导读:本文包含了蛋白亲和层析法论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:糖化血红蛋白,亲和层析,显色法,床旁检测
蛋白亲和层析法论文文献综述
李新华,赵珂,魏芳,丁文宇,张勇[1]（2016）在《显色型亲和层析法检测糖化血红蛋白的建立及性能评估》一文中研究指出目的利用显色型亲和层析技术,建立一种适用于即时检验的人全血HbA_1c快速定量检测方法。方法采用水溶性蓝色苯硼酸衍生物与HbA_1c糖链特异性结合原理,研制显色型亲和层析定量检测试剂盒。选取472例门诊糖尿病患者的全血标本,检测HbA1c水平,同时进行线性、精密度、特异性、稳定性等评价,并与国外试剂进行对比。结果该试剂盒线性范围为3%~18%,测量下限为1.0%。批内和批间CV均<10%,偏倚可接受(P>0.05)。葡萄糖、糖化白蛋白、果糖胺等常见干扰物对HbA1c定量无明显影响。试剂保存8个月内相对偏差控制在±10%以内。与Bio-Rad HbA_1c试剂盒平行检测472例临床标本,相关性良好(Y=0.180+1.006 X,P<0.01),定量偏差无统计学意义(Z=-1.6,P>0.05)。结论本研究建立了HbA_1c显色型亲和层析快速定量检测方法,各项指标均达到临床检测的要求,可用于全血HbA1c含量的床旁快速检测。(本文来源于《中国糖尿病杂志》期刊2016年10期）
王冬宇,郑喜群[2]（2016）在《Con A亲和层析法在纯化糖蛋白中的应用》一文中研究指出近年来,糖蛋白的结构分析作为其深入研究的关键手段,正越来越受关注。亲和层析法是蛋白质分离纯化的重要途径,在富集目标物中承担着不可或缺的角色。本文概述了外源凝集素Con A为配基的亲和层析在糖蛋白纯化中的应用。(本文来源于《齐齐哈尔大学学报(自然科学版)》期刊2016年05期）
杨建荣[3]（2016）在《亲和层析结合HPLC法检测糖化血红蛋白的色谱条件优化》一文中研究指出目的:通过对各种色谱条件进行探索优化,从而达到一个最佳的检测效果,即得到一个最佳的分离度和较高的准确度。方法:硼酸亲和层析结合HPLC法检测糖化血红蛋白的影响因素很多,比如检测波长、流动相的流速、柱温、流动相A、B的极性大小等。以临床使用的糖化仪的检测条件为参考,结合临床检验标准操作规程的方法,通过改变单一变量,逐步探索完善各个检测条件。结果:最佳的检测结果可以得到较好的分离度和较高的准确度。结论:当检测波长:415nm;流速:2.00ml/mol;进样量:5μl;柱温48-51℃,流动相A pH7.5-8.0,洗脱时间0.3s时,测定糖化血红蛋白可以得到良好的分离度和较高的准确度。(本文来源于《2016年浙江省检验医学学术年会论文汇编》期刊2016-08-24）
陈泉,卓燕玲,许爱娜,咸漠,彭馨莹[4]（2016）在《蛋白A亲和层析法纯化单克隆抗体工艺的优化》一文中研究指出治疗性单克隆抗体药物已成为生物医药领域市场最主要的产品类别。蛋白A亲和层析作为第一步捕获抗体蛋白最为有效的手段仍然在现有单克隆抗体纯化平台中占据主导地位。在本研究中,首先开发了一种基于低p H处理抗体细胞回收液的新型细胞液回收技术,该技术能有效去除宿主相关污染物(非组蛋白宿主杂质蛋白、组蛋白、DNA、蛋白聚合物等),同时保证较高的抗体回收率。通过该技术有效预处理后,蛋白A纯化效率可提高10倍左右,并且有效避免了抗体洗脱液中和后浊度的上升,大大减轻了后续蛋白纯化的压力。同时我们也对酸性处理中各种宿主杂质去除机制进行了研究。然后,预处理的洗脱液再经一步Capto adhere色谱纯化,非组蛋白宿主杂质蛋白降低至5 ppm、DNA小于1 ppb、组蛋白降低至检测限以下、蛋白聚合物小于0.01%。总过程抗体蛋白收率87%。该两步法抗体纯化技术可有效集成至当前主流抗体纯化平台,具有良好的大规模应用价值。(本文来源于《生物工程学报》期刊2016年06期）
