米诺环素对实验性视神经炎大鼠视网膜神经节细胞保护作用的实验研究

论文摘要

目的:视神经炎（Optic Neuritis,ON）是累及视神经的急、亚急性炎性或脱髓鞘过程,视网膜神经节细胞（Retinal Ganglion Cells,RGCs）凋亡和轴突损伤是导致视力永久性丧失的最终原因。为探讨米诺环素对脱髓鞘性视神经炎RGCs的保护作用,本实验诱导Wistar大鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）动物模型,在此模型中通过视神经形态学改变证实大鼠脱髓鞘性视神经炎模型的建立,同时运用米诺环素对大鼠脱髓鞘性视神经炎进行干预,通过观察大鼠RGCs凋亡及视网膜神经节细胞中Caspase-3蛋白表达,探讨米诺环素在脱髓鞘性视神经炎中的作用,并与甲基强的松龙比较。方法:22只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组（n=5）和实验组（n=17）,实验组以豚鼠脊髓匀浆加完全弗式佐剂（Complete Freund Adjuvant,CFA）作为抗原,给予17只雌性Wistar大鼠足垫皮下注射,同时在足背皮内注射百日咳杆菌,建立大鼠EAE模型。17只EAE大鼠又随机分为实验对照组（EAE组）、米诺环素组和甲基强的松龙组（MP组）,实验对照组（EAE组）7只,其余每组各5只,米诺环素组自免疫后第8天起每天给予米诺环素45mg.kg-1灌胃,MP组自免疫后第8天起每天腹腔注射甲基强的松龙20mg.kg-1。各组大鼠分别于免疫后第18天处死,观察大鼠视神经及视网膜病理变化,TUNEL法检测RGCs凋亡、免疫组化法检测视网膜神经节细胞中Caspase-3蛋白表达。结果:1. EAE组视神经光镜下表现为神经纤维空泡样变性,轴突不规则肿胀,大量炎性细胞浸润,电镜下表现为轴突内空泡样变性,髓鞘松解脱落,微丝微管消失,EAE大鼠视神经病理变化符合脱髓鞘性视神经炎改变。2.正常大鼠视神经轴突占横切面积比例约为91.65%,EAE组约为26.18%,米诺环素组约为51.09%,MP组约为54.12%,EAE组、米诺环素组与正常组相比,差异均有显著统计学意义（P<0.01）,米诺环素组、MP组与EAE组间的差异均有统计学意义（P<0.05）。3.正常大鼠几乎未见RGCs凋亡,EAE组、米诺环素组、MP组较正常组相比,差异均有显著统计学意义（P<0.01）,EAE组、MP组较米诺环素组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）,MP组与EAE组间的差异有统计学意义（P<0.05）。4.正常大鼠视网膜几乎未见Caspase-3蛋白表达,EAE组、MP组与米诺环素组间的差异均有统计学意义（P<0.05）,MP组与EAE组间的差异有统计学意义（P<0.05）。结论:（1）米诺环素可减轻脱髓鞘性视神经炎轴突损伤,抑制脱髓鞘性视神经炎大鼠RGCs凋亡。（2）甲基强的松龙可以减轻脱髓鞘性视神经炎轴突损伤,但不能阻止脱髓鞘性视神经炎大鼠RGCs凋亡。（3）米诺环素可下调Caspase-3在视网膜中表达,提示米诺环素对脱髓鞘性视神经炎RGCs的保护作用可能是通过抑制Caspase-3活性介导的。

论文目录

• 英汉缩略语名词对照
• 中文摘要
• 英文摘要
• 论文正文：米诺环素对实验性视神经炎大鼠视网膜神经节细胞保护作用的实验研究
• 前言
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 附图
• 文献综述：米诺环素的神经保护作用
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文