吗啡在犬体内的死后再分布及在保存样品中的分解动力学

论文摘要

目的建立生物样品中吗啡的提取及气相色谱（GC）和气相色谱／质谱（GC/MS）检测方法；建立吗啡在犬体内的死后再分布及分解动力学动物模型；研究吗啡在犬体内的死后再分布、保存样品及人尸体血中添加吗啡的分解动力学规律,为吸食海洛因或吗啡中毒（死）案件的法医学鉴定提供实验依据。方法1.心血、组织样品酸水解后加入内标物SKF525A,经氢氧化钠碱化后（pH=9）,三氯甲烷-异丙醇（9：1）萃取,挥干有机溶剂,丙酸酐-吡啶以3：2比例、在微波80火力3min衍生,GC/MS定性、GC内标法定量检测吗啡衍生物。采用SPSS13.0统计软件处理数据,结果以均数±标准差（x±s）表示,t检验。2.将12只杂种犬分为灌胃组、静脉注射组和空白对照组,给药1h后缺氧处死,放置于室温（20℃）条件下,于死后0h、2h、4h、8h、12h、24h、48h、72h、96h取心血、肝脏、脑、肌肉（胸肌、左前肢、右前肢部位）。用液-液萃取衍生化法和气相色谱-氮磷检测器（GC-NPD）检测吗啡衍生化产物含量。3.5只杂种犬静脉注射吗啡后处死,取心血和肝脏,每只犬的样品平均分成4份,放置于20℃、4℃、-70℃（或-20℃）、20℃（1%NaF）或20℃（4%甲醛溶液）不同条件下保存；分别于死后0d、8d、35d和65d取样品,提取检测吗啡含量。4.1300mL人尸体血中加入520mg吗啡,其浓度为400μg/mL,超声4h使其混匀,分别于0d、8d、35d和65d取样品,提取检测吗啡含量。结果1.GC/MS定性分析中,吗啡衍生物的特征离子为341、268、397、218（m／z）：GC定量分析中,吗啡在心血和肝组织中的回归方程、线性检测范围、相关系数、回收率最低检出浓度分别为Y=0.0796X+0.1033、0.2-120μg/mL、0.9962、92.6±0.55（%）和0.02μg/mL（S/N> 3）; Y=0.0457X+0.0656、0.2-120μg/mL、0.9955、90.07μ0.67（%）和0.02μg/mL（S/N>3）。2.在室温（20℃）条件下,吗啡灌胃犬处死后96h内,随着死亡时间延长,心血、肝脏,左前肢肌肉和脑组织中吗啡含量均有显著升高（P<0.05）；右前肢及胸肌肌肉中吗啡含量则无明显变化（P>0.05）。吗啡静脉注射犬处死后96h内,随着死亡时间延长,心血、肝脏、脑、左前肢和右前肢肌肉中吗啡含量均有显著升高（P<0.05）,胸肌肌肉中吗啡含量则无明显变化（P>0.05）。3.保存样品中吗啡的分解动力学：实验结果显示,20℃、4℃、-70℃、20℃（1%NaF）四种不同条件下保存的吗啡中毒犬血及人尸血添加中的吗啡含量逐渐降低；20℃、4℃、-20℃、20℃（4%甲醛）四种不同条件下保存的吗啡中毒犬肝中吗啡含量均无明显变化。结论1.本研究建立的生物样品中吗啡GC/MS检测方法选择性好,定性准确；GC检测简便、快速、灵敏、定量结果准确,可用于吗啡中毒的临床快速检验诊断和吸毒者中毒（死）案件的法医学鉴定。2.建立了吗啡的死后再分布、分解动力学研究动物模型,可应用于吗啡的法医毒物动力学研究。3.吗啡广泛分布于犬脑、体内组织和血液中。吗啡在中（染）毒犬体内可发生死后再分布,静脉注射吗啡组和灌胃吗啡组犬死后心血、肝、脑和左前肢肌肉中吗啡含量均呈现升高趋势,静脉注射吗啡组犬死后右前肢肌肉中吗啡含量呈升高趋势。给药途径和尸体体位不同影响吗啡在犬尸体内的死后再分布4.吗啡在保存犬血存放期间不稳定,分解较快；而相应条件下存放的肝脏中吗啡相对稳定。保存温度和防腐剂对犬肝脏及心血中吗啡的含量变化无影响。

论文目录

• 论文
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 生物样品中吗啡的气相色谱和气/质检测研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第二部分 吗啡在犬体内的死后再分布研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第三部分 吗啡在保存样品中的分解动力学研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 阿片类生物碱的分析和法医毒物动力学研究进展
• 个人简介
• 致谢