宣木瓜组织培养及其影响因子的研究

论文摘要

本论文以宣木瓜的种子为材料,进行了组织培养和耐盐性两个方面的实验。1.组织培养方面的主要结论如下:1.1不定芽快速繁殖、诱导生根:与KT和TDZ相比,BA对不定芽增殖具有更好的效果。NAA与IBA两种生长调节物质对不定芽增殖的影响没有明显的差异。木瓜不定芽在BA0.5 mg/l +NAA0.2 mg/l培养基中,增殖系数最高。降低MS大量元素对不定芽增殖具有负作用。在1/2MS+IBA0.2组合中,不定芽的根诱导率较高、根较长。1.2愈伤组织的诱导和继代培养:1.2.1愈伤组织的诱导①在子叶诱导实验中,2,4-D能比NAA更高效的诱导出愈伤组织,愈伤生长量大,而且经过继代培养后仍能保持较好的长势。2,4-D与KT组合的效果好于2,4-D与BA的组合。筛选试验表明:MS+2,4-D1mg/l+KT0.1mg/l对子叶愈伤诱导及其生长效果较好。②胚轴愈伤组织诱导率达到87%,而子叶较低为69%。虽然NAA诱导的效果较好,但愈伤组织生长速度较慢;而2,4-D则能高效地诱导出愈伤,但所诱导的愈伤容易出现玻璃化现象。提高NAA,2,4-D和BA的浓度,愈伤呈现水浸状的比例和程度都会相应的提高。所设计的组合中,2,4-D 0.1mg/l+BA 0.3 mg/l对胚轴愈伤的诱导效果较好。③暗培养能提高愈伤组织的生长量.随着黑暗培养时间的延长,愈伤组织松散程度也不断上升,子叶颜色由浓绿色逐步向淡黄色过渡。1.2.2愈伤组织的继代培养①在固体培养基中,子叶愈伤组织继代培养可以根据目的不同选取不同的继代培养基。长期继代培养,将愈伤组织继代培养在NAA1.0mg/l+KT0.5mg/l的培养基或NAA0.5 mg/l与TDZ 2mg/l的组合中,可得到较好的效果。如需短期内获得较多的愈伤组织,可将愈伤组织在2,4-D1.0mg/l+KT0.1mg/l中培养。②子叶愈伤在液体培养条件下,生长量较低,效果较差。③胚轴愈伤在NAA1mg/l+KT 0.3mg/l培养基中的生长量最大。④维生素C对愈伤组织降低褐化的作用较小,但能促进愈伤组织变绿。1.3不定芽的诱导发生:子叶诱导不定芽的培养基中需要添加一定量的TDZ和NAA。不定芽有玻璃化现象,在TDZ 0.5 mg/l + NAA 1.0mg/l的培养基中得到的不定芽发育较好。2.不同NaCl浓度对种子和愈伤组织的生长的影响,主要结论如下:2.1愈伤组织:当NaCl浓度较低时,愈伤组织的生长量未受到较大影响、MDA含量较低,POD、SOD活性提高,细胞内可溶性糖、脯氨酸含量升高。而在高浓度NaCl的胁迫下,愈伤组织的生长具有明显的抑制作用、MDA含量升高,而POD、SOD活性开始降低、可溶性糖含量也降低,但是脯氨酸含量一直升高。2.2幼苗随着NaCl浓度的升高,种子的萌发率和幼苗根系活力呈递减趋势;除了在0.5‰NaCl处理的幼苗中,其叶绿素含量高于对照,其余处理均低于对照;幼苗的SOD、POD活性变化趋势较一致,先升高后降低,在1‰NaCl浓度具有最好的活性。MDA含量随NaCl处理浓度的升高而升高。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1. 植物组织培养技术的研究进展
• 1.1 植物组织培养的发展
• 1.2 植物生长调节物质的研究
• 1.3 植物细胞脱分化和再分化研究
• 1.4 宣木瓜组织培养的研究进展
• 2. 植物组织培养的应用
• 2.1 植物的离体快速繁殖
• 2.2 单倍体、多倍体的繁殖
• 2.3 植物细胞培养
• 2.4 胚胎培养和胚乳培养
• 2.5 人工种子和离体种质保存
• 3. 耐盐性的研究进展
• 3.1 中国盐碱地的概况
• 3.2 植物盐胁迫的形成和表现
• 3.3 植物在盐胁迫下的自我调节
• 3.4 植物的耐盐蛋白和耐盐基因的研究
• 3.5 盐胁迫下植物细胞的显微结构变化
• 4. 研究目的和意义
• 第二章 宣木瓜不定芽的快繁和生根
• 1. 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 培养基、实验器材的灭菌和培养条件
• 1.2.1 不定芽诱导的培养基组合
• 1.2.2 不定芽生根的培养基组合
• 1.2.3 培养基灭菌和培养条件
• 1.3 方法
• 2. 结果与分析
• 2.1 不定芽的诱导
• 2.1.1 不同植物生长调节物质对不定芽增殖的影响
• 2.1.2 大量元素对不定芽增殖的影响
• 2.2 不定芽的生根
• 2.3 炼苗和移栽
• 3. 讨论
• 3.1 不同生长调节物质对宣木瓜快速繁殖的影响
