本文主要研究内容
作者杜家欢（2019）在《紫花苜蓿（Medicago sativa）缺铁相关bHLH转录因子的克隆及遗传转化》一文中研究指出：铁是植物生命活动必需的微量元素之一,土壤中有效铁含量较低,易导致植物缺铁。bHLH转录因子家族在植物体内发挥重要的调控作用,有bHLH转录因子参与植物缺铁响应。本研究从紫花苜蓿中克隆得到MsbHLH115基因,构建pBI121-MsbHLH115植物表达载体转入烟草中,并对MsbHLH115基因的表达模式进行了初步研究,取得的主要研究结果如下:1.MsbHLH115基因的克隆与序列分析根据紫花苜蓿铁胁迫下转录组测序序列设计克隆引物,利用RT-PCR方法克隆获得MsbHLH115基因,该基因全长为780 bp,编码259个氨基酸。MsbHLH115蛋白含有一个HLH结构域。经NCBI protein BLAST分析,发现MsbHLH115与MtbHLH115氨基酸相似性为96%。通过对MsbHLH115氨基酸序列的预测和生物信息学分析,构建了三级结构模型和系统进化树。2.MsbHLH115植物表达载体构建构建了pBI121-MsbHLH115植物表达载体,含有Ca MV35S启动子和卡那霉素(Km)抗性。3.MsbHLH115基因对烟草的遗传转化将pBI121-MsbHLH115重组质粒转入到GV3101感受态中,利用叶盘法将MsbHLH115转化至模式植物烟草中,PCR鉴定获得2株转基因阳性苗。4.MsbHLH115基因的表达特性qRT-PCR检测了MsbHLH115基因在不同非生物胁迫下的紫花苜蓿中的相对表达量。发现MsbHLH115基因受高铁缺铁胁迫强烈诱导表达,主要的表达部位是根部,茎、叶中表达量极低;MsbHLH115基因响应盐胁迫下调表达、响应碱和干旱胁迫上调表达,响应ABA上调表达,不响应茉莉酸甲酯。
Abstract
tie shi zhi wu sheng ming huo dong bi xu de wei liang yuan su zhi yi ,tu rang zhong you xiao tie han liang jiao di ,yi dao zhi zhi wu que tie 。bHLHzhuai lu yin zi jia zu zai zhi wu ti nei fa hui chong yao de diao kong zuo yong ,you bHLHzhuai lu yin zi can yu zhi wu que tie xiang ying 。ben yan jiu cong zi hua mu xu zhong ke long de dao MsbHLH115ji yin ,gou jian pBI121-MsbHLH115zhi wu biao da zai ti zhuai ru yan cao zhong ,bing dui MsbHLH115ji yin de biao da mo shi jin hang le chu bu yan jiu ,qu de de zhu yao yan jiu jie guo ru xia :1.MsbHLH115ji yin de ke long yu xu lie fen xi gen ju zi hua mu xu tie xie pai xia zhuai lu zu ce xu xu lie she ji ke long yin wu ,li yong RT-PCRfang fa ke long huo de MsbHLH115ji yin ,gai ji yin quan chang wei 780 bp,bian ma 259ge an ji suan 。MsbHLH115dan bai han you yi ge HLHjie gou yu 。jing NCBI protein BLASTfen xi ,fa xian MsbHLH115yu MtbHLH115an ji suan xiang shi xing wei 96%。tong guo dui MsbHLH115an ji suan xu lie de yu ce he sheng wu xin xi xue fen xi ,gou jian le san ji jie gou mo xing he ji tong jin hua shu 。2.MsbHLH115zhi wu biao da zai ti gou jian gou jian le pBI121-MsbHLH115zhi wu biao da zai ti ,han you Ca MV35Sqi dong zi he ka na mei su (Km)kang xing 。3.MsbHLH115ji yin dui yan cao de wei chuan zhuai hua jiang pBI121-MsbHLH115chong zu zhi li zhuai ru dao GV3101gan shou tai zhong ,li yong xie pan fa jiang MsbHLH115zhuai hua zhi mo shi zhi wu yan cao zhong ,PCRjian ding huo de 2zhu zhuai ji yin yang xing miao 。4.MsbHLH115ji yin de biao da te xing qRT-PCRjian ce le MsbHLH115ji yin zai bu tong fei sheng wu xie pai xia de zi hua mu xu zhong de xiang dui biao da liang 。fa xian MsbHLH115ji yin shou gao tie que tie xie pai jiang lie you dao biao da ,zhu yao de biao da bu wei shi gen bu ,jing 、xie zhong biao da liang ji di ;MsbHLH115ji yin xiang ying yan xie pai xia diao biao da 、xiang ying jian he gan han xie pai shang diao biao da ,xiang ying ABAshang diao biao da ,bu xiang ying mo li suan jia zhi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自哈尔滨师范大学的杜家欢，发表于刊物哈尔滨师范大学2019-07-01论文，是一篇关于紫花苜蓿论文,基因论文,遗传转化论文,胁迫响应论文,哈尔滨师范大学2019-07-01论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自哈尔滨师范大学2019-07-01论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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