论文摘要
PTEN（也称MMAC1或TEP1）基因是近年来发现的一种新的肿瘤抑制基因,它是至今发现的第一个具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因,被视为p53后时代最重要的抑癌基因。其产物PTEN蛋白具有脂质磷酸酶活性和蛋白磷酸酶活性,能够使其底物PIP3去磷酸化,从而下调PI3K/AKT细胞信号转导通路的活性。实验证实PTEN也主要是通过作用于PIP3阻断PI3K/AKT信号通路来发挥其抑癌作用的。目前,发现在多种恶性肿瘤组织和肿瘤细胞株中有PTEN基因的缺失或突变及蛋白表达异常。B7-H1又称PD-L1,是近年来发现的一种新的共刺激分子,虽然B7-H1 mRNA广泛表达在人体多种正常组织中,但B7-H1蛋白在正常组织中的表达仅限于巨噬细胞系统来源的细胞。近年来,研究发现B7-H1也表达在多种肿瘤组织和多种肿瘤细胞株中,并在诱导特异性T细胞凋亡和肿瘤免疫逃逸过程中发挥重要作用。关于恶性肿瘤中调节B7-H1蛋白表达的机制,国内外鲜有报道。不久前,国外有学者以神经胶质瘤细胞为研究对象,发现PTEN的缺失导致神经胶质瘤细胞表面B7-H1蛋白分子表达增加并介导免疫抵抗,并提出其机制是通过PI3K/AKT下游的mTOR-S6K通路实现对B7-H1基因翻译水平的调控,从而导致其蛋白表达增加。胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,在我国胃癌的发病率和死亡率居各种恶性肿瘤的首位。目前尚未见有关胃癌组织中B7-H1蛋白表达调节的研究报道。因此,本研究采用免疫组化和Western Blot技术检测胃癌组织中PTEN、B7-H1、S6K与P-S6K的表达情况,探讨胃癌组织中PTEN蛋白与B7-H1蛋白表达的相关性及其机制。方法1.免疫组化检测胃癌组织中PTEN、B7-H1、S6K与P-S6K蛋白的原位表达采用二步法免疫组化检测48例胃癌组织及11例癌旁正常组织中的PTEN、B7-H1、S6K与P-S6K的表达,分析PTEN与B7-H1蛋白在胃癌组织中的表达情况以及它们分别与胃癌患者临床病理学指标的关系,通过连续性切片各个指标的染色分析在胃癌组织中PTEN、B7-H1、S6K与P-S6K原位表达的相关性。2.Western Blot半定量胃癌组织中PTEN、B7-H1、S6K与P-S6K蛋白的表达采用Western Blot技术检测胃癌组织中PTEN、B7-H1、S6K和P-S6K的表达,用Fluorchem分析软件半定量检测结果,分析胃癌组织中PTEN、B7-H1、S6K与P-S6K蛋白表达水平的相关性。3.统计学处理采用SPSS13.0统计学软件对数据进行统计学处理,阳性率之间的比较采用x2检验,两变量之间的相关性分析采用计数资料的相关分析或者Spearman等级相关分析,以α=0.05为检验水准。结果1.免疫组化结果1.1 PTEN原位表达结果胃癌组织中PTEN呈阳性表达,阳性信号主要位于细胞浆,少量位于细胞核内,阳性表达率为43.75%（21/48）,而癌旁正常胃黏膜中PTEN阳性表达率为100%（11/11）,二者之间有统计学差异,P＜0.05。PTEN在胃癌组织中的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的大小无显著相关性（P＞0.05）,与肿瘤的浸润深度、有无淋巴结转移、分化程度、临床分期有显著相关性（P＜0.05）。1.2 B7-H1原位表达结果胃癌组织中B7-H1呈阳性表达,阳性信号主要位于细胞膜,少量位于细胞浆,阳性表达率为62.50%（30/48）,而癌旁正常胃黏膜中未见B7-H1分子的表达,二者之间有统计学差异,P＜0.05。B7-H1在胃癌组织中的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的大小、分化程度无显著相关性（P＞0.05）,与肿瘤的浸润深度、有无淋巴结转移、临床分期有显著相关性（P＜0.05）。1.3胃癌组织中PTEN、B7-H1、S6K与P-S6K原位表达的相关性统计学分析显示:PTEN蛋白与B7-H1蛋白的原位表达明显负相关（P＜0.05）,PTEN蛋白与P-S6K蛋白的原位表达明显负相关（P＜0.05）,B7-H1蛋白与P-S6K蛋白的原位表达明显正相关（P＜0.05）,PTEN蛋白与S6K蛋白的原位表达无关联（P=0.383）,B7-H1蛋白与S6K蛋白的原位表达无关联（P=0.551）。2.Western Blot结果在胃癌组织中,PTEN蛋白与B7-H1蛋白表达水平显著负相关（P＜0.05,r=-0.667）,PTEN蛋白与P-S6K蛋白表达水平显著负相关（P＜0.05,r=-0.610）,B7-H1蛋白与P-S6K蛋白表达水平显著正相关（P＜0.05,r=0.724）,PTEN蛋白与S6K蛋白表达水平不相关（P=0.601）,B7-H1蛋白与S6K蛋白表达水平不相关（P=0.495）。结论1.胃癌组织中存在PTEN蛋白的表达缺失以及B7-H1蛋白的异常高表达,两者均促进胃癌的发生发展。2.在胃癌的发生中,PTEN蛋白表达缺失,可能通过活化PI3K/AKT下游的S6K分子上调了B7-H1蛋白的表达,从而促进胃癌细胞免疫逃避。