吕浩[5]（2015）在《2-甲磺酰基-5-(4-氟苯基)-1，3，4-恶二唑对水稻白叶枯病菌蛋白的亲和层析研究》一文中研究指出本课题组在前期的工作中发现化合物2-甲磺酰基-5-(4-氟苯基)-1,3,4-恶二唑对水稻白叶枯病菌有良好的抑制活性,然而该化合物所作用的水稻白叶枯病菌靶标蛋白并不知晓。本课题拟采用亲和层析技术鉴定2-甲磺酰基-5-(4-氟苯基)-1,3,4-恶二唑作用的水稻白叶枯病菌所蛋白,希望为研究该类化合物与水稻白叶枯病菌的作用机制奠定一定的基础,进而为抑制该病菌的新型、高效、绿色的农药研究和开发提供一定的理论依据。本论文通过对亲和配体2-甲磺酰基-5-(4-氟苯基)-1,3,4-恶二唑进行结构修饰,合成了2-甲磺酰基-5-(4-氟-3-溴甲基苯基)-1,3,4-恶二唑化合物,生物活性测试结果表明,在200μg/m L和100μg/mL的浓度下该化合物对水稻白叶枯病菌的抑制率分别为100.0±2.4%和99.9±3.7%,与亲和配体化合物的抑制率相当(100.0±1.6%和100.0±1.5%),其EC50为11.53±1.47μg/m L,略高于亲和配体化合物的EC50(9.98±1.52μg/m L),说明经修饰过后的化合物的生物活性没有明显下降,可以用于亲和层析介质的制备。将修饰后的化合物2-甲磺酰基-5-(4-氟-3-溴甲基苯基)-1,3,4-恶二唑与琼脂糖凝胶CL-6B共价结合制备成所需要的亲和层析介质,亲和配体的偶联率达到154μmol/g(干胶),满足亲和层析要求。将亲和介质与水稻白叶枯病菌蛋白的粗提液共同孵化,先将未结合的蛋白用洗涤液洗出,然后加入Loading Buffer,在95oC下加热洗脱与亲和层析介质结合的蛋白,然后进行凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,结果表明蛋白分子量大约在68kDa、22 kDa的蛋白可能为亲和配体2-甲磺酰基-5-(4-氟苯基)-1,3,4-恶二唑的靶标蛋白。(本文来源于《贵州大学》期刊2015-06-01）
何振宇[6]（2015）在《亲和层析分离粘虫中肠BBMV中杠柳新苷E的结合蛋白》一文中研究指出本研究以杠柳新苷E为亲和配体,应用亲和层析技术研究了其在粘虫幼虫中肠刷状缘膜囊泡(BBMV)上的结合蛋白,旨在为进一步研究杠柳新苷类杀虫化合物在粘虫中肠BBMV上的作用靶蛋白研究奠定基础。主要研究结果如下:1.选用杠柳新苷E作为配基制作了杠柳新苷E亲和层析柱。以杠柳新苷E为起始反应物,与琥珀酸酐反应生成杠柳新苷E的衍生物,通过HPLC、MS和NMR对衍生物的结构进行了鉴定,结果表明成功合成了杠柳新苷E-半琥珀酸酯;采用碳二亚胺法将杠柳新苷E-半琥珀酸酯与EAH-Sephorase 4B进行偶联,经光谱法测定,偶联率达到4.58mg/ml,符合亲和层析的试验要求。2.应用亲和层析柱从粘虫中肠BBMV中分离纯化到了杠柳新苷E结合蛋白的5条特异性的条带,分别约为240KDa、130KDa、110KDa、80KDa、50KDa。将得到的五条特异性蛋白经过LC-MS/MS质谱检测,最终检测得到荧光素4单加氧酶、NADH脱氢酶、肌动蛋白、Cry1A受体蛋白A等18种结合蛋白。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2015-05-01）
