,而苦木碱D的含量略低。广西苦木老枝中上述5种成分的含量分别为0.361 mg·g-1、0.478 mg·g-1、3.161 mg·g-1.0.173 mg·g-1、2.011 mg·g-1;广东苦木老枝中的含量分别为0.271 mg·g-1、0.145 mg·g"1、0.795 mg·g-1.0.407 mg·g-1、1.817 mg·g-1。方法学考察表明该方法简便可行、重复性好,可用于苦木药材及其制剂的质量监控。通过以上结果分析可知,薄层色谱指纹图谱结合多指标成分的含量测定,能够用以鉴别和评价苦木药材的质量。本课题对苦木的化学成分进行了系统的研究,结果表明,苦木中主要含有生物碱类、黄酮类与苦木内酯类三大类成份,与文献报道的化合物类型相符。其中,喹诺里西丁型生物碱、黄酮类等化合物为首次从该属植物中分离得到。从植物化学分类学角度分析,丰富了该属植物的化学成分类型。在化学成分研究的基础上,建立了以高效薄层色谱指纹图谱与多指标成分定量为核心的苦木药材质量分析方法,结果表明,不同药用部位与产地对苦木药材质量影响较大。本文所建立的分析方法简便、重现性好、专属性强,可为苦木质量标准的建立以及综合开发提供实验参考依据。

论文目录

• 缩略语
• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 引言
• 第一章 文献查阅
• 第一节 苦树属植物的化学成分研究概况
• 第二节 苦树属植物的药理活性研究概况
• 第三节 质量评价研究
• 参考文献
• 第二章 苦木化学成分研究
• 第一节 实验部分
• 1.1 仪器、试剂与样品
• 1.2 提取与分离
• 1.3 波谱解析及结构鉴定
• 1.4 物理常数和波谱数据
• 第二节 小结
• 第三章 苦木质量分析研究
• 第一节 苦木高效薄层色谱指纹图谱研究
• 1.1 仪器与试药
• 1.2 实验方法
• 1.3 讨论
• 第二节 苦木主要化学成分含量测定
• 2.1 仪器与试药
• 2.2 实验方法
• 2.3 讨论
• 第四章 结语
• 参考文献
• 附图Ⅰ
• 附图Ⅱ
• 在学期间发表论文
• 致谢