自体骨髓间充质干细胞联合bFGF移植治疗猪急性心肌梗死的研究

论文摘要

目的：通过单纯的直接贴壁和密度梯度离心结合直接贴壁两种方法分离、纯化、扩增猪骨髓间充质干细胞（MSCs）比较两种分离方法的培养效率。通过冠脉导入MSCs和联合碱性成纤维细胞生长因子基因（bFGF）探讨猪自体移植的MSCs联合bFGF移植入急性心肌梗死组织后其可行性及有效性，为临床应用提供理论依据和实验方法。方法：取猪的骨髓液用单纯的直接贴壁法和密度梯度离心结合贴壁培养法两种方法分离猪骨髓间充质干细胞，体外培养扩增，绘制其生长曲线，通过显微镜观察培养细胞的生物学形状。滇南小型猪20只，开胸结扎左冠状动脉前降支第二对角支开口后造成急性心肌梗死模型，随机分为3组：1急性心肌梗死对照组（5只）：术后1天超声心动图测定左室射血分数（LVEF），术后1周行选择性冠状动脉造影，并经导管分别冠脉内导入不含MSCs的生理盐水。2急性心肌梗死自体移植MSCs组（6只）：术后1天超声心动图测定左室射血分数（LVEF），术后1周行选择性冠状动脉造影，并经导管分别冠脉内导入含自体MSCs的生理盐水。3急性心肌梗死自体移植MSCs联合pcDNA3-bFGF组（6只）：术后1天超声心动图测定左室射血分数（LVEF），术后1周行选择性冠状动脉造影，并经导管分别冠脉内导入含MSCs及bFGF的生理盐水。给药后4周，通过超声心动图测定左室射血分数（LVEF），评估左室收缩功能，并再次行选择性冠状动脉造影观察冠脉侧枝血管新生情况。结果：（1）直接贴壁法收集到的细胞扩增速度较慢，密度梯度离心法收集到的细胞扩增速度较快，细胞培养后成梭形。（2） LAD结扎术后心电图、心肌酶学、选择性冠脉造影均证实猪急性心肌梗死模型制作成功；（3）术后4周超声心动图示左冠脉导入MSCs组及导入MSCs和pcDNA3-b FGF组左室射血分数（LVEF）值高于手术对照组。结论：（1）密度梯度离心结合贴壁培养法较单纯的直接贴壁法培养MSCs的培养效率更高。体外培养的猪MSCs生长稳定，增殖力较强。（2）通过冠状动脉导入自体培养的MSCs，可在局部微环境刺激下归巢至心肌梗死周边区，丰富其侧枝循环，改善心功能。MSCs联合bFGF移植有望成为治疗冠心病急性心肌梗死新的治疗方法。

论文目录

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• 论文题目:自体骨髓间充质干细胞联合bFGF移植治疗猪急性心肌梗死的研究
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• 英文摘要
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 文献综述
• 综述题目:间充质干细胞的获得及体外分离培养
• 正文
• 参考文献
• 撰写及刊登文章
• 致谢