丝裂霉素抑制兔角膜新生血管的实验研究

丝裂霉素抑制兔角膜新生血管的实验研究

论文摘要

目的:通过实验的方法探讨丝裂霉素抑制碱烧伤后兔角膜新生血管的作用,探讨了角膜新生血管增生与炎细胞浸润、血管内皮生长因子的表达、CD34的表达之间的关系,同时对丝裂霉素的角膜毒副作用进行对比研究。方法:24只新西兰大白兔随机分成二组,每组12只,检查排除眼部疾病后,双眼用碱烧伤的方法制成角膜新生血管模型,一组右眼(A组)给予生理盐水点眼,4次/日,一组左眼(B组)分别于碱烧伤后第1、10天给予丝裂霉素结膜下注射各一次,二组右眼(C组)给予普南扑灵眼液点眼,4次/日,二组左眼(D组)给予地塞米松眼液点眼,4次/日,每日抗生素眼药点眼预防感染,隔日观测角膜水肿、角膜融解及角膜新生血管生长情况,于7天、14天每组各取半数家兔耳缘静脉空气栓塞法处死,取角膜组织行HE染色及VEGF、CD34免疫组化检测,高倍镜下计数新生血管及多形核白细胞。结果:碱烧伤后24小时内角膜缘血管扩张、充血,3天后角膜缘有血管芽长入,角膜水肿明显,10天后角膜新生血管生长进入高峰,部分出现角膜溃疡,A组有2例出现假性前房积脓,此后炎症反应逐渐减轻,角膜上皮开始生长,多数角膜溃疡愈合,前房积脓吸收。统计学分析结果,丝裂霉素对角膜新生血管有明显的抑制作用(A组与B组相比,新生血管的四种检测结果对比统计分析P值分别为0.000,0.005,0.000,0.000,差异有统计学意义),丝裂霉素抑制角膜新生血管的作用比地塞米松作用稍强(B组与D组相比,新生血管的四种检测结果对比统计分析P值分别为0.078,0.291,0.193,0.046差异无统计学意义),从药物对角膜的毒副作用来看,丝裂霉素后期反应较其轻(B组与D组相比):两个时间组对比,角膜水肿P值为0.000;角膜融解P值为P7=0.000,P14=0.136;HE下多形核白细胞计数:P7=0.034,P14=0.000,差异有统计学意义。结论:非细胞毒浓度丝裂霉素结膜下注射对碱烧伤后兔角膜新生血管具有明显的抑制作用,各组新生血管增生的活体检测、镜下测量微血管数与VEGF和CD34的含量是同步变化的,丝裂霉素的角膜毒副作用明显低于对照组,与普南扑灵、地塞米松相比无明显差异。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 主要符号表
  • 引言
  • 材料与方法
  • 1 材料
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 试验所用主要试剂、药剂
  • 1.3 试验所用仪器、设备与材料
  • 2 实验设计与分组
  • 2.1 实验动物分组
  • 2.2 动物模型的制作
  • 2.3 实验动物的处理
  • 3 检查及检测项目
  • 3.1 角膜水肿
  • 3.2 角膜融解
  • 3.3 角膜新生血管(CNV)面积
  • 3.4 H.E 染色(苏木精-伊红染色)
  • 3.5 VEGF 及CD34 免疫组化染色(S-P 法)
  • 4 统计方法
  • 结果
  • 1 眼前段反应过程
  • 1.1 H.E 染色结果
  • 2 角膜水肿记录结果
  • 3 角膜融解记录结果
  • 4 新生血管面积
  • 5 H.E 下多形核白细胞(PMN)计数
  • 6 H.E 下新生血管计数
  • 7 免疫组化下CNV 计数
  • 7.1 各组免疫组化切片总体描述
  • 7.2 VEGF 染色下CNV 计数
  • 7.3 CD34 染色下CNV 计数
  • 讨论
  • 小结
  • 展 望
  • 参考文献
  • 综述
  • 致谢
  • 作者简历
  • 导师评语
  • 相关论文文献

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