虎杖苷对实验性急性胃黏膜损伤的保护作用与机制

论文摘要

急性胃黏膜病变发生于多种病理过程,其损伤涉及胃酸、胃蛋白酶、幽门螺杆菌、药物、应激、乙醇、手术等。近年来缺血再灌注在急性胃黏膜病变发生机制中的重要作用已引起人们的广泛重视。虎杖苷（Polydatin,PD）,即白藜芦醇苷,是虎杖的有效成分之一,具有保护心肌细胞,改善微循环,抑制血小板聚集,抵抗内毒素休克,降血脂,镇咳、平喘,抗病原微生物等多种药理作用。有关PD对急性胃黏膜的保护作用及机制研究尚未见报道。本研究将探讨虎杖苷对小鼠无水乙醇、大鼠冷冻-束缚应激、大鼠缺血再灌注所致胃黏膜损伤的影响及作用机制,从而为虎杖苷的进一步开发与利用提供实验依据。主要内容概括如下:1. PD对无水乙醇诱发急性胃黏膜损伤小鼠的影响无水乙醇（0.1ml/10g）灌胃诱发小鼠急性胃黏膜损伤模型。PD（120,60,30mg/kg）于造模前连续灌胃给药5天,能够有效降低急性胃黏膜损伤模型小鼠胃黏膜损伤指数（P<0.01或P<0.05）。提示PD对无水乙醇诱发的急性胃黏膜损伤具有保护作用。2. PD对幽门结扎致大鼠胃液量、游离酸度、总酸度与胃蛋白酶活性的影响PD（80,40mg/kg,ig）对幽门结扎大鼠的胃液量、胃液游离酸度与总酸度,以及胃液中胃蛋白酶活性统计学检验差异无显著性（P>0.05）。提示PD对损伤胃黏膜的保护作用机制中主要不是通过影响胃酸及胃蛋白酶活性而发挥作用的。3. PD对冷冻-束缚应激（CRS）诱发的急性胃黏膜损伤大鼠的影响PD（80,40,20mg/kg,ig）连续灌胃给药5天,能显著降低大鼠胃黏膜损伤面积,降低血清中MDA含量,使SOD水平回升,增加PGE2的OD值（P<0.01或P<0.05）。提示PD对CRS诱发的急性胃黏膜损伤有保护作用,其机制与抗氧自由基和增加PGE2的表达水平有关（P<0.01或P<0.05）。4. PD对胃缺血再灌注诱发的胃黏膜损伤大鼠的影响PD（80,40,20mg/kg,ig）连续灌胃给药5天,与模型组比较,能减轻大鼠胃黏膜损伤面积;减轻胃组织炎细胞浸润,明显改变胃黏膜的病理组织学变化。PD（80,40mg/kg,ig）尚可降低静注伊文思蓝后胃液中伊文思蓝的渗出量。PD（80,40,20mg/kg,ig）可升高大鼠胃组织SOD、GSH-Px、NO与NOS水平,降低组织中MDA、MPO含量;放射免疫学和RT-PCR检测结果,PD可降低血浆中TNF-α和IL-1β含量,抑制组织中TNF-α和IL-1β的mRNA表达（P<0.01或P<0.05）。提示PD对胃缺血再灌注诱发的胃黏膜损伤有保护作用,其机制可能与降低胃黏膜血管通透性,抗氧化应激、降低炎症细胞因子TNF-α和IL-1β含量及抑制二者mRNA表达有关（P<0.01或P<0.05）。结论:PD对实验性急性胃黏膜损伤具有一定的保护作用。其可能通过抗氧化应激、抗缺血再灌注,抑制炎细胞浸润,降低胃黏膜血管通透性发挥抗损伤作用;其分子机制可能与抗氧自由基,提高PGE2、NO与NOS水平,抑制炎性细胞因子TNF-α和IL-1β表达有关。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 正文
• 1 前言
• 2 实验材料
• 2.1 动物
• 2.2 主要药品与试剂
• 2.3 仪器
• 3 实验方法
• 3.1 急性胃黏膜损伤（AGML）模型制备
• 3.1.1 小鼠无水乙醇诱发AGML 模型
• 3.1.2 大鼠束缚-冷冻应激诱发AGML 模型
• 3.1.3 大鼠缺血再灌注诱发AGML 模型
• 3.2 胃黏膜损伤指数测定
• 3.3 大鼠胃液游离酸度与总酸度测定
• 3.4 大鼠胃蛋白酶活性测定
• 3.5 胃血管通透性测定
• 3.6 胃黏膜组织病理学观察
• 3.7 各项生化指标测定
• 3.7.1 血浆和组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）活性测定
• 3.7.2 血浆和组织匀浆丙二醛（MDA）含量测定
• 3.7.3 血浆一氧化氮（NO）含量测定
• 3.7.4 血浆一氧化氮合酶（NOS）含量测定
• 3.7.5 胃组织蛋白含量测定
• 3.7.6 血清前列腺素E2（PGE2）含量的检测
• 3.7.7 胃组织匀浆髓过氧化物酶（MPO）活性测定
• 3.7.8 胃组织匀浆谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性测定
• 3.7.9 血浆肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素1-β（IL-β）含量测定
• 3.8 TNF-αmRNA 和IL-βmRNA 表达的检测
• 3.9 分组与给药
• 3.10 数据处理
• 4 结果
• 4.1 PD 对无水乙醇致小鼠胃黏膜损伤的影响
• 4.2 PD 对CRS 大鼠胃黏膜损伤的影响
• 4.3 PD 对幽门结扎致大鼠胃液酸度和胃蛋白酶活性的影响
• 4.4 PD 对GIRI 大鼠胃黏膜损伤的影响
• 4.4.1 PD 对GIRI 大鼠胃黏膜损伤面积的影响
• 4.4.2 PD 对GIRI 大鼠胃组织MDA、SOD、GSH-Px、MPO 的影响
• 4.4.3 PD 对GIRI 大鼠TNF-α和IL-1β含量的影响
• 4.4.4 PD 对GIRI 大鼠胃组织病理学改变的影响
• 4.4.5 PD 对GIRI 大鼠胃血管通透性的影响
• 4.4.6 PD 对GIRI 大鼠胃组织NO 含量和NOS 活性的影响
• 4.4.7 PD 对GIRI 大鼠胃组织TNF-αmRNA 和IL-1βm RNA 表达的影响
• 5 讨论
• 5.1 PD 对实验性AGML 的保护作用
• 5.2 PD 对AGML 保护作用的分子机制
• 6 结论
• 附录 （个人简历）
• 致谢
• 综述
• 参考文献