论文摘要
中草药是中华民族优秀的传统文化瑰宝,随着社会和科学的不断进步与发展,人类对疾病的不断认识以及健康观念的更新,国内外对中草药的研究已愈来愈寄予关注。中草药有效成分主要有:多糖、黄酮、苷类、有机酸、生物碱等生物活性物质。随着分子生物学的发展,逐渐认识到其中的多糖物质在动物、植物以及微生物等机体细胞中发现,是构成生命活动本质的三类生物大分子(多糖、蛋白质、核酸)的基本物质之一,参与细胞各种生命活动的调节。医药界对多糖的活性产生兴趣尤为浓厚,至今,国内已经报道过对一百多种中草药中的多糖成分进行了深入研究。研究者发现中草药中的多糖成分具有调节免疫功能、抗肿瘤、抗病毒、延缓衰老、抗氧化、降血脂、降血糖、抗感染等多种生理活性功能,其中的调节机体免疫活性倍受研究者关注。本试验采用无水乙醇处理中药复方散剂,水浸提其中总多糖成分,并利用大孔吸附树脂对中药复方多糖进行了分离纯化,在此基础上对多糖的免疫活性进行了初步研究。试验结果如下;1、以粉碎脱脂的中药复方为原料,按照料液比(中药复方:水)1:10,水浸泡提取时间为24h,提取次数为3次,经醇沉及除蛋白后,提取物中多糖含量为43.85%。经乙醇分级后,所得A1、A2、A3中多糖的含量分别为49.6%、50.5%、54.7%。2、通过静态及动态吸附试验,研究了AB-8型、LSA-5B型、DM-18型、CAD-40型、LX-1型、D941型六种大孔树脂对中药复方多糖的吸附及解吸性能。综合考虑,筛选出AB-8型大孔吸附树脂为分离纯化中药复方免疫增强剂多糖的最佳树脂。3、通过单因素试验和正交试验,确定了AB-8型大孔树脂吸附及解吸中药复方多糖的最佳条件:上样液浓度5.93 mg/mL,上样液体积1BV,上样速率2 BV/h;洗脱剂乙醇浓度50%,洗脱速率3BV/h,洗脱剂体积为3BV;在上述条件下,AB-8型大孔树脂对多糖的吸附率为74.3%,解吸率为93.6%。A1、A2、A3经大孔树脂纯化后,所得B1、B2、B3多糖的纯度分别达64.7%、79.8%、77.1%。4、不同组分、不同纯度中药复方多糖对小鼠免疫调节的影响。分别给小鼠灌服药物(复方总多糖、复方水煎剂、三种不同组分A1、A2、A3、高纯度三种不同组分B1、B2、B3、生理盐水)后,对小鼠的红细胞数,白细胞数,白细胞分类数,淋巴细胞的增殖,巨噬细胞的吞噬功能,EA花环形成率,T淋巴细胞酯酶染色率,免疫器官指数等免疫学指标进行测定,试验结果,发现A2、B2的免疫效果最好,优于其它各组。
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