以偶氮胂（羧）金属配合物为光谱探针测定蛋白质的研究

论文摘要

蛋白质是生物体内最重要的物质之一,是生命的基础。蛋白质的定量分析既是生物化学、药学和其它生物学科中经常涉及的分析内容,也是临床检验中疾病诊断及检验疾病治疗效果的重要指标。而且,蛋白质的定量分析,还是许多生化药物分离提纯的质量控制和食品检验的常规分析项目。因此,建立快速、准确、高灵敏的蛋白质定量分析方法具有重要的理论和现实意义。本文对偶氮胂（羧）金属配合物与蛋白质的结合反应进行了详细的研究,建立了五种高灵敏的测定蛋白质含量的新方法。直接应用于生物样品分析,获得了满意的结果。主要研究工作如下: 1. 详细考察了偶氮胂III-钇（III）在pH 2.32.5 的Briton-Robinson 缓冲介质中与蛋白质的作用,建立了以偶氮胂III-钇（III）为光谱探针,分光光度测定蛋白质含量的新方法。该法线性关系好,灵敏度高。以人血清白蛋白（HSA）为例,浓度在020 mg/L 范围内与配合物最大吸收波长（652 nm） 处的吸光度降低值成正比,相关系数r=0.9999,表观摩尔吸光系数ε652= 2.60×10mol-1·cm-1。生物体内常见物质基本不干扰测定。应用于人血清样品中蛋白质总量的测定,结果满意。2. 将对乙酰基偶氮胂金属配合物用于蛋白质分析,建立了以对乙酰基偶氮胂-钇（III）为光谱探针测定蛋白质含量的新方法。当以配合物的最大吸收波长（653 nm）为检测波长时,蛋白质（以HSA 为例）的浓度在020 mg/L 范围内与配合物吸光度的降低值呈现良好的线性关系, 表观摩尔吸光系数ε653=1.98×106L·mol-1·cm-1。该法简便,快速,灵敏度高,抗干扰能力强。成功应用于人血清样品中蛋白质总量的测定。3. 首次研究了β型金属配合物与蛋白质的结合反应。在pH 0.751.5的HCl—NaAc 缓冲介质中,β型金属配合物偶氮硝羧-钡（II）能与蛋白质在室温下7 min 内反应完全。基于此,建立了以偶氮硝羧-钡（II）β型配合物为光谱探针的快速、灵敏测定蛋白质含量的分光光度新方法。该方法对HSA 的表观摩尔

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 前言
• 1. 蛋白质的测定方法
• 1.1 吸光光度法
• 1.2 荧光光度法
• 1.3 共振瑞利散射法
• 1.4 高效液相色谱法
• 1.5 毛细管电泳法
• 1.6 其它方法
• 2. 本文主要研究工作
• 第二章 主要仪器与试剂
• 1. 主要仪器
• 2. 主要试剂及配制方法
• 2.1 蛋白质
• 2.2 显色剂
• 2.3 金属离子
• 2.4 表面活性剂
• 2.5 缓冲溶液
• 第三章 偶氮胂Ⅲ-钇（Ⅲ）配合物作为蛋白质测定的光谱探针研究
• 1. 实验方法
• 2. 结果与讨论
• 2.1 吸收光谱
• 2.2 反应条件的选择
• 2.3 反应时间及其稳定性
• 2.4 分析应用
• 2.5 结合反应机理探讨
• 第四章 对乙酰基偶氮胂-钇（Ⅲ）配合物作为蛋白质测定的光谱探针研究
• 1. 实验方法
• 2. 结果与讨论
• 2.1 吸收光谱
• 2.2 反应条件的选择
• 2.3 分析应用
• 第五章 偶氮硝羧-钡（Ⅱ） β型配合物作为蛋白质测定的光谱探针研究
• 1. 实验方法
• 2. 结果与讨论
• 2.1 吸收光谱
• 2.2 反应条件的选择
• 2.3 分析应用
• 第六章 对乙酰基偶氮羧-锶（Ⅱ） β型配合物作为蛋白质测定的光谱探针研究
• 1. 实验方法
• 2. 结果与讨论
• 2.1 吸收光谱
• 2.2 反应条件的选择
• 2.3 分析应用
• 第七章 间羧基偶氮羧-锶（Ⅱ）β型配合物作为蛋白质测定的光谱探针研究
• 1. 实验方法
• 2. 结果与讨论
• 2.1 吸收光谱
• 2.2 反应条件的选择
• 2.3 分析应用
• 2.4 结合反应机理探讨
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表（或待发表）的论文
• 致谢