论文摘要
侵袭性垂体腺瘤生物学行为介于恶性垂体癌与良性垂体腺瘤之间,细胞形态学上大多与非侵袭性腺瘤相同,但具局部侵袭能力,引起更加严重的神经系统和内分泌系统症状,常规手术治疗难以完全切除,而且存在远期复发。其独特的生物学特性至今未完全了解,无法明确界定。临床工作迫切需要新型诊断、治疗策略。而垂体腺瘤细胞增殖缓慢,体外培养难以长期存活并保持稳定的增殖活性和分泌功能,给相关研究增加困难。为了突破缺乏人垂体腺瘤细胞系的困难,寻找具有指导意义的检测标记物和预防复发的治疗药物,本研究根据临床普遍采用的侵袭性垂体腺瘤定义,收集“侵袭性垂体腺瘤”和“非侵袭性垂体腺瘤”进行原代细胞培养,采用体外侵袭小室模型评价不同侵袭能力腺瘤细胞的侵袭性,用半定量RT-PCR和免疫组织化学方法比较不同来源垂体腺瘤细胞上皮钙粘蛋白表达差异,并检测甲基转移酶抑制剂5-氮-2’-脱氧胞苷对细胞侵袭性的影响和作用机制。结果显示,不同垂体腺瘤细胞原代培养贴壁情况和活性各异,主要与取材部位、取材方法、培养基成分、培养方法相关,不同患者、不同细胞间存在个体差异;在原代培养4-7天细胞活性最好,纯度高。原代培养细胞接种于体外侵袭小室模型中,侵袭性垂体腺瘤细胞表现出的侵袭性强于非侵袭性垂体腺瘤细胞,而弱于高度恶性的上皮来源肿瘤细胞,与临床定义的垂体腺瘤细胞侵袭性相符。加入5-氮-2’-脱氧胞苷可使侵袭性降低,同时检测到在侵袭性垂体腺瘤中表达相对降低的上皮钙粘蛋白表达增强。提示上皮钙粘蛋白表达降低可能与侵袭性相关,原因可能为启动子区过甲基化,而5-氮-2’-脱氧胞苷则可能通过去甲基化途径提高上皮钙粘蛋白表达强度,从而在一定程度上降低细胞侵袭性。
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