论文摘要
紫红獐牙菜（Swertia punicea Hemsl）是龙胆科（Gentianaceae）獐牙菜属（Swertia L.）植物紫红獐牙菜的干燥全草。具有清肝利胆，清热除湿之功效，用于肝炎、胆囊炎、风火牙痛、热淋、疮痈肿毒等症。文献报道，紫红獐牙菜及其富含成分bellidifolin具有抗高血糖作用，也有文献报道bellidifolin具有致突变作用，而麦冬具有降血糖抗突变作用的报道。为了进一步阐明紫红獐牙菜和湖北省独特资源一湖北麦冬抗高血糖的物质基础和作用机制，解决bellidifolin的遗传毒性问题，拟将湖北麦冬与紫红獐牙菜联合用药，以考察两者的协同作用。采用正常Balb／C小鼠和小剂量STZ和高脂饲料诱导的高血糖Balb／C小鼠，对紫红獐牙菜中的部位进行了抗高血糖药理活性筛选。从紫红獐牙菜中分离出乙醚、乙酸乙酯、正丁醇及水溶性四个部位，测定给予上述四个部位后后小鼠的空腹血糖、糖耐量和胰岛素抵抗，筛选活性部位。结果显示，乙酸乙酯部位及水溶性部位在50 mg·kg-1时，对STZ引起的高血糖小鼠的血糖升高有较强的抑制作用（P<0．05），而正丁醇及乙醚部位作用则相对较差。在给予以上四个部位6d后，乙酸乙酯、正丁醇部位及水溶性部位在50 mg·kg-1时，对葡萄糖负荷30 min引起的高血糖小鼠的肠道葡萄糖的吸收有较强的抑制作用（P<0．05），而乙醚部位的作用则相对较差。紫红獐牙菜各部位对小鼠胰岛素抵抗指数均有十分显著降低作用（P<0．01）。对正常Balb／C小鼠空腹血糖，发现仅乙酸乙酯部位在100 mg·kg-1时，有较强的降低血糖作用（P<0．05），而正丁醇及乙醚、水溶性部位无明显降低血糖作用。得出：乙酸乙酯和水溶性部位为主要降血糖活性部位。采用小剂量STZ和高脂饲料诱导的高血糖小鼠模型，测定从紫红獐牙菜中分离的单体bellidifolin和swertianolin降血糖活性。给予这2个单体第0、7、1d后测定空腹血糖。结果，给药7d后bellidifolin在50 mg·kg-1时，对STZ引起的高血糖小鼠的血糖有较强的降低作用（P<0．05），而swertianolin则无显著改善。证明对bellidifolin的活性深入研究意义较大。同时采用小剂量STZ和高脂饲料诱导的高血糖小鼠，对湖北麦冬多糖降血糖活性及糖耐量影响予以研究。结果表明：在给药7d，14d后，湖北麦冬多糖在50 mg·kg-1剂量下，在糖负荷120分，有显著的降血糖活性；在100 mg·kg-1剂量下，在糖负荷60、120分，有非常显著的降血糖活性；说明湖北麦冬多糖具有降血糖活性。进一步将bellidifolin和湖北麦冬多糖配伍，考察其对STZ小鼠空腹血糖和糖耐量的作用，分析两者间协同关系。结果表明：bellidifolin在100 mg·kg-1剂量时，给药14天后有显著的降血糖效果；两者合用在50、100 mg·kg-1剂量时，给药14天后有显著的降血糖效果，但是与bellidifolin单用无显著差异。bellidifolin在25、50 mg·kg-1剂量时，在糖负荷60、120分，有非常显著的降血糖活性；两者合用在25、50、100 mg·kg-1剂量时，在糖负荷60、120分，有非常显著的降血糖活性；但是单用无显著差异。说明麦冬多糖、bellidifolin均有降血糖活性，但两者间无明显协同作用。采用RT-PCR技术，探究了bellidifolin的胰岛素抵抗机理。给药bellidifolin14d后，取小鼠肾组织，提取RNA，对小鼠肾脏PPARγmRNA表达予以研究。结果：bellidifolin在PPARγmRNA表达中未见明显促进PPAR-γmRNA表达作用，其降低血糖活性与PPARγ无明显关系。体内采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验，验证bellidifolin的致染色体突变毒性。结果显示：小鼠bellidifolin最大耐受量MTD为15 g·kg-1，小鼠骨髓嗜多染红细胞微核发生率结果显示紫红獐芽菜单体提取物bellidifolin高、中、低剂量组与阴性对照组比较均无显著性差异（P>0．01）。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核发生率结果显示bellidifolin高、中、低剂量组与阴性对照组比较均无显著性差异（P>0．01）。体外采用鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102四个菌株，对bellidifolin进行Ames试验。Ames试验显示，在试验设置浓度和加S9或不加S9的试验条件下，受试物对各菌株所诱发的回变菌落数，均未超过对照的2倍。提示“bellidifolin”未显有致突变性作用。