毛细管电泳法研究非甾体类药物与蛋白及多肽的相互作用

论文摘要

小分子与生物大分子之间的相互作用已经成为生物、化学领域研究的重要内容。其中血清蛋白与药物分子之间的相互作用是目前研究较为广泛的方面。血清蛋白是血浆中含量最丰富的重要载体蛋白,它能够保持胶体渗透压。由于具有多个结合位点,血清蛋白可以运载多种内源和外源物质。药物与血清蛋白的相互作用,会通过结合-释放可逆过程对药物的药效产生影响。因而,研究药物与血清蛋白的结合不仅可以明确二者之间的配位关系,而且为药物的药效提供了有利的信息,成为药代动力学、生物医学等领域重要的研究内容。毛细管电泳具有仪器简单、分析时间短、分离效率高、样品用量少等特点,已经成为研究分子间相互作用的有力工具。在本文中我们以毛细管电泳为手段,通过研究药物小分子与蛋白之间的相互作用,以获得它们之间相互作用的信息。基于相互作用的原理,我们进一步开展了非甾体类药物与血清白蛋白竞争相互作用的研究,具体内容包括：（1）应用毛细管电泳方法,根据被分析组分迁移率的变化,研究非甾体类药物布洛芬与水杨酸与血清蛋白之间的亲和相互作用,测得了主体与客体分子之间相互作用的结合常数：水杨酸与牛血清蛋白3.92×104 M-1；水杨酸与人血清蛋白5.99×104M-1；布洛芬与牛血清蛋白1.27×106M-1,8.02×104M-1；布洛芬与人血清蛋白2.97×106 M-17.07×104M-1。（2）基于竞争原理,将毛细管电泳方法应用到两种药物配体与一种蛋白受体之间的竞争结合方面。我们研究了布洛芬与水杨酸同时与牛血清白蛋白和人血清蛋白结合时的相互竞争。布洛芬加入到含有固定量的血清蛋白和水杨酸的缓冲溶液中时,导致体系组分迁移率的改变。结果表明布洛芬可以从水杨酸-蛋白的复合物中部分替换出水杨酸。（3）应用毛细管电泳方法分析了非甾体类药物布洛芬与淀粉样多肽的短链肽Aβ1-16之间的相互作用,并计算出二者的结合常数1.42×104M-1。同时采用荧光光谱法研究了二者之间的相互作用,得到结合常数3.6×103M-1与毛细管电泳方法得到的结果基本一致。（4）采用荧光光谱法研究了Aβ1-16与人血清蛋白之间的相互作用。根据荧光强度的变化得出结合常数2.95×105 M-1。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 毛细管电泳方法
• 1.1.1 CE的基本原理
• 1.1.2 电渗流
• 1.1.3 CE分离
• 1.1.4 CE的操作模式
• 1.1.5 亲和毛细管电泳（affinity capillary electrophoresis,ACE）
• 1.1.6 CE的应用与发展
• 1.2 药物-蛋白相互作用
• 1.2.1 常用研究方法
• 1.2.2 CE在药物-蛋白相互作用中的应用
• 1.3 阿尔茨海默病与非甾体类抗炎药
• 1.3.1 β-淀粉样多肽（β-Amyloid protein）
• 1.3.2 AD与炎症
• 1.3.3 非甾体类抗炎药（NSAIDs）
• 1.4 论文的选题
• 第二章 毛细管电泳法研究非甾体类药物竞争结合血清蛋白
• 2.1 引言
• 2.2 主要试剂与设备
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 样品溶液的配置
• 2.3.2 实验条件的选择
• 2.4 结果与讨论
• 2.4.1 实验条件的优化
• 2.4.2 ACE法测定Ibu、Sal与BSA、HSA之间的结合常数
• 2.4.3 Ibu和Sal同SA之间的竞争结合
• 2.5 结论
• 1-16与布洛芬及Aβ_1-16与HSA相互作用的研究'>第三章 Aβ_1-16与布洛芬及Aβ_1-16与HSA相互作用的研究
• 3.1 引言
• 3.2 主要试剂及仪器设备
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 样品溶液的配置
• 3.3.2 毛细管电泳方法
• 3.3.3 荧光方法
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 ACE实验条件的优化
• 1-16之间的结合常数'>3.4.2 ACE测定布洛芬与Aβ_1-16之间的结合常数
• 1-16之间结合常数'>3.4.3 荧光光谱法测定布洛芬与Aβ_1-16之间结合常数
• 1-16与HSA之间的相互作用'>3.4.4 荧光光谱法测定Aβ_1-16与HSA之间的相互作用
• 3.5 小结
• 第四章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间主要的研究成果