组织工程动脉血管组织构建的初步实验研究

论文题目: 组织工程动脉血管组织构建的初步实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 外科学整形外科

作者: 刘庆阳

导师: 宋业光,谷涌泉,付小卒

关键词: 组织工程,细胞培养,载体材料,细胞毒性,生物相容性

文献来源: 中国协和医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: [目的] 1)运用细胞培养技术获取犬的血管平滑肌细胞，并培养扩增，为组织工程动脉的构建提供种子细胞；2)评价bFGF调控犬血管平滑肌细胞增殖的合理剂量，及其对平滑肌细胞在生物可降解材料上生长的影响；3)对新合成的生物可降解材料进行细胞毒性及生物相容性评价，探讨它们作为组织工程动脉血管支架材料的可行性；4)进行组织工程动脉组织构建的初步实验，为最终获得组织工程动脉移植体并应用到临床奠定实验基础。 [方法] 1)采用组织贴块法培养犬的血管平滑肌细胞，并进行细胞传代培养。观察细胞的形态、生长情况，进行免疫组织化学染色，及电镜检测。了解平滑肌细胞的纯度、细胞形态学特征及细胞的增殖生长情况。 2)对培养的平滑肌细胞给予不同剂量的bFGF，作用不同时间后应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测，比较不同剂量bFGF组之间的平滑肌细胞增殖情况。用含3ng／mL bFGF的培养液在生物可降解载体上培养平滑肌细胞，并设对照组，作用不同时间后比较两组间平滑肌细胞增殖的情况。 3)应用L929细胞株进行生长抑制实验，结合MTT法分别对几种新合成支架材料的细胞毒性进行评价。通过测定接触角比较几种材料的亲水性；将犬的主动脉平滑肌细胞接种于支架材料上，MTT法测定其相对增殖率，比较细胞在不同材料支架上的增殖情况，并应用FITC荧光染色和扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况。 4)将平滑肌细胞种植于胶原膜上，培养13天后形成多层生长的平滑肌细胞层，再将内皮细胞接种在其表面培养两天，形成单层内皮细胞层和多层平滑肌层组成的血管组织。 [结果] 1)通过常规的组织贴块法及酶消化法即可获得高纯度的平滑肌细胞。光镜下细胞具有典型的形态学特征；免疫组化染色显示平滑肌细胞α-肌动蛋白抗体染色阳性。电镜提示平滑肌细胞具有典型细胞形态学特征。 2)使用MTT法测定，不同浓度bFGF组的平滑肌细胞的吸光度值均高于无bFGF组(P＜0.05)，3ng／mL浓度以上组同1ng／mL组之间有显著差异(P＜0.05)，应用3ng／mL bFGF的平滑肌细胞在PEGT／PBT载体上的增殖明显高于对照组(P＜0.05)。 3)水凝胶、PHBV、PU、PHBV和PU共混体的细胞毒性均在0-Ⅰ级。平滑肌细胞可以在T20、PHBV、PEGT／PBT载体材料上黏附生长，

论文目录:

本论文所用英文缩略语表

文献综述 血管组织工程的进展

一、引言

二、组织工程血管移植物研究的历史

三、用于组织工程血管的种子细胞的获取、扩增及功能调控

四、生物可降解支架的研制和改性

五、生物反应器的设计和组织培养的调控

六、血管组织工程的挑战及展望

参考文献

实验研究

论文摘要

ABSTRACT

第一部分 组织工程动脉血管种子细胞的提取和培养

前言

材料与方法

结果

讨论

第二部分 碱性成纤维细胞生长因子对犬平滑肌细胞增殖的影响

前言

材料和方法

结果

讨论

第三部分 构建组织工程动脉血管的支架材料筛选及生物相容性评价

前言

材料与方法

结果

讨论

第四部分 动脉血管组织构建的初步研究

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

全文总结

致谢

在学期间发表文章及参编书籍

发布时间: 2006-10-13

参考文献

• [1].组织工程瓣间质种子细胞和去细胞支架材料防钙化初步实验研究[D]. 宿学家.第四军医大学2005
• [2].组织工程人工神经修复周围神经缺损的实验研究[D]. 肖裕华.四川大学2005
• [3].人骨膜间质祖细胞作为组织工程种子细胞的分子特征研究[D]. 郑毅雄.浙江大学2006
• [4].聚乳酸—聚乙醇酸支架种植自体细胞构建组织工程食管替换犬颈段食管的实验研究[D]. 鲍春荣.第二军医大学2006
• [5].组织工程肝单元构建的研究[D]. 梁峰.中国人民解放军军医进修学院2006
• [6].采用自体肌卫星细胞及异种膀胱无细胞基质构建组织工程膀胱的实验研究[D]. 张玉石.中国协和医科大学2006
• [7].组织工程构建小口径人工血管的实验研究[D]. 唐秀杰.中国协和医科大学2006
• [8].去细胞牛颈静脉构建组织工程右心带瓣管道初步实验研究[D]. 李悟.第四军医大学2006
• [9].脂肪基质细胞多向分化能力及其在组织工程中应用的研究[D]. 林云锋.四川大学2006
• [10].基于内皮祖细胞和脱细胞动脉基质构建组织工程静脉的研究[D]. 吴英锋.首都医科大学2006

相关论文

• [1].血管组织工程的初步实验研究[D]. 尹太.中国人民解放军军医进修学院2005
• [2].自体骨髓间充质干细胞复合脱细胞血管支架构建组织工程血管的研究[D]. 赵一麟.吉林大学2006
• [3].骨髓间充质干细胞构建小口径组织工程化血管的实验研究[D]. 杜振宗.中国协和医科大学2006
• [4].组织工程构建小口径人工血管的实验研究[D]. 唐秀杰.中国协和医科大学2006
• [5].体外构建小口径组织工程化血管的初步实验研究[D]. 张燕搏.中国协和医科大学2006
• [6].小口径组织工程化血管模型的实验研究[D]. 张超纪.中国协和医科大学2004
• [7].组织工程方法构建全生物化血管移植物的实验研究[D]. 夏文森.第四军医大学2006
• [8].组织工程方法构建血管移植物的实验研究[D]. 汪黎明.中国协和医科大学2004
• [9].构建组织工程血管移植物的实验研究[D]. 肖荣冬.福建医科大学2006
• [10].以脱细胞犬动脉为基质的新型组织工程血管支架的制备和体外再细胞化研究[D]. 涂秋芬.四川大学2007

标签：组织工程论文;  细胞培养论文;  载体材料论文;  细胞毒性论文;  生物相容性论文;