论文摘要
目的:原发性肝癌是当今世界上最常见、恶性程度最高的肿瘤之一,目前肝癌治疗首选根治性切除手术,局部或全身化疗仍是治疗肝癌一种常用手段,但肝癌化疗失败率高,主要原因是肿瘤对化疗药物存在在耐药性。姜黄素是从姜科植物中药姜黄的地下根茎中分离出来的主要活性物质,具有广泛的预防和治疗肿瘤的作用,有报道发现姜黄素可作为肿瘤耐药逆转剂。本研究采用姜黄素作用于人肝细胞癌多药耐药株HepG2/ADM,观测其有无逆转肝癌耐药性的作用。方法:通过培养液中阿霉素浓度梯度递增法,长期筛选建立人肝癌多药耐药细胞系HepG2/ADM,采用MTT法检测其对6种抗癌药物的耐药性,免疫组化法检测HepG2/ADM细胞与亲本细胞P-gp的表达。镜下观察和MTT法检测姜黄素对HepG2/ADM细胞耐药性的逆转作用。高效液相色谱法（HPLC）测定加用姜黄素后HepG2/ADM细胞内ADM含量。结果:HepG2/ADM细胞与HepG2细胞两者生长曲线形态相似,HepG2/ADM细胞倍增时间较HepG2细胞轻度延长。通过MTT法检测6种抗癌药物对两组细胞的细胞毒作用,结果显示在化疗药物作用48小时后,HepG2/ADM细胞的生存率均明显高于HepG2细胞,观察耐药倍数发现HepG2/ADM细胞不仅对原诱导药物ADM产生了耐药,而且对另外四种药物也出现交叉耐药,即产生了多药耐药性。免疫组化法检测两组细胞P-gp的表达水平,HepG2/ADM细胞与HepG2细胞相比P-gp表达阳性染色率明显增加（P＜0.01）。MTT法测定逆转倍数为2.1-7.3,随Cur浓度增加而增大。HPLC法结果:ADM与姜黄素联合作用时HepG2/ADM细胞内ADM含量较单独ADM作用时明显增加（P＜0.01）。结论:姜黄素可以逆转HepG2/ADM细胞的耐药性,提高该细胞对化疗的敏感度,其逆转机制可能与降低P-gp药物外排功能,增加细胞内药物浓度有关。