论文目录
相关论文文献
- [1].B7-H1信号在脂多糖所致脓毒症小鼠免疫麻痹状态的作用[J]. 社区医学杂志 2017(11)
- [2].膀胱癌组织中B7-H1表达水平及其对经尿道膀胱肿瘤电切术后膀胱灌注治疗效果的影响[J]. 癌症进展 2017(06)
- [3].B7-H1在肝癌中的表达及其对肝癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 中国老年学杂志 2016(08)
- [4].协同刺激分子B7-H1在自发性流产患者的表达及其生物学意义[J]. 江苏医药 2015(08)
- [5].B7-H1启动子荧光素酶报告基因载体的构建及活性检测[J]. 基础医学与临床 2014(07)
- [6].食管鳞状细胞癌组织中B7-H1蛋白和mRNA的表达[J]. 郑州大学学报(医学版) 2009(01)
- [7].胃癌组织中B7-H1的表达及临床意义研究[J]. 浙江医学 2016(01)
- [8].共刺激因子B7-H1蛋白在胆囊癌中的表达及与预后的关系[J]. 肿瘤防治研究 2015(11)
- [9].重症肌无力患者胸腺组织中共刺激分子B7-H1的表达[J]. 郑州大学学报(医学版) 2012(03)
- [10].B7-H1在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及临床意义[J]. 南昌大学学报(医学版) 2012(08)
- [11].共刺激分子B7-H1在重症肌无力患者胸腺组织中的表达[J]. 世界中西医结合杂志 2009(03)
- [12].人类风湿关节炎滑膜中B7-H1分子的表达及意义[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2008(42)
- [13].混合皮肤移植中自体角朊细胞表达B7-H1诱导免疫抑制的相关研究[J]. 中国免疫学杂志 2017(02)
- [14].不同胃癌细胞系中B7-H1分子的表达水平及定位[J]. 解剖学报 2008(01)
- [15].抗人B7-H1单克隆抗体的制备和鉴定[J]. 生物技术通讯 2010(04)
- [16].皮肤恶性肿瘤组织中B7-H1的表达及临床意义[J]. 临床肿瘤学杂志 2014(03)
- [17].过敏性紫癜患者外周血白细胞B7-H1分子的表达[J]. 中国麻风皮肤病杂志 2009(11)
- [18].共刺激分子B7-H1在胃癌中表达上调[J]. 基础医学与临床 2008(05)
- [19].槐定碱调控B7-H1基因逆转人胃癌细胞多药耐药的研究[J]. 新中医 2013(01)
- [20].接受恩替卡韦治疗的慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞B7-H1表达的动态变化[J]. 临床肝胆病杂志 2014(09)
- [21].不同病毒载量慢性乙型肝炎患者树突状细胞B7-H1表达及对免疫功能的影响[J]. 现代生物医学进展 2014(06)
- [22].B7-H1基因rs4143815位点多态性与结直肠癌发病风险的关联研究[J]. 癌变·畸变·突变 2019(06)
- [23].负性共刺激分子B7-H1与乳腺癌细胞化疗敏感性的关系研究[J]. 中国临床医生杂志 2016(12)
- [24].胆囊癌组织中共刺激因子B7-H1和B7-H3蛋白表达与患者预后的关系[J]. 新乡医学院学报 2017(07)
- [25].协同刺激分子B7-H1和B7-H3在乳腺癌的表达及临床意义[J]. 江苏医药 2015(23)
- [26].HIV/AIDS患者B7-H1的表达与合并机会性感染关系的研究[J]. 中国免疫学杂志 2012(11)
- [27].B7-H1和PTEN在结肠癌中的表达及其临床意义[J]. 现代肿瘤医学 2012(04)
- [28].IL-2、IFN-α和IFN-γ上调肾透明细胞癌786-0细胞B7-H1的表达[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志 2010(06)
- [29].B7-H1及其受体PD-1分子在原发性肝癌组织中的表达及临床意义[J]. 世界华人消化杂志 2008(27)
- [30].乳腺癌患者体内B7-H1、PD-1、IL-10的关系分析[J]. 现代诊断与治疗 2015(16)