论文题目: 毛细管电泳在线富集新技术与方法发展
论文类型: 博士论文
论文专业: 分析化学
作者: 张凌怡
导师: 张玉奎,张维冰
关键词: 毛细管电泳,毛细管电色谱,整体柱,富集
文献来源: 中国科学院研究生院（大连化学物理研究所）
发表年度: 2005
论文摘要: 本论文围绕毛细管电泳、电色谱柱上富集机理与整体材料在选择性富集与分离中的应用开展系统研究。毛细管电色谱在分离富集过程中可能出现一些特殊的、采用一般色谱理论所不能够解释的现象。论文基于电色谱弛豫理论基本思想,从理论上对连续堆积的谱带压缩作用和离子交换电色谱中的特殊峰压缩现象进行了探讨。经表面修饰制备了多种具有不同极性特征、不同分离选择性的毛细管电色谱整体柱,并应用于中药、多肽及蛋白质的选择性富集与分离研究。将聚甲基丙烯酸丁酯电色谱整体柱应用于石芽茶定量分析,并结合柱上浓缩技术,使芹菜素检测限降低到25ng。探讨了微电渗流整体柱的制备条件和操作参数对电渗流的影响,发展了相应的柱上浓缩技术,并将其应用于中药中带电成分的分离检测。合成了乙二胺和亚胺基二乙酸修饰的甲基丙烯酸缩水甘油酯弱阴/阳离子交换电色谱整体柱,并应用于蛋白质与多肽的富集分离研究。基于原位聚合的整体材料,发展了部分填充的Cu (II)-IMAC-CE系统。对合成肽、标准蛋白酶解产物和白血病细胞提取蛋白质及其酶解产物进行了选择性富集和分离,取得了良好的选择性富集效果。该方法适于低丰度蛋白的分离分析,在蛋白质组学研究中具有重要意义。提出了基于络合作用的金属离子毛细管电泳柱上富集原理和方法。通过改变操作条件使得样品区带和背景电解质中溶质具有不同的形态,产生样品区带的局部堆积作用,进而达到富集的目的。
论文目录:
摘 要
Abstract
第一章 文献综述
1.1 基本理论
1.1.1 电泳流
1.1.2 电渗流
1.1.3 区带展宽
1.1.4 改善电色谱分离选择性的方法
1.2 提高检测灵敏度的方法
1.2.1 检测池
1.2.2 高灵敏检测器
1.2.3 衍生化技术
1.3 毛细管电泳中的柱上浓缩技术
1.3.1 场放大作用
1.3.2 大体积样品堆积
1.3.3 等速电泳堆积
1.3.4 溶质形态改变的作用
1.3.5 MEKC中的浓缩技术
1.4 毛细管电色谱中的柱上浓缩技术
1.4.1 场放大作用作用
1.4.2 有机调节剂对场强的影响
1.4.3 固相微萃取过程
1.4.4 自富集现象
1.4.5 连续堆积
1.4.6 电扩散引起的谱带压缩
1.4.7 固定相改变引起的样品局部堆积
1.5 整体柱的制备及其在电色谱富集中的应用
1.5.1 整体柱的制备
1.5.2 整体柱结构的表征
1.5.3 整体柱在电色谱富集中的应用
1.6 本论文的工作
参考文献
第二章 毛细管电色谱峰压缩富集理论
2.1 连续堆积的谱带压缩作用
2.1.1 溶质在柱内的分布
2.1.2 连续堆积判据
2.1.3 连续堆积与操作条件的关系
2.2 离子交换电色谱中的特殊峰压缩现象
2.2.1 考虑溶质在固定相表面迁移的驰豫理论
2.2.2 表面电扩散对保留时间的影响
2.2.3 表面电扩散对柱效的影响
本章小结
参考文献
第三章 毛细管电色谱整体柱的富集技术及应用
3.1 反相毛细管电色谱整体柱的柱上浓缩技术及其在中药分析中的应用
3.1.1 前言
3.1.2 实验部分
3.1.2.1 仪器
3.1.2.2 试剂与材料
3.1.2.3 电色谱整体柱的制备
3.1.2.4 样品的制备
3.1.2.5 电色谱实验
3.1.3 结果与讨论
3.1.3.1 分离条件的优化
3.1.3.2 实际样品的在线浓缩
3.1.3.3 定量分析
3.2 微电渗流毛细管电色谱整体柱性能及其在线富集技术的研究
3.2.1 引言
3.2.2 二元致孔剂微电渗流柱的制备
3.2.2.1 实验部分
3.2.2.1.1 仪器
3.2.2.1.2 试剂与材料
3.2.2.1.3 毛细管的预处理
3.2.2.1.4 整体柱的制备
3.2.2.1.5 电泳条件
3.2.2.2 结果与讨论
3.2.2.2.1 柱性能的评价
3.2.2.2.2 微电渗流电泳柱性能考察
3.2.2.2.3 微电渗流柱的应用
3.3 离子交换整体柱用于蛋白质与多肽的富集和分离
3.3.1 引言
3.3.2 实验部分
3.3.2.1 仪器
3.3.2.2 试剂与材料
3.3.2.3 离子交换整体柱的制备
3.3.2.3.1 甲基丙烯酸缩水甘油酯整体柱的制备
3.3.2.3.2 弱阳离子交换整体柱的合成
3.3.2.3.3 弱阴离子交换整体柱的合成
3.3.3 结果与讨论
3.3.3.1 合成多肽的富集与分离
3.3.3.2 离子交换容量的测定
3.3.3.3 阴离子交换柱对蛋白质的富集
本章小结
参考文献
第四章 部分填充金属螯合整体材料毛细管柱的选择性在线富集技术
4.1 部分填充金属螯合整体材料毛细管柱的制备
4.1.1 引言
4.1.2 实验部分
4.1.2.1 仪器
4.1.2.2 试剂与材料
4.1.2.3 IMAC填料的制备
4.1.2.4 IMAC-CE实验
4.1.3 结果与讨论
4.1.3.1 整体IMAC材料的表征
4.1.3.2 CU(II)-IMAC-CE重复性
4.2 蛋白质与肽的选择性富集与分离
4.2.1 引言
4.2.2 实验部分
4.2.2.1 仪器
4.2.2.2 试剂与材料
4.2.2.3 样品的制备
4.2.2.4 IMAC-CE实验
4.2.3 结果与讨论
4.2.3.1 浓缩与分离条件的优化
4.2.3.1.1 PH的影响
4.2.3.1.2 进样长度的影响
4.2.3.2 样品的浓缩与分离
4.2.3.2.1 合成肽分析
4.2.3.2.2 蛋白质及其酶解产物的分离
参考文献
第五章 毛细管电泳中金属离子的络合富集和分离
5.1 引言
5.2 实验部分
5.2.1 仪器
5.2.2 试剂与材料
5.2.3 电泳实验
5.3 结果与讨论
5.3.1 络合富集原理
5.3.2 络合产生的富集作用
5.3.3 进样区带长度对电渗流的影响
5.3.4 柱容量对富集的影响
5.3.5 背景电解质及其离子强度对富集的影响
5.3.6 络合剂与样品浓度对富集的影响
5.3.7 进样方式的影响
5.3.8 样品溶液离子强度
5.3.9 其它络合剂的作用
5.3.10 络合平衡富集金属离子
本章小结
参考文献
作者简介及发表文章目录
致谢
发布时间: 2007-03-13