慢病毒介导的TNF-β基因对人大肠癌细胞（HCT116）裸鼠移植瘤生长的影响

论文摘要

目的研究慢病毒介导TNF-β基因对人大肠癌细胞HCT116裸鼠移植瘤生长的影响。方法复苏HCT116细胞并进行传代,培养足量HCT116细胞后；将获得的肿瘤细胞接种于裸鼠皮下,建立人大肠癌裸鼠移植瘤模型。将21只成瘤裸鼠随机分为三组,分别为：Lenti-TNF-β组、Lenti组、NS组。对三组裸鼠瘤体内定时、定量多点注射相应干扰物质（即Lenti-TNF-β;慢病毒；生理盐水）进行干预,定期观察裸鼠移植瘤的大小变化及裸鼠的活性,比较干预结束后三组裸鼠的体重、移植瘤的重量、移植瘤的体积有无差别。治疗末处死裸鼠,解剖出移植瘤并称量,比较三组裸鼠移植瘤重量有无差别。计算裸鼠移植瘤体积增大率及抑瘤率并比较三组有无差异。结果Lenti-TNF-β组、Lenti组和NS组治疗末裸鼠移植瘤平均体积分别为（681.73±207.77）mm3、（1454.70±215.95）mm3、（1628.75±390.89）mm3；移植瘤体积平均增大率分别为2.68±2.10、5.49±1.82、6.71±4.19；移植瘤平均重量分别为（0.48±0.20）g、（0.87±0.25）g、（1.07±0.48）g。Lenti-TNF-β组治疗末裸鼠移植瘤平均体积、体积平均增大率及平均重量与NS组比较差异均有显著性（P<0.05）；与Lenti组比较差异也均有显著性（P<0.05）。Lenti组和NS组治疗末裸鼠移植瘤平均体积、体积平均增大率及平均重量比较差异无显著性（P>0.05）。Lenti-TNF-β组肿瘤生长受到明显抑制,抑瘤率为44.38%,明显高于Lenti组和NS组；使用慢病毒介导TNF-β基因处理组的裸鼠移植瘤TNF-β的表达量明显高于NS组及空载病毒组,其差异有统计学意义（P<0.05）。结论病毒介导的TNF-β基因可以在大肠癌细胞HCT116裸鼠移植瘤中高效表达；慢病毒介导TNF-β基因对人大肠癌细胞裸鼠移植瘤生长有较明显的抑制作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 大肠癌HCT116接种细胞的制备
• 1.1 实验目的、原理、设计及材料
• 1.2 实验步骤
• 1.2.1 实验准备
• 1.2.2 细胞培养液的配制与分装
• 1.2.3 胰酶的配制
• 1.2.4 细胞复苏
• 1.2.5 细胞培养
• 1.2.6 细胞传代
• 1.2.7 携带EGFP的慢病毒感染细胞的测定
• 1.2.8 细胞收集
• 第二章 裸鼠实验
• 2.1 资料和方法
• 2.2 裸鼠成瘤预实验
• 2.3 裸鼠成瘤实验
• 2.4 人大肠癌HCT116细胞裸鼠移植瘤瘤体干扰试验
• 2.5 裸鼠移植瘤TNF-β的免疫组化测定
• 2.6 数据分析
• 第三章 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述一 大肠癌的基因治疗
• 参考文献
• 综述二 TNF亚家族与肿瘤关系的研究进展
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 致谢