论文题目: 姜黄素对卵巢癌细胞株HO-8910增殖和转移作用的研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 妇产科学
作者: 喻静
导师: 任慕兰
关键词: 卵巢癌细胞,姜黄素,基质金属蛋白酶,基质金属蛋白酶组织抑制剂
文献来源: 东南大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的:探讨姜黄素(Curcumin,Cur)对卵巢癌细胞增殖和转移的影响,为临床用药提供科学依据。方法:①体外培养卵巢癌细胞株HO-8910。②采用MTT方法检测对照组、不同浓度(5、10、20、30、40、50、60umol/ml)Cur干预组(干预24、48、72、96小时)吸光值,计算细胞抑制率值。③应用光学显微镜观察不同组之间、不同时间点卵巢癌细胞形态改变。④利用RT-PCR技术与免疫细胞化学方法分别检测小剂量药物浓度Cur(1、5、10、20umol/ml)干预24小时后基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)基因在转录及翻译水平的表达以及其抑制物基质金属蛋白酶抑制剂-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)在翻译水平的表达,与对照组进行比较。结果:1、光学显微镜观察显示:随着姜黄素浓度的增高,卵巢癌细胞株形态逐渐发生变化,透光性及折光性降低,细胞皱缩,细胞数量减少,凋亡细胞增多。2、MTT结果显示:随着姜黄素浓度的增高,卵巢癌细胞OD570的值降低,提示细胞活力逐渐降低,即细胞抑制率增加。72小时内呈时间、浓度依赖性特点。在同一浓度组内,72小时时抑制率达高峰,96小时的细胞抑制率下降。不同浓度姜黄素与不同时间组之间均有显著性差异(P <0.01)。3、免疫细胞化学结果显示不同浓度姜黄素培养的卵巢癌细胞,随着药物浓度增高,细胞数目逐渐减少,TIMP-2表达逐渐增强,MMP-2及MMP-9表达逐渐减弱。差异有统计学意义(P <0.05)。4、RT-PCR结果显示不同浓度姜黄素培养的卵巢癌细胞,随着药物浓度增高,MMP-2及MMP-9mRNA表达逐渐减弱,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:1、姜黄素能有效抑制人卵巢癌细胞株HO-8910体外增殖,72小时内呈时间、浓度依赖性特点。在同一浓度组内,72小时时抑制率达高峰,96小时的细胞抑制率下降。40umol/l姜黄素作用24小时后细胞抑制率达51.75%。2、结合免疫细胞化学及RT-PCR,分析卵巢癌HO-8910细胞株于姜黄素干预后的MMPs改变,提示MMP-2、9表达下调及TIMP-2表达上调,说明姜黄素可下调MMPs的表达及调节MMPs/TIMPs的平衡,这些可能与姜黄素抑制卵巢癌细胞浸润转移能力有关。3、说明姜黄素抑制卵巢癌细胞增殖及转移的机制十分复杂,作用靶点可以从DNA到mRNA及蛋白水平,说明姜黄素多方面抗肿瘤作用。
论文目录:
中文摘要
Abstract
绪 论(前言)
第一章 文献综述
1 基质金属蛋白酶及其抑制物与卵巢肿瘤关系的研究进展
2 姜黄素简介
3 应用与展望
第二章 材料、原理与方法
1 卵巢癌HO-8910 细胞株培养
2 试剂
3 主要仪器与材料
4 实验方法
第三章 实验结果
1 倒置相差显微镜观察卵巢癌细胞株HO-8910
2 MTT 观察细胞活力
3 免疫细胞化学检测细胞胞浆内MMP-2,9 及TIMP-2 蛋白
4 半定量 RT-PCR 测定卵巢癌细胞中MMP-2、9 及TIMP-2 的mRNA 的表达
第四章 讨论
1 卵巢癌浸润转移的分子基础
2 MMPs/TIMPs 与卵巢癌浸润转移的关系
3 MMPs/TIMPs 在卵巢肿瘤中的临床意义
4 MMPs 常用检测方法
5 姜黄素抗肿瘤作用机制探讨
6 问题与展望
第五章 结论
致谢
参考文献
作者简介
发布时间: 2007-06-11
参考文献
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