论文摘要
流行性感冒是人类至今尚不能有效控制的传染病之一，其特点是在短期内突然爆发，迅速蔓延，造成不同程度的流行。除感染人外，流感病毒在动物体内也广泛存在并能引起猪、鸡、马等动物发病，导致动物的大量死亡。虽然有少数抗病毒药物对流感病毒的感染有一定疗效，但并不能完全消除流感病毒给人类造成的威胁，因此疫苗接种仍然是预防流感的有力措施。目前，WHO积极支持和鼓励以哺乳动物细胞为基质生产流感疫苗，本实验对WHO指定的2006～2007年度疫苗株在Vero细胞系上的增殖情况进行了考察，为研制以细胞为基质的流感疫苗提供了参考依据。第一部分不同类别的流感病毒毒株在Vero细胞上的传代2006～2007年度WHO指定的北半球生产流感疫苗所用的标准毒株有三个型别，本实验中，三个型别的流感病毒疫苗株被分别接种到144代Vero细胞上并在适合于流感病毒繁殖的最优化条件下进行培养，三天之后收获细胞裂解液，测定其血凝滴度，之后将第一代收获的病毒液继续接种Vero细胞，进行连续传代，发现病毒收获液的血凝效价随着传代次数的增加而逐渐降低，当连续接种传代四次之后，细胞裂解液中已经检测不到流感病毒了。上述的实验证明了WHO指定的疫苗生产用流感毒株在Vero细胞上适应性差，不能有效繁殖，所以如果要利用Vero细胞作为基质来生产流感疫苗，还需要从其他方面进行探索和改进。第二部分微载体培养Vero细胞及培养H3N2型流感病毒Vero细胞适应株的探索微载体细胞培养技术是一种微载体与生物反应器结合的技术，现已广泛应用于生物工程领域，成为大量获取细胞的一条途径。不仅如此，利用微载体培养细胞可避免普通方法培养细胞时存在的细胞去分化现象，有利于细胞表型的维持，提高细胞的质量。本实验研究了Vero细胞在微载体上的生长状况继而以微载体上生长的Vero细胞为基质培养了H3N2型流感病毒，初步确定了该毒株的培养条件。