论文摘要
目的:研究曲格列酮对前脂肪细胞增殖和分化的影响。方法:(1)采用胶原酶消化的方法分离培养了人大网膜前脂肪细胞,通过对细胞形态学观察、油红O 对细胞脂质染色对细胞鉴定。观察原代培养人前脂肪细胞增殖和分化过程。(2)MTT 法观察曲格列酮对前脂肪细胞增殖的影响。(3)油红O 染色定量的方法观察曲格列酮对前脂肪细胞分化的影响。(4)统计学处理:分析数据用均数±标准差表示。采用SAS8.2 软件处理相关数据。P<0.05 有统计学意义。结果:(1)成功培养了人前脂肪细胞。前脂肪细胞形态与成纤维细胞相似,增殖期的3-10 天为对数增长期;分化培养基培养的第4 天可见脂质小滴,脂滴逐渐增多,21 天左右大部分分化为成熟脂肪细胞。(2)曲格列酮对前脂肪细胞增殖的影响:1)各组分别刺激前脂肪细胞48 小时,显微镜观察前脂肪细胞呈现梭形、多角形、扇形,可以看到各药物组前脂肪细胞数目明显多于对照组。MTT 测定OD 值显示1μmol/l、10μmol/l 的可以促进前脂肪细胞的增殖,而其浓度依赖性未见明显统计学意义。2)10μmol/l的曲格列酮能够在48 小时、72 小时促进前脂肪细胞增殖,这种促增殖程度48 小时最强,为对照组的126%。(3)曲格列酮对前脂肪细胞分化的影响:曲格列酮各组干预14 天后,显微镜观察曲格列酮10μmol/l 组较多细胞有大脂滴,核推向细胞一侧,说明已大部分向成熟脂肪细胞转化。曲格列酮组随着药物浓度增高,油红O 染色明显增强。OD 测定结果表明浓度为1μmol/l、10μmol/l的曲格列酮具有促进前脂肪细胞向脂肪细胞分化的作用,且随着浓度的升高(0.1-10μmol/l),刺激强度有增强趋势。结论:(1)成功培养了大网膜前脂肪细胞,并诱导前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞。(2)曲格列酮1μmol/L、10μmol/L 浓度时,可以促进前脂肪细胞增殖和分化,曲格列酮可能是通过增加成熟脂肪细胞的数目,改善胰岛素抵抗。
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