论文摘要
目的研究不同磁感应强度的脉冲工频电磁场辐射对大鼠前软骨干细胞（PSCs）增殖的影响;探讨转化生长因子-β3（TGF-β3）体外诱导大鼠前软骨干细胞向成软骨方向分化的可行性以及剂量效应关系。方法体外分离纯化培养大鼠前软骨干细胞,取第3代前软骨干细胞,置于不同磁场感应强度的工频（50Hz）脉冲电磁场中辐射处理（每日2次,每次持续45min）,根据不同的电磁场感应强度（0.1 mT、0.5 mT、1.0 mT和1.5 mT）分为4组,同时设一对照组（不加电磁场干预）,采用MTT法、流式细胞术测定细胞增殖和细胞凋亡情况,Western Blot法分析Bcl-2蛋白表达情况;将分离纯化的大鼠前软骨干细胞置于含有不同剂量TGF-β3的诱导培养液中培养,并依据培养液中TGF-β3的浓度分为5个实验组和1个对照组（不含TGF-β3）,观察细胞生长情况,分别进行Ⅱ型胶原的免疫组织化学检测及逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测Ⅱ型胶原mRNA表达。结果不同磁场强度的工频脉冲电磁场辐射均明显促进前软骨干细胞增殖,但不同磁场强度的电磁场促增殖的效应也不同,其中1.0 mT组的促增殖效果最为显著,实验48h内细胞增殖水平无明显变化,工频脉冲电磁场干预96h后细胞的增殖水平提高显著（P<0.05）,各实验组细胞凋亡率均明显降低（P<0.05）,Bcl-2凋亡蛋白的表达增强;细胞在诱导培养液中生长良好,免疫组织化学检测对照组Ⅱ型胶原表达阴性,而含TGF-β3的诱导培养液诱导的各组细胞Ⅱ型胶原表达均阳性,其中10μg/L组阳性率最高,RT-PCR的半定量检测也显示10μg/L组Ⅱ型胶原mRNA的表达量最大,与其它各组相比较,差异均有显著意义（P <0.05）。结论工频电磁场能促进大鼠前软骨干细胞增殖,并可能通过上调Bcl-2蛋白的表达从而抑制细胞凋亡,均与磁感应强度及作用时间相关,1.0 mT为促进前软骨干细胞增殖的最佳磁感应强度;TGF-β3在体外能有效诱导PSCs向软骨细胞定向分化,其对PSCs的促分化作用存在剂量依赖性。