白术内酯I拮抗紫杉醇诱导卵巢癌细胞分泌IL-6和化疗耐受

论文摘要

目的：本研究为探索白术内酯I拮抗紫杉醇诱导卵巢癌细胞分泌IL-6及其增加卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性的作用。方法：采用ELISA法测定紫杉醇、LPS和白术内酯I诱导人卵巢癌SKOV-3细胞和A2780细胞分泌IL-6的浓度,以及不同浓度白术内酯I联合紫杉醇或LPS诱导SKOV-3细胞分泌IL-6的浓度。采用MTT法分别测定紫杉醇、白术内酯I以及白术内酯Ⅰ诱导下紫杉醇对人卵巢癌SKOV-3细胞和A2780细胞的生长抑制作用。结果：①紫杉醇和LPS均以时间和剂量依赖方式促进SKOV-3细胞分秘IL-6（P<0.05）；低浓度白术内酯Ⅰ（1～10μmol/L）对SKOV-3细胞分泌IL-6无影响（P>0.05）,高浓度（100～150μmol/L）抑制SKOV-3细胞分泌IL-6（P<0.05）但100μmol/L和150μmol/L两组间无差异（P--0.352）；白术内酯Ⅰ（10～100μmol/L）以剂量依赖方式拮抗紫杉醇和LPS诱导SKOV-3细胞分泌IL-6（P<0.05）；在A2780细胞上并无以上作用。②白术内酯Ⅰ对人卵巢癌细胞几乎无生长抑制作用；紫杉醇以浓度依赖方式抑制SKOV-3细胞和A2780细胞存活,其IC50分别为：（0.038±0.0042）μmol/L和（0.034±0.0035）μmol/L；白术内酯Ⅰ（100μmol/L）可增加SKOV-3细胞对紫杉醇的敏感性（P<0.05）,IC50为：（0.011±0.0040）μmol/L；LPS（0.1μg/ml）可降低SKOV-3细胞对紫杉醇的敏感性（P<0.05）,1C50为：（0.082±0.0029）μmol/L;而白术内酯Ⅰ和LPS并不影响A2780细胞对紫杉醇的敏感性（P>0.05）,IC50分别为：（0.027±0.0057）μmol/L和（0.033±0.0042）μmol/L.结论：本实验首次证明了,白术内酯Ⅰ以浓度依赖方式拮抗紫杉醇和LPS诱导卵巢癌细胞分泌IL-6,其高浓度还可直接抑制其分泌IL-6,并且白术内酯Ⅰ的此作用依赖于TLR-4/MyD88而存在。另外,白术内酯Ⅰ对卵巢癌细胞虽几乎无细胞毒性作用,但它可增加紫杉醇的敏感性,此作用也是TLR-4／MyD88+依赖性的。白术内酯Ⅰ可为提高紫杉醇敏感性提供一种新思路。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1. 引言
• 2. 正文
• 2.1 材料
• 2.1.1 细胞系
• 2.1.2 试剂
• 2.1.2.1 主要试剂
• 2.1.2.2 其它
• 2.1.3 主要器材与仪器
• 2.1.3.1 主要仪器
• 2.1.3.2 其它器材
• 2.1.4 主要溶液配制
• 2.2 方法及技术路线
• 2.2.1 实验流程图
• 2.2.1.1 IL-6的测定
• 50)测定'>2.2.1.2 细胞存活率或半数抑制浓度(IC₅₀)测定
• 2.2.1.3 ELISA法检测IL-6程序
• 2.2.2 细胞培养方法
• 2.2.2.1 A2780人卵巢癌细胞的培养
• 2.2.2.2 SKOV-3人卵巢癌细胞的培养
• 2.2.3 药物配制
• 2.2.4 ELISA法测定卵巢癌细胞分泌IL-6的浓度
• 2.2.4.1 不同浓度紫杉醇、白术内酯Ⅰ及LPS分别诱导SKOV-3和A2780细胞48小时后IL-6的测定
• 2.2.4.2 固定浓度紫杉醇、白术内酯Ⅰ及LPS分别诱导SKOV-3细胞12小时、24小时、48小时后IL-6的测定
• 2.2.4.3 不同浓度白术内酯Ⅰ联合紫杉醇或LPS诱导SKOV-3细胞48小时后IL-6的测定
• 2.2.5 MTT法测定肿瘤细胞生长情况及药物对肿瘤细胞的生长抑制作用
• 2.2.5.1 不同浓度紫杉醇或白术内酯Ⅰ诱导SKOV-3细胞后的存活率
• 2.2.5.2 白术内酯Ⅰ对人卵巢癌A2780细胞和人卵巢癌SKOV-3细胞的生长抑制作用
• 2.2.5.3 紫杉醇对人卵巢癌A2780细胞和人卵巢癌SKOV-3细胞的生长抑制作用
• 2.2.5.4 白术内酯Ⅰ联合紫杉醇对人卵巢癌A2780细胞和人卵巢癌SKOV-3细胞的生长抑制作用
• 2.2.5.5 LPS联合紫杉醇对人卵巢癌A2780细胞和人卵巢癌SKOV-3 细胞的生长抑制作用
• 2.2.6 统计学分析
• 2.3 结果
• 2.3.1 紫杉醇、白术内酯Ⅰ、LPS诱导人卵巢癌细胞分泌IL-6
• 2.3.1.1 紫杉醇诱导人卵巢癌细胞分泌IL-6浓度选择
• 2.3.1.2 LPS诱导人卵巢癌细胞分泌IL-6浓度选择
• 2.3.1.3 白术内酯Ⅰ诱导人卵巢癌细胞分泌IL-6浓度选择
• 2.3.1.4 紫杉醇、LPS、白术内酯Ⅰ分别诱导人卵巢癌SKOV-3细胞分泌IL-6时间选择
• 2.3.1.5 白术内酯Ⅰ联合紫杉醇或LPS诱导人卵巢癌SKOV-3细胞分泌IL-6的测定
• 2.3.2 紫杉醇、白术内酯Ⅰ对人卵巢癌细胞的生长抑制作用
• 2.3.2.1 白术内酯Ⅰ对人卵巢癌细胞的生长抑制作用
• 2.3.2.2 紫杉醇对人卵巢癌SKOV-3细胞的生长抑制作用
• 2.3.2.3 白术内酯Ⅰ联合紫杉醇对人卵巢癌SKOV-3细胞的生长抑制作用
• 2.3.2.4 LPS联合紫杉醇对人卵巢癌SKOV-3细胞的生长抑制作用
• 50数值比较'>2.3.2.5 各实验组诱导人卵巢癌SKOV-3细胞72小时后IC₅₀数值比较
• 2.3.2.6 紫杉醇对人卵巢癌A2780细胞的生长抑制作用
• 2.3.2.7 白术内酯Ⅰ联合紫杉醇对人卵巢癌A2780细胞的生长抑制作用
• 2.3.2.8 LPS联合紫杉醇对人卵巢癌A2780细胞的生长抑制作用.
• 50数值比较'>2.3.2.9 各实验组诱导人卵巢癌A2780细胞72小时后IC₅₀数值比较
• 2.4 讨论
• 2.4.1 TLR-4与卵巢癌和紫杉醇耐药
• 2.4.2 IL-6在卵巢癌中的异常表达
• 2.4.3 IL-6在卵巢癌发生、发展中化疗耐药中的作用
• 2.4.4 白术内酯Ⅰ对紫杉醇的作用的影响
• 2.5 结论
• 2.6 问题与展望
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 附件