鸡血藤杀灭鱼类指环虫活性成分的研究

论文摘要

鱼类指环虫病是目前水产养殖的一种很常见的寄生虫病害,大量寄生时常常导致鱼类大面积死亡,造成很严重的经济损失。目前主要使用一些化学药物如甲苯咪唑、吡喹酮等来防治此病。然而这些药物的长期大量使用已经产生了很严重的负面问题—环境污染、食品安全以及抗药性增强等。这就要求人们在防治水产病害的同时不但要注重食品安全的隐患,同时也要避免对环境的污染。植物源渔药因其易降解,对环境友好等特点而日益引起关注,因此,从天然植物中寻找新型的符合绿色健康养殖的水产专用原料药并进行仿生合成对缓解目前的抗药性和水产品安全问题具有重要的意义。本研究以此为出发点开展了杀虫植物鸡血藤活性部位筛选、杀虫活性成分跟踪分离、波谱分析与结构解析等工作,并取得了以下结果:1.鸡血藤杀灭鱼类指环虫活性部位的研究。分别采用5种极性不同的溶剂石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、水对鸡血藤样品进行提取,并对5种溶剂提取物进行活体杀虫活性测定,研究结果表明:鸡血藤甲醇提取物在其浓度为150.0 mg L-1时对中型指环虫的48 h杀灭率为100%,在50.0125.0 mg L-1浓度范围内,其杀虫活性达到57.8% - 98.2%,为杀灭鱼类指环虫的最佳活性部位。2.鸡血藤杀灭鱼类指环虫活性成分的跟踪分离和结构鉴定。鸡血藤经乙醇提取后的浸膏,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、水分别进行萃取,测定不同萃取物对指环虫的杀灭活性,结果显示甲醇萃取部分对指环虫具有很好的杀灭活性。通过对甲醇萃取部分采用柱层析、凝胶过滤层析、重结晶等化学分离方法结合杀虫活性测定,从鸡血藤中分离得到具有杀虫效果的活性单体B4-3-2,其在浓度为3.0 mg L-1时,对金鱼指环虫的平均杀灭率达100%,在0.52.0 mg L-1浓度范围内,对指环虫的平均杀灭率在44.8%-96.6%之间。通过理化性质鉴定和波谱解析,结合文献数据,鉴定此活性单体为芒柄花苷（ononin）。3.对金鱼的急性毒性试验:以健康金鱼为试验动物,研究了鸡血藤甲醇提取物和活性单体芒柄花苷的急性毒性。研究结果表明:鸡血藤甲醇提取物在24 h、48 h、72 h、96 h对金鱼的半数致死浓度（ LC50 ）分别为: 230.39（219.55-242.73）、226.86（216.10-238.66）、217.41（206.78-228.82）、210.56（199.41-222.21） mg L-1;芒柄花苷在24 h、48 h、72 h、96 h对金鱼的半数致死浓度（LC50）分别为:4.66（4.45-4.89）、4.58（4.38-4.80）、4.44（4.23-4.66）、4.27（4.08-4.46） mg L-1。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 水产养殖病害以及防治的研究现状及概况
• 1.1.1 我国水产养殖病害发生现状及趋势
• 1.1.2 水产动物病害防治现状及发展趋势
• 1.2 中草药在鱼类寄生虫病防治上的应用
• 1.2.1 中草药在防治鱼类寄生原生动物上的应用
• 1.2.2 中草药在防治鱼类寄生蠕虫（Helminth）上的应用
• 1.2.3 中草药在防治寄生甲壳动物（Crustacean）上的应用
• 1.3 鸡血藤的研究概况
• 1.3.1 鸡血藤的性状
• 1.3.2 鸡血藤的鉴别
• 1.3.3 鸡血藤的化学成分的研究
• 1.3.4 鸡血藤的药理作用研究
• 1.4 选题的依据和意义
• 第二章 鸡血藤杀灭鱼类指环虫活性部位的研究
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 实验方法
• 2.2 试验结果与分析
• 2.2.1 不同溶剂提取物对中型指环虫的杀灭活性
• 2.2.2 杀虫活性部位
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 第三章 杀灭鱼类指环虫的鸡血藤活性单体的跟踪分离与结构鉴定
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 试验方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 杀虫活性单体的跟踪分离结果
• 3.2.2 杀虫活性成分（B4-3-2）的结构鉴定
• 3.3 讨论
• 3.4 小结
• 第四章 鸡血藤粗提物及其活性成分的安全性评价
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 试验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 鸡血藤提取物和活性单体对金鱼的毒性作用
• 4.2.2 半数致死浓度（LC50）
• 4.3 讨论
• 4.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简介