论文摘要
目的ISP-1即多球壳菌素,是子囊菌冬虫夏草的有效成分,FTY720是ISP-1经化学修饰而成的,两者均为新型免疫抑制剂。本文旨在观察ISP-1及FTY720对体外培养的正常大鼠肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cell,GMC）的促凋亡作用,研究ISP-1及FTY720对细胞周期调节蛋白基因表达谱和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响,以探讨ISP-1及FTY720的作用机制。方法体外培养大鼠GMC,加入不同浓度的ISP-1干预,即10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L,不同浓度的FTY720,即10μmol/L、20μmol/L,干预分别于作用6h、12h、24h、48h后,用MTT法检测细胞的增生情况,流式细胞仪PI标记法检测凋亡细胞“亚G1峰”的形成,Hoechst33258 /PI染色荧光显微镜法观察凋亡细胞对染料的摄取情况及形态变化,琼脂糖DNA凝胶电泳法观察凋亡细胞核小体DNA的断裂现象,通过美国SuperArray Real-Time PCR细胞周期芯片测定ISP-1及FTY720对细胞周期调节蛋白基因表达谱的影响,免疫印迹法观察Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果ISP-1可显著诱导GMC凋亡,并呈一定的时间和浓度依赖性,以100μmol/L ISP-1作用48h后细胞凋亡最显著;FTY720同样可显著诱导GMC凋亡,呈一定的时间和浓度依赖性。MTT法显示,细胞增生明显受抑制,且随着时间和浓度的增加,抑制作用越强。流式细胞仪PI标记法检测到凋亡细胞“亚G1峰”的形成,Hoechst/PI荧光染色法可见亮蓝色的凋亡小体,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡梯度的出现。PCR细胞周期基因芯片检测结果发现ISP-1可显著上调GMC Rad51、Atm、Brca1、Caspase3、cyclinA2、cyclinC、chek1、cyclinB1、cyclinB2、cyclinD2、cyclinF、Cdc25a和P27等一些与DNA损伤、凋亡和细胞周期调节蛋白相关的基因的表达;FTY720可上调GMC Dnajc2、RGD1562436predicted、LOC688900、Atm、Gadd45a、cyclinA1、cyclinD2、cyclinE1、Grp132-predice、LOC307231、LOC367976、LOC686524、Mki67predicted、Ppp2r3a、Trp63等一些与DNA损伤、凋亡和细胞周期调节蛋白相关的基因的表达。Westernblot发现ISP-1可显著上调GMC Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达。结论ISP-1及FTY720可时间和浓度依赖性地诱导体外培养的正常大鼠GMC凋亡,其机制与影响细胞周期调节蛋白及凋亡相关基因的表达有关。
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- [10].FTY720联合吉西他滨对非小细胞肺癌肿瘤相关细胞株增殖和凋亡作用的研究[J]. 重庆医学 2017(17)
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- [12].FTY720对大鼠心脏移植急性排斥反应的影响[J]. 新乡医学院学报 2010(01)
- [13].新型免疫抑制剂FTY720在器官移植及眼科中的应用[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2009(18)
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- [16].新型免疫抑制剂FTY720作用机制浅析[J]. 健康研究 2010(02)
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- [26].FTY720在成骨-破骨环境下抑制聚乙烯磨损颗粒诱导的溶骨效应[J]. 华中科技大学学报(医学版) 2019(06)
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