王晓萍,郭晓娜,朱科学,彭伟,周惠明[7]（2015）在《固定化金属亲和层析富集麦胚蛋白金属螯合肽的研究》一文中研究指出利用3种蛋白酶(碱性蛋白酶Alcalase 2.4L、风味蛋白酶Flavourzyme 500MG和木瓜蛋白酶Papain)分别对麦胚蛋白进行酶解,筛选金属螯合率最高的酶解产物,再利用固定化金属亲和层析富集金属螯合肽,并分析金属螯合肽的相对分子质量分布和氨基酸组成。结果表明:在Alcalase 2.4L的酶解作用下,酶解时间200 min时,酶解产物的金属螯合率达到最大值(69.62±0.96)%。以此麦胚蛋白酶解物通过固定化金属离子亲和层析富集得到的组分,相对分子质量集中在180~2 000,谷氨酸(Glu)和天冬氨酸(Asp)的含量分别高达(22.64±1.50)%和(14.93±0.24)%。(本文来源于《中国粮油学报》期刊2015年03期）
易秋分[8]（2015）在《谷胱甘肽亲和层析介质制备及其对蛋白的纯化》一文中研究指出谷胱甘肽-S-转移酶融合表达系统是通过大肠杆菌进行蛋白表达、纯化和检测的重要系统。此系统表达的蛋白一般在N末端融合上可溶性谷胱甘肽-S-转移酶作为标签。由于谷胱甘肽-S-转移酶与谷胱甘肽能够特异性的结合,因此可以通过谷胱甘肽亲和层析介质对谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白进行分离、富集和纯化。以琼脂糖凝胶4 FF为基质,1,4-丁二醇二缩水甘油醚为活化剂,通过活化、偶联谷胱甘肽(GSH),优化活化及偶联条件,得到GSH亲和层析介质。实验结果表明：活化及偶联的优化条件为10 mL基质加入0.42gNaOH,15mLDMSO,15mLBDGE,反应温度为40℃,反应时间为6 h。在此条件下,环氧基修饰密度可达60-65 μmol/mL;当偶联溶液pH 6.5时,所制备的自制介质载量可达14.19±0.98 mg/mL。以此介质对谷胱甘肽-S-转移酶及融合蛋白进行纯化,结果表明该介质纯化效果较好、稳定性较搞,可重复使用。丙氨酸脱氢酶(alanine dehydrogenase, EC 1.4.1.1)是一种以烟酰胺腺嘌呤(NAD+)为辅酶的氨基酸脱氢酶,可逆催化丙氨酸的氧化脱氨反应生成丙酮酸,氨以及NADH。晶体结构解析酶蛋白空间结构为深入阐述酶的催化机理提供更为有利的条件。本文以巨大芽孢杆菌WSH-002菌株(Bacillus. Megaterium WSH-002,GenBankNo.345442329)基因组为模版,将目的基因克隆到表达载体,得到重组质粒pET-28a-Ald、 pGEX-6P-1/Ald,并分别转入到BL21(DE3), IPTG低温诱导后均为大量可溶性表达。菌体上清液分别经商业镍柱、自制GSH层析柱和尺寸排除色谱纯化后均获得高纯度的Ald WSH-002蛋白。对高纯度蛋白采用晶体生长试剂盒筛选初步结晶条件并优化。蛋白浓度为12 mg/mL,结晶溶液为0.03 M柠檬酸pH7.5,16%(w/v) PEG3350时,晶体衍射率为2.22A属于叁方晶系；蛋白浓度15 mg/mL,结晶溶液为0.1M HEPES pH 8.0,12%(w/v) PEG 8000,8%(v/v) ethylene glycol,晶体衍射率为2.35A,属叁方晶系。(本文来源于《天津科技大学》期刊2015-03-01）
