催乳素基因、生长激素受体基因多态性与奶牛产奶性状关联性分析

论文摘要

研究背景催乳素是垂体前叶分泌的多肽类激素,具有多种生物学功能。基因阻断实验证明它在腺体形成、泌乳及乳蛋白基因的表达方面发挥重要的作用。生长激素受体是催乳素和生长激素受体超家族的成员,它通过与生长激素结合,在动物的生长和发育等生长代谢过程发挥作用。因此催乳素和生长激素受体基因可能是与影响奶牛产奶性状的数量性状位点关系最为密切的候选基因。催乳素与生长激素受体基因编码区与调控区等位基因的变异有可能对奶牛产奶性状有直接或间接的效应。目的本研究的目的在于证实催乳素基因与生长激素受体基因的多态性与中国荷斯坦奶牛的产奶性状是否有关联性。方法本研究的研究对象为300头中国荷斯坦奶牛的DNA样品。通过PCR-RFLP方法或CRS-RFLP方法对所有样本进行基因分型。使用Primer Premier5.0和Oligo 5.0软件进行引物设计。基因变异与产奶性状之间的关联性应用SAS 9.0统计软件,利用最小二乘法拟合线性模型进行分析。结果在催乳素基因8398位点,300头荷斯坦奶牛中A、G等位基因的频率分别为0.257和0.743,基因型AA、AG和GG的频率分别为0.010、0.497和0.493,在第Ⅱ泌乳期,GG基因型群体的乳蛋白率高于AG型群体（P＜0.05）,AG基因型群体的产奶量高于GG型群体（P＜0.01）。在8377位点,275头荷斯坦奶牛中C、G等位基因的频率分别为0.815和0.185,基因型CC、GC和GG的频率分别为0.655、0.320和0.025,GG基因型群体体产奶量显著高于CC及GC基因型（P＜0.05）,GC基因型群体乳蛋白率显著高于CC型（P＜0.05）。在8510位点,280头荷斯坦奶牛中C、T等位基因的频率分别为0.204和0.796,基因型CC、TC和TT的频率分别为0.204、0.000和0.796,CC基因型群体产奶量显著高于TT基因型（P＜0.05）。在生长激素受体基因4962位点,290头荷斯坦奶牛中A、T等位基因的频率分别为0.628和0.272,基因型AA、TA和TT的频率分别为0.469、0.317和0.214,TT基因型群体乳脂率显著高于AA基因型（P＜0.05）。结论在催乳素基因8398位点,G为可提高乳蛋白率的有利等位基因,而A等位基因可提高乳产量。在8377位点,G为可提高乳蛋白率和乳产量的有利等位基因。在8510位点,C为可提高乳产量的有利等位基因。在生长激素受体基因4962位点,T为可提高乳脂率的有利等位基因。综上所述,本研究建立了快速有效的催乳素及生长激素受体基因位点多态性的分子检测方法,并在中国荷斯坦牛群体中验证了这些突变位点的不同基因型对产奶性状具有显著效应。因此这些位点可以作为一个候选的分子遗传标记,应用到我国荷斯坦牛分子育种中,通过对产奶性状进行标记辅助选择,提高选择准确性和效率,以期快速高效地改善牛群的生产性能。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 前言
• 一、单核苷酸多态性研究进展
• 二、催乳素基因与生长激素受体基因研究进展
• 材料与方法
• 一、试验材料
• 二、主要仪器设备及试剂溶液的配制
• 三、相关分析软件
• 四、实验方法
• 结果
• 一、基因组DNA的提取
• 二、PRL基因8398位点的遗传多态性分析
• 三、PRL基因8377位点的遗传多态性分析
• 四、PRL基因8510位点的遗传多态性分析
• 五、GHR基因4962位点的遗传多态性分析
• 六、PRL及GHR基因序列分析
• 七、统计分析结果
• 讨论
• 一、关于PRL基因8398、8377、8510 SNP位点、GHR基因4962 位点的多态性及其与奶牛产奶性状的关联性分析
• 二、关于统计分析模型的选择
• 三、关于PCR-RFLP及CRS-RFLP技术在PRL与GHR基因型鉴 定中的应用
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 学位论文评阅及答辩情况表