银杏叶提取物对大鼠急性分离海马神经元NMDA-激活电流的调制作用

论文摘要

背景: 脑血管疾病、脑外伤、脑肿瘤及其继发的脑内综合征（如脑心综合征、消化道出血等）、焦虑、抑郁、疼痛、癫痫、痴呆等重大神经、精神疾患,尽管发病原因各异,但其发生、发展均被证明与 N-甲基-D-门冬氨酸受体（NMDAR）异常激活有一定关联。试图通过选择性干预NMDAR 过度激活所介导的神经兴奋毒性,为上述若干致死、致残性疾患提供有效的防治手段,是近 20 多年以来基础与临床神经科学始终追求的一个重要目标。然而,绝大多数 NMDAR 拮抗剂因疗效甚微或毒副作用严重,均不能成为临床上理想的干预药物。 在许多神经保护药物中,银杏叶提取物 （Ginkgo blioba extracts,GBE）用于脑保护的研究引起了人们极大的兴趣。GBE 不仅对冠心病、高血压、心绞痛、动脉硬化有显著的预防和治疗效果,还用于治疗脑功能减退、老年性痴呆、老年性记忆减退、衰老等与脑内兴奋性损伤有关的疾病。因此,银杏叶提取物成为目前备受关注的药品。但普通GBE 药物颗粒直径较大,为大分子药物,较难穿透血脑屏障,其主要成分为黄酮类和内酯类化合物, 易溶于有机溶剂,不能溶于水所以大大限制了其在临床上的应用。因此充分开发并生产出易溶的高效能的银杏叶纳米制剂并进一步探讨其神经保护机制具有重要的理论和现实意义。鉴于以上原因,本研究组采用一种超临界反溶剂的方法由普通的微米银杏叶制剂（Micro-GBE,mGBE）制备了纳米级的银杏叶制剂（Nano-GBE,nGBE）（电镜下观察,平均粒径为 100 纳米以下的超细粉）。本实验的目的在于应用电生理膜片钳技术探讨银杏叶纳米制剂的神经保护作用并与普通的 mGBE 进行比较,进一步阐明 GBE 的药理作用机制。 目的与方法: 我们通过采用一种超临界反溶剂的方法由普通的微米银杏叶制剂（Micro-GBE,mGBE）制备纳米级的银杏叶制剂（Nano-GBE,nGBE）, 获得平均粒径为 100 纳米以下的超细粉, 运用全细胞膜片钳技术观察mGBE 和 nGBE 对大鼠海马急性分离神经元 NMDAR 激活电流的调制作用并比较其异同,从机能方面探讨纳米级银杏叶提取物的脑保护机制。 实验结果: 1.大部分受检细胞 （81.8%, 90/110）对外加 NMDA 敏感,1mM NMDA 和 10μM 甘氨酸（Glycine,Gly）共同作用能引起一个有明显去敏感的内向电流（INMDA）。 此电流可被 NMDA 受体特异阻断剂（MK-801）所 阻断。 2.预加mGBE （溶于DMSO）/ nGBE（溶于DMSO） （0.1mg/ml） 30s 后再加入 NMDA（1mM）和 Gly（10μM）能明显抑制 NMDA-激活电流（INMDA）。相同浓度下,nGBE（溶于 DMSO）对 INMDA的抑制作用略优于mGBE 组（溶于 DMSO）,但差异无统计学意义。 3. 预 加 mGBE （ 溶 于 DMSO）/nGBE （ 溶 于 标 准 细 胞 外 液 ） （0.1mg/ml）30s 后再加入 NMDA（1mM）和 Gly（10μM）能明显抑制INMDA。 nGBE （溶于标准细胞外液）对 INMDA 的抑制作用明显优于 mGBE组（溶于 DMSO）,差异具有统计学意义（P < 0.05）。 4.预加 MK-801（50μM） 后再加入 NMDA（1mM）和 Gly（10μM）能明显抑制 INMDA ,50μM MK-801 组对 INMDA的抑制作用优于 nGBE

论文目录

• 一、论文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 实验材料
• （五） 实验方法
• （六） 实验结果
• （七） 讨论
• （八） 结论
• （九） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 正文
• （二） 参考文献
• 三、致谢