STAT6反义寡核苷酸对哮喘小鼠脾淋巴细胞影响作用的研究

论文摘要

目的:研究STAT6 反义寡核苷酸对哮喘小鼠脾淋巴细胞的影响作用。方法:实验细胞分组:正常鼠空白组（A 组）、正常鼠OVA 组（B 组）、哮喘空白组（C 组）、哮喘OVA 组（D 组）、哮喘治疗组（E 组）。正常设计并人工合成一段互补于小鼠STAT6 mRNA 翻译起始区271～290 的反义寡核苷酸片段,全链硫代修饰。用卵白蛋白和氢氧化铝复制哮喘模型,用淋巴细胞分离液分离脾淋巴细胞,进行体外培养并导入由阳离子脂质体转染剂Geneshuttle 携带的反义寡核苷酸,分别用RT-PCR 及免疫细胞化学观察脾淋巴细胞中STAT6 mRAN 的转录及STAT6 蛋白的表达水平,同时采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定脾细胞培养上清液中IL-4 的浓度。结果:D 组脾淋巴细胞中STAT6 mRNA 表达水平（2.26±0.52）明显高于A 组（1.16±0.48）、B 组（1.34±0.36） 、C 组（1.20±0.24）、E 组（1.17±0.43）,均具有显著性差异（P 均<0.01）,STAT6 ASODN 转染后,E 组脾淋巴细胞中STAT6 mRNA 表达水平显著低于D 组（P <0.01）;免疫细胞化学结果显示导入反义寡核苷酸后,E 组STAT6 蛋白的表达明显减少;D 组脾淋巴细胞培养上清中IL-4 分泌水平（43.68±5.5 pg/ml）明显高于A 组（24.1±7.7 pg/ml）、B 组（29.63±8.9 pg/ml） 、C 组（28.49±6.3 pg/ml）、E组（26.47±8.4 pg/ml）,均具有显著性差异（P 均<0.01）,STAT6 ASODN 转染后, E 组培养上清中IL-4 分泌水平显著低于D 组（P<0.01）。结论:STAT6 ASODN 可特异性抑制哮喘鼠脾淋巴细胞中STAT6 mRNA 的转录及STAT6 蛋白的表达,并且能特异性抑制脾淋巴细胞中IL-4 的分泌,为反义技术治疗哮喘提供了依据。

论文目录

• 前言
• 材料与试剂
• 实验方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述正文
• 综述参考文献
• 个人简历
• 致谢