本文主要研究内容
作者朱姿英,卢克焕,陆阳清（2019）在《转基因诱导永生化鸡细胞系的建立》一文中研究指出：传统上从鸡胚中分离病毒用于疫苗的生产常常不能满足需求,研究从体外培养的细胞中分离病毒的途径成为当前疫苗生产领域的迫切需要。本研究利用体细胞诱导重编程技术建立永生化细胞系,为应用于疫苗制备等研究和生产奠定基础。通过慢病毒载体转染转录调控因子(NANOG, LIN28和C-MYC)重编程鸡成纤维细胞,并稳定培养至100代,获得永生化的细胞,而后逐步去除细胞因子、血清等添加物,优化细胞系培养体系,并对细胞驯化实现悬浮生长,以获得单位体积最大密度的细胞。研究结果表明:通过转基因将NANOG,LIN28和C-MYC 3个因子整合入细胞中表达,细胞系对碱性磷酸酶染色呈阳性反应,端粒逆转录酶(cTERT)基因在细胞系中显著上调,并稳定培养至100代,使得这些细胞具有自我更新特性和永生化的潜能。确定了培养基中的血清替代物KSR浓度为20%,并撤除了培养基中bFGF等生长因子,为细胞大规模培养应用提供了可能。永生细胞实现悬浮生长,细胞生长倍增时间为21.71 h,最大密度为1.3×106 cells/m L。因此,我们通过重编程技术建立了一株稳定的永生化细胞系,并且使它能在低浓度KSR中悬浮培养,这为疫苗制备等研究和生产提供科学依据。
Abstract
chuan tong shang cong ji pei zhong fen li bing du yong yu yi miao de sheng chan chang chang bu neng man zu xu qiu ,yan jiu cong ti wai pei yang de xi bao zhong fen li bing du de tu jing cheng wei dang qian yi miao sheng chan ling yu de pai qie xu yao 。ben yan jiu li yong ti xi bao you dao chong bian cheng ji shu jian li yong sheng hua xi bao ji ,wei ying yong yu yi miao zhi bei deng yan jiu he sheng chan dian ding ji chu 。tong guo man bing du zai ti zhuai ran zhuai lu diao kong yin zi (NANOG, LIN28he C-MYC)chong bian cheng ji cheng qian wei xi bao ,bing wen ding pei yang zhi 100dai ,huo de yong sheng hua de xi bao ,er hou zhu bu qu chu xi bao yin zi 、xie qing deng tian jia wu ,you hua xi bao ji pei yang ti ji ,bing dui xi bao xun hua shi xian xuan fu sheng chang ,yi huo de chan wei ti ji zui da mi du de xi bao 。yan jiu jie guo biao ming :tong guo zhuai ji yin jiang NANOG,LIN28he C-MYC 3ge yin zi zheng ge ru xi bao zhong biao da ,xi bao ji dui jian xing lin suan mei ran se cheng yang xing fan ying ,duan li ni zhuai lu mei (cTERT)ji yin zai xi bao ji zhong xian zhe shang diao ,bing wen ding pei yang zhi 100dai ,shi de zhe xie xi bao ju you zi wo geng xin te xing he yong sheng hua de qian neng 。que ding le pei yang ji zhong de xie qing ti dai wu KSRnong du wei 20%,bing che chu le pei yang ji zhong bFGFdeng sheng chang yin zi ,wei xi bao da gui mo pei yang ying yong di gong le ke neng 。yong sheng xi bao shi xian xuan fu sheng chang ,xi bao sheng chang bei zeng shi jian wei 21.71 h,zui da mi du wei 1.3×106 cells/m L。yin ci ,wo men tong guo chong bian cheng ji shu jian li le yi zhu wen ding de yong sheng hua xi bao ji ,bing ju shi ta neng zai di nong du KSRzhong xuan fu pei yang ,zhe wei yi miao zhi bei deng yan jiu he sheng chan di gong ke xue yi ju 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自基因组学与应用生物学的朱姿英,卢克焕,陆阳清，发表于刊物基因组学与应用生物学2019年08期论文，是一篇关于诱导型重编程论文,鸡永生化细胞系论文,无血清培养论文,慢病毒转染论文,悬浮培养论文,基因组学与应用生物学2019年08期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自基因组学与应用生物学2019年08期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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