论文摘要
目的胆管癌是消化道肿瘤中发病率上升较快的恶性肿瘤之一，是继肝癌之后第二大肝胆系统癌肿。和其它恶性肿瘤一样，胆管癌的发生是多因素、多基因相互作用，且在多阶段发挥作用的极为复杂的生物学过程，其发生发展的机理目前尚未研究清楚，在诊断和治疗上也缺乏有效的手段。因此，深入研究胆管癌的发病机制并寻找新的肿瘤标志物和治疗靶目标，具有十分重要的意义。恶性肿瘤的发生发展涉及转化、增殖、凋亡等多个病理机制，这些病理机制与信号转导通路的调节密切相关。有丝分裂原活化蛋白激酶（mitogen-antivated protein kinase，MAPK）是一类丝氨酸／苏氨酸残基的蛋白激酶，是一个重要的细胞外信号转导酶超家族。其作用过程涉及多层次的细胞调节，能将多种细胞外信号通过磷酸化活化逐级传递至细胞核，并激活多种核转录因子，参与细胞生长、发育、分裂及分化等多种生理过程。MAPK包括三个主要亚族：细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated protein kinase，ERK），c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）和p38。它们各自被特定的上游激酶所激活。相应的，MAPK信号转导通路由按顺序激活的三类酶蛋白成员组成，即MAPK激酶的激酶（MAPKKK或MEKK）—MAPK激酶（MAPKK，MEK或MKK）—MAPK。MAPKs可被特定的MEK在苏氨酸／酪氨酸双位点上磷酸化激活，MEK又可被特定的MEKK在苏氨酸／丝氨酸双位点磷酸化激活。每一种MEK可被至少一种MEKK所激活，每一种MAPK又可被不同的MEK激活，构成了MAPK复杂的调节网络。MAPKs被激活后可停留的胞质中，激活一系列其他蛋白激酶，使细胞骨架成分磷酸化，亦可经核转位进入细胞核激活各自的核内转录因子的表达，促进有关蛋白质的合成和通道改变，完成对细胞外刺激的反应。本实验收集62例胆管癌手术切除标本，经石蜡包埋切片，用免疫组织化学法分析比较ERK1、JNK1和p38在胆管癌组织中的表达差异。方法收集1999．1—2005．12期间中国医科大学附属第一医院、第二医院普外科62例手术切除胆管癌病理标本。应用免疫组化方法检测ERK1、JNK1和p38蛋白的表达情况。应用SPSS11.0统计软件对结果进行分析。结果1．ERK1、JNK1和p38阳性染色主要位于细胞核，胞浆中也有少量表达。在所有62例患者中，ERK1、JNK1和p38蛋白低表达分别为28例（45.2％）、40例（64.5％）和36例（58.1％），高表达分别为34例（54.8％）、22例（35.5％）和26例（41.9％）。2．JNK1和p38蛋白表达均与病理分级呈负相关（r=-0.350，P=0.005；r=-0.300，P=0.018），高分化胆管癌组织中JNK1和p38蛋白的含量显著高于低分化的胆管癌组织。ERK1蛋白表达与病理分级呈正相关（r＝0.436，P＜0.0005），低分化胆管癌组织中ERK1蛋白的含量显著高于高分化的胆管癌组织。三者均与年龄和TNM分期无关。3．ERK1蛋白的表达与p38（r=-0.345，P=0.006）蛋白的表达呈负相关，且有统计学意义。JNK1蛋白的表达与p38蛋白的表达（r=0.326，P=0.010）呈明显正相关，且有统计学意义。ERK1蛋白的表达与JNK1（r=-0.140，P=0.278）蛋白的表达呈负相关，但无统计学意义。结论1、在胆管癌组织中ERK1蛋白的表达与病理分化程度密切相关，组织分化程度越差、增生越活跃，ERK1蛋白表达越高。2、在高分化的胆管癌组织中JNK1和p38蛋白的表达显著高于低分化的胆管癌组织。JNK1和p38蛋白的表达可能是一种保护性因素，但是现有资料还不足以说明这个问题，还需要大样本的随访研究来证实。3、在蛋白水平ERK1、JNK1和p38的表达具有一定的联系，其生物学意义还有待进一步的研究。