论文摘要
目的:建立自体骨髓间充质干细胞移植糖尿病足疗法并评估其临床有效性和安全性。方法:按查表法将符合入选标准的45例伴有严重下肢缺血的糖尿病足患者随机分入移植组或对照组。常规治疗糖尿病足基础上采集移植组患者骨髓液20ml,密度梯度离心和自体血清贴壁培养法分离扩增骨髓间充质干细胞3周。移植前行流式细胞仪鉴定骨髓间充质干细胞,并行裸鼠移植瘤实验、染色体分析和病原学检测细胞安全性。移植时,采用曲马多镇痛麻醉,并采用多点肌肉注射加创面局部注射法将骨髓间充质干细胞植入患肢。疗效观察指标包括静息痛、跛行距离、踝肱指数、磁共振血流成像、溃疡愈合率和截肢率;同时观察有无并发症和不良反应。结果:骨髓间充质干细胞形态学观察呈长梭形,平行、旋涡状排列,流式细胞仪鉴定CD45和CD34阴性,CD44、CD105、CD73、CD90阳性;细胞呈对数生长,扩增3周总量在7.32×108～5.61×109。安全性检测中裸鼠移植瘤实验和病原学检测均阴性,染色体分析未见异常。移植后12周,移植组患肢静息痛、跛行距离较移植前均显著改善（P<0.001）;移植组踝肱指数均值移植后较移植前显著升高（P<0.001）,以上指标移植前后差值均数移植组显著高于对照组（P<0.001）。移植组溃疡愈合率显著高于对照组（P=0.012）。磁共振血流成像评分显示中量以上（≥+2）新生血管比例移植组显著高于对照组（P=0.001）。移植组下肢截肢率显著低于对照组（P =0.040）。移植术中及术后随访未发现并发症和不良反应。结论:本研究建立的自体骨髓间充质干细胞移植疗法可以缓解糖尿病足患者的严重下肢缺血症状,增加侧支循环,改善下肢供血,同时促进足部溃疡愈合,降低截肢率,是一种简易、安全、有效的糖尿病足治疗手段。
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