活血三金汤防治肾结石的实验研究

论文摘要

目的：研究自拟方“活血三金汤”对乙二醇致大鼠草酸钙肾结石模型的影响,其中包括对肾结石结晶程度及成石率比较,血清Mg2+、Ca2+、Urea、Cr含量及肾脏病理形态学观察,探讨“活血三金汤”对大鼠肾结石的疗效及可能的作用机制,并观察活血三金汤对新西兰兔离体输尿管平滑肌的影响和活血三金汤浓缩液急性毒性试验,为临床应用和用药安全性提供一定的实验依据。方法：将70只SPF级雄性SD大鼠,体重200±20g,随机分为空白组10只,模型组、活血三金汤高、低剂量组、阳性对照排石颗粒组各15只,正常喂养一周后,除空白组外,给其余各组大鼠灌胃含1.25%的乙二醇合1%氯化铵混合溶液（2ml/100g）造模,周期共4周。造模1周后,按组别分别开始给药,同时继续给予上述造模药,每日上午定时灌胃,空白组给予同等体积的蒸馏水灌胃。灌胃给药四周后处死大鼠,负压抗凝管腹腔静脉穿刺取血,制血清低温保存送检,检测各组血清Mg2+、Ca2+、Urea.Cr含量；取左肾切片,解剖显微镜下观察结石程度；取部分肾组织4%甲醛溶液固定、染色、切片后在光镜下观察其病理形态变化。另选用健康新西兰白兔4只,处死后取输尿管平滑肌肌条分数段,分别加入一定浓度的活血三金汤和排石颗粒观察药物对正常状态家兔输尿管平滑肌的影响,并用乙酰胆碱为诱导剂,进一步观察药物对乙酰胆碱预收缩家兔输尿管平滑肌的影响,并记录平滑肌肌张力的改变情况。最后,以最大浓度、最大灌胃体积给予小鼠,测其最大给药量。结果：（1）血清生化指标：与空白组相比,模型组Urea,Cr显著升高（P<0.01）,Ca2+升高（P<0.05）；与模型组相比,活血三金汤低剂量组大鼠血清Urea明显低于模型组（P<0.001）,Ca2+明显低于模型组（P<0.01）,Cr低于模型组（P<0.05）,尤其低剂量组Mg2+含量显著高于模型组（p<0.001）,活血三金汤高剂量组大鼠血清Urea,Cr（?）氏于模型组（P<0.05）,Mg2+含量高于模型组（p<0.01）,排石颗粒组大鼠血清Urea, Cr（?）低于模型组（P<0.05）；与排石颗粒组相比,活血三金汤低剂量组血清Urea低于排石颗粒组（P<0.05）,血清Mg2+高于排石颗粒组（p<0.05）。（2）肾结石程度及成石率：空白组肾组织未见草酸钙结晶形成,100%模型组大鼠肾实质内均可见草酸钙结石,大部分肾有成堆的草酸钙结晶分布,呈散状,不连接,少数结晶排列紧密堆积；活血三金汤低剂量、高剂量组和排石颗粒组部分肾脏有少量散在结晶或有微小的游离结晶,成石率分别为33.3%、33.3%和40%。说明给予活血三金汤可以有效预防乙二醇诱发草酸钙结石的生成,从而使活血三金汤高、低剂量组大鼠结石的形成率显著降低（p<0.01）,在成石率和结石形成的程度方面活血三金汤高、低剂量组比排石颗粒组相对较低,但差异不明显。（3）病理形态学观察：与空白组相比,光镜下模型组间质内可见大量慢性炎性细胞浸润,肾小管萎缩,管腔形状不规则,明显扩张充血,上皮细胞水肿,管腔内可见大量的蓝紫色草酸钙小结晶；活血三金汤高、低剂量组间质内可见炎性细胞浸润明显较模型组减少,肾小管萎缩、水肿及充血也较模型组减少,同时与排石颗粒组比较,其改善炎性细胞侵润程度等疗效更佳。（4）家兔离体输尿管平滑肌实验：活血三金汤高剂量组用药后较用药前输尿管平滑肌张力明显降低（p<0.05）说明其具有舒张输尿管平滑肌、降低肌张力的作用；但活血三金汤无抑制乙酰胆碱致输尿管平滑肌收缩的作用,前后两者间无统计学差异。（5）活血三金汤最大给药量为395.2g生药/kg,相当于成人常用量的118倍。结论：活血三金汤对乙二醇致大鼠肾草酸钙结石模型有一定预防和治疗作用,能有效降低模型大鼠血清Urea、Cr、Ca2水平,能明显提高血清Mg2+水平。在抑制草酸钙结石结晶形成,保护肾小管细胞,减少间质炎性细胞侵润,防止肾小管变性、水肿、坏死方面,有一定作用。尤其与排石颗粒相比较,在提高Mg2+含量水平方面有其明显的优势；而通过输尿管平滑肌离体实验,活血三金汤具有舒张输尿管平滑肌的作用,但与排石颗粒比较无显著差别；经急性毒性试验证明,活血三金汤常规剂量使用是安全的。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 引言
• 实验材料
• 1.动物
• 2.药物与试剂
• 3.主要实验仪器
• 统计方法
• 实验内容
• 1.供试品
• 2. 模型复制及给药依据
• 3.活血三金汤对乙二醇致大鼠肾结石模型的影晌
• 4.对家兔离体输尿管平滑肌张力的影响
• 5.活血三金汤急性毒性实验方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 文献综述
• 参考文献
• 附录
• 发表文章目录
• 致谢