陈雨,杜娟,胡莹莹,齐志宏,张辉[9]（2014）在《亲和层析高效液相法检测糖化血红蛋白的性能验证》一文中研究指出目的验证亲和层析高效液相法检测糖化血红蛋白的性能。方法参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP5、EP6、EP9文件对亲和层析高效液相法糖化血红蛋白分析仪的正确度、不精密度、检测范围、携带污染率、方法学比对和干扰性进行验证。结果正确度与靶值接近。不精密度分别为0.82%,0.72%和0.79%。糖化血红蛋白浓度在5.2%~18.8%区间,线性相关良好(r2=0.999)。检测浓度在4.9%~15%区间,携带污染率为0.12。全血和稀释模式数据最大偏差为0.1。Premier Hb9210与VariantⅡ仪器比对:r2=0.996,线性回归分析方程y=1.0001x-0.003,t检验(n=40),t=0,P=1.43。干扰试验中含变异血红蛋白的标本,亲和层析高效液相法结果与血糖结果相关性:HbJ组,r=0.93;HbF组,r=0.83,离子交换高效液相法与血糖相关性:HbJ组,r=0.024;HbF组,r=0。结论亲和层析高效液相法设备各项性能参数符合CLSI文件要求,适用于临床检测。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2014年16期）
曹振,张亮,何丽珊,郭素琴,南铁贵[10]（2014）在《利用单抗亲和层析纯化棉花种子中Bt CrylAc蛋白方法的研究》一文中研究指出以转基因抗虫棉国欣3号和国欣6号种子为材料,通过可溶性蛋白提取、硫酸铵沉淀、抗体亲和层析的方法,提取纯化了转基因抗虫棉中所表达的Bt CrylAc蛋白。得到的Bt CrylAc蛋白质达到电泳银染纯度。该亲和层析方法较常规提取方法在蛋白纯度方面有较大的提高并可以大量制备,所得到的Bt CrylAc蛋白可用于转基因生物安全研究。(本文来源于《中国棉花学会2014年年会论文汇编》期刊2014-08-08）
蛋白亲和层析法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
近年来,糖蛋白的结构分析作为其深入研究的关键手段,正越来越受关注。亲和层析法是蛋白质分离纯化的重要途径,在富集目标物中承担着不可或缺的角色。本文概述了外源凝集素Con A为配基的亲和层析在糖蛋白纯化中的应用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
蛋白亲和层析法论文参考文献
[1].李新华,赵珂,魏芳,丁文宇,张勇.显色型亲和层析法检测糖化血红蛋白的建立及性能评估[J].中国糖尿病杂志.2016
[2].王冬宇,郑喜群.ConA亲和层析法在纯化糖蛋白中的应用[J].齐齐哈尔大学学报(自然科学版).2016
[3].杨建荣.亲和层析结合HPLC法检测糖化血红蛋白的色谱条件优化[C].2016年浙江省检验医学学术年会论文汇编.2016
[4].陈泉,卓燕玲,许爱娜,咸漠,彭馨莹.蛋白A亲和层析法纯化单克隆抗体工艺的优化[J].生物工程学报.2016
[5].吕浩.2-甲磺酰基-5-(4-氟苯基)-1，3，4-恶二唑对水稻白叶枯病菌蛋白的亲和层析研究[D].贵州大学.2015
[6].何振宇.亲和层析分离粘虫中肠BBMV中杠柳新苷E的结合蛋白[D].西北农林科技大学.2015
[7].王晓萍,郭晓娜,朱科学,彭伟,周惠明.固定化金属亲和层析富集麦胚蛋白金属螯合肽的研究[J].中国粮油学报.2015
[8].易秋分.谷胱甘肽亲和层析介质制备及其对蛋白的纯化[D].天津科技大学.2015
[9].陈雨,杜娟,胡莹莹,齐志宏,张辉.亲和层析高效液相法检测糖化血红蛋白的性能验证[J].中国卫生检验杂志.2014
[10].曹振,张亮,何丽珊,郭素琴,南铁贵.利用单抗亲和层析纯化棉花种子中BtCrylAc蛋白方法的研究[C].中国棉花学会2014年年会论文汇编.2014