• 3.2 MS 大量元素对宣木瓜快速繁殖的影响
• 3.3 不同生长调节物质对宣木瓜生根的影响
• 第三章 宣木瓜愈伤组织的诱导和继代培养
• 1. 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 外植体处理和消毒
• 1.3 培养基、实验器材的灭菌和培养条件
• 1.3.1 诱导愈伤组织的培养基组合
• 1.3.2 继代愈伤组织的培养基组合
• 1.3.3 培养基灭菌和培养条件
• 2 结果与分析
• 2.1 不同消毒方法的比较
• 2.2 不同外植体愈伤组织的诱导
• 2.2.1 子叶愈伤组织的诱导
• 2.2.2 光照对子叶愈伤组织诱导的影响
• 2.2.3 胚轴愈伤组织的诱导
• 2.3 愈伤组织的继代培养
• 2.3.1 不同生长调节物质对子叶愈伤组织继代培养的影响
• 2.3.2 液体培养对子叶愈伤组织继代培养的影响
• 2.3.3 不同浓度的维生素C 对愈伤组织褐化的影响
• 2.3.4 胚轴愈伤组织的继代培养
• 3. 讨论
• 3.1 不同生长调节物质对愈伤组织诱导的影响
• 3.2 外植体对愈伤组织诱导的影响
• 3.3 光照对外植体愈伤组织诱导的影响
• 3.4 生长调节物质对愈伤组织继代培养的影响
• 3.5 液体培养对愈伤组织继代培养的影响
• 3.6 不同浓度的维生素 C 对愈伤组织褐化的影响
• 第四章 宣木瓜子叶不定芽的诱导
• 1. 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 外植体处理和消毒
• 1.3 培养基、实验器材的灭菌和培养条件
• 2. 结果与分析
• 2.1 不定芽的诱导
• 2.2 不定芽的增殖和生根
• 2.3 移栽
• 3. 讨论
• 3.1 植物生长调节物质与子叶不定芽的诱导
• 3.2 子叶不定芽诱导发生的位置
• 第五章 不同 NACL 浓度对愈伤组织生长的影响
• 1. 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.2.1 愈伤组织的诱导
• 1.2.2 NaCl 浓度的设定
• 1.2.3 相关生理指标的测定方法
• 2. 结果与分析
• 2.1 不同NaCl 浓度对愈伤组织生长量的影响
• 2.2 不同NaCl 浓度处理下愈伤组织相关保护酶活性的变化
• 2.2.1 POD 活性的变化
• 2.2.2 SOD 活性的变化
• 2.3 不同NaCl 浓度下愈伤组织 MDA 含量的变化
• 2.4 不同NaCl 浓度下愈伤组织脯氨酸含量的变化
• 2.5 不同NaCl 浓度下愈伤组织可溶性糖含量的变化
• 3. 讨论
• 3.1 不同 NaCl 浓度对愈伤组织生长量的影响
• 3.2 不同 NaCl 浓度对 SOD、POD 活性的影响
• 3.3 不同 NaCl 浓度对愈伤组织细胞渗透调节物质的影响
• 3.4 不同NaCl 浓度对愈伤组织 MDA 含量的影响
• 第六章NACL 胁迫对宣木瓜种子萌发的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 研究材料
• 1.2 NaCl 浓度设定
• 1.3 材料消毒与接种
• 1.4 灭菌和培养条件
• 1.5 测定方法
• 1.5.1 宣木瓜幼苗叶绿素含量测定
• 1.5.2 宣木瓜幼苗根系活力测定
• 1.5.3 SOD 活性的测定
• 1.5.4 POD 活性的测定
• 1.5.5 MDA 含量的测定
• 1.5.6 种子萌发率
• 2. 结果与分析
• 2.1 NaCl 胁迫对植物种子萌发的影响
• 2.2 NaCl 胁迫对宣木瓜幼苗外部形态的伤害
• 2.3 NaCl 胁迫下宣木瓜幼苗叶绿素含量的变化
• 2.4 NaCl 胁迫下宣木瓜根系活力的变化
• 2.5 NaCl 胁迫下宣木瓜幼苗 SOD 酶和 POD 酶活性的变化
• 2.5.1 超氧化物歧化酶（SOD）的变化
• 2.5.2 过氧化物歧化酶（POD）活性的变化
• 2.6 NaCl 胁迫下宣木瓜幼苗 MDA 含量的变化
• 3. 讨论
• 3.1 宣木瓜种子萌发对 NaCl 胁迫的响应
• 3.2 宣木瓜幼苗生理指标的变化与 NaCl 浓度变化的相关性
• 3.2.1 NaCl 胁迫下宣木瓜幼苗叶绿素含量的动态变化,
• 3.2.2 宣木瓜幼苗根系对NaCl 胁迫的响应
• 3.2.3 NaCl 胁迫下SOD 活力和 POD 活力对宣木瓜幼苗的保护作用
• 3.2.4 MDA 含量与不同浓度 NaCl 胁迫的相关性
• 小结与展望
• 1. 小结
• 2. 展望
• 参考文献