论文题目: 大鼠牙根发育模式相关基因的筛选及部分基因功能的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 口腔临床医学
作者: 邢向辉
导师: 文玲英,金岩,杨富生
关键词: 大鼠,牙根发育,发育模式,差异表达基因,基因功能
文献来源: 第四军医大学
发表年度: 2005
论文摘要: 牙齿的发育研究可以为牙齿再生及牙齿先天发育异常提供理论依据,同时牙齿发育也是发育生物学中器官发育形成的一个典型模型。目前牙齿早期发育研究较多,但后期的发育,特别是牙根发育相关基因研究较少。牙齿发育是口腔上皮组织与间充质组织相互作用的结果,牙根的发育与上皮根鞘有着密切关系,当牙冠发育即将完成之际上皮根鞘的形成揭开了牙根发育的序幕。本研究目的是利用大鼠下颌磨牙和切牙具有完全不同的牙根发育模式作为动物模型,对牙根发育相关的差异表达基因进行筛选并对部分差异基因的功能进行探讨,为牙根发育及牙根再生研究提供理论依据。 采用的方法及主要结果:本课题采用组织学、免疫组织化学、改良消减杂交技术、Northern blot、Western blot、RT-PCR、Real-time PCR、细胞培养、基因转染和RNA干扰等方法,进行了以下五部分实验研究: 第一部分 通过组织学观察大鼠下颌第一磨牙和下颌切牙的发育时序,结果发现胚胎18日(E18)大鼠磨牙和切牙发育开始出现差异,这种差异的表现是磨牙形成了双层细胞的上皮根鞘,开始启动牙根的发育,而切牙舌侧虽然也形成类似根鞘的结构,唇侧却仍然维持多层结构的颈环干细胞龛,始终未能启动牙根发育,仍旧保持牙冠的发育形式。 第二部分 实验1通过改良消减杂交技术,首次建立了大鼠牙根发育启动相关差异表达基因文库,文库总浓度约为1.5×10~4,经酶切鉴定含有500bp以上插入片段的克隆约为84%,表明所建立的基因文库质量较高,
论文目录:
缩略语表
中文摘要
英文摘要
前言
文献回顾
一．发育模式形成机制与牙齿发育机制研究进展
二．差异表达基因的筛选技术和RNA干扰在基因功能研究中的应用研究进展
实验部分
第一部分 大鼠上皮根鞘发育时序的组织学研究
第二部分 大鼠牙根发育模式相关基因的克隆及筛选
实验1 大鼠牙根发育模式相关基因消减文库的建立
实验2 大鼠牙根发育模式相关基因消减文库的鉴定和筛选
第三部分 差异新基因Mrpl的组织表达研究、结构分析及原核表达载体构建
实验1 Mrpl基因组织表达谱研究及结构分析
实验2 大鼠Mrpl基因原核表达载体的构建
第四部分 差异基因NfiC在磨牙胚组织选择性剪接体的克隆
第五部分 差异基因Sel1L在牙齿发育中表达及功能研究
实验1 Sel1L在牙胚发育及体外培养牙胚细胞中表达的研究
实验2 Sel1L基因RNAi载体的构建及转染牙胚细胞的研究
实验3 Sel1L干扰后牙胚细胞的增殖、凋亡检测及对Hes1、Smad4及DSPP表达的影响
全文总结
展望
个人简历和研究成果
致谢
附图
发布时间: 2005-07-19
参考文献
- [1].先天性牙根发育不良致病相关基因的克隆研究[D]. 轩昆.第四军医大学2004
- [2].大鼠磨牙Hertwig上皮根鞘在牙根发育中作用的实验研究[D]. 刘晓辉.第四军医大学2007
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- [4].大鼠磨牙牙根发育期根端组织成牙能力的研究[D]. 徐琳.第四军医大学2008
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- [5].先天性牙根发育不良致病相关基因的克隆研究[D]. 轩昆.第四军医大学2004
- [6].用人牙源性上皮和间充质细胞构建组织工程牙齿样结构的实验研究[D]. 包柳郁.第四军医大学2004
- [7].牙髓干细胞分离鉴定及其制备组织工程化牙本质牙髓复合体的实验研究[D]. 贺慧霞.第四军医大学2005
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- [9].组织工程化牙根组织的研究[D]. 李玉成.第四军医大学2007
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