论文题目: 麻疯树（Jatropha curcas L.）脂质合成的酶基因克隆及功能研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 植物学
作者: 卿人韦
导师: 陈放
关键词: 麻疯树,脂质合成,脱饱和酶,二酰基甘油转移酶
文献来源: 四川大学
发表年度: 2005
论文摘要: 麻疯树(Jatropha curcoas L.)是一种广泛生长在亚洲、非洲和拉丁美洲等国家和地区的含油灌木植物。这种植物有多种用途,如防护土壤侵蚀、改良土壤或作为商业经济作物种植。我们的研究显示,其种子TAG含量达62%,其中亚油酸含量达到总脂肪酸的47%,尽管目前,麻疯树油被认为食用是有毒的,但这并不妨碍其成为一个优秀的亚油酸基因供体植物。用麻疯树油脂加工而成的生物柴油,在同类产品中是相当优秀的。 针对麻疯树含有与脂质合成相关的优秀基因,这吸引我们来克隆这些基因并鉴定他们的功能及表达活性。本文用运兼并性引物策略,成功的克隆到了与麻疯树不饱和脂肪酸合成相关的3个脱饱和酶基因和1个与贮存油脂TAG合成的DAGAT基因的部分序列,经生物信息学分析确认了序列片段的正确性后,成功地运用了先进的RACE技术,获得了这几个基因的完整编码筐。他们分别被命名为:Jcω6,一个导致麻疯树亚油酸合成的基因;Jcω3,一个导致麻疯树膜脂亚麻酸合成的基因;Jcω8,一个导致麻疯树膜脂,植物鞘磷脂合成的酶基因;Jcdagat,一个导致脂质以TAG的形式储存到种子中的酶基因。同时也克隆了编码麻疯树的18S rRNA的基因,这为我们的所有分子生物学实验提供了对照和控制实验的工具。Jcω6的编码筐大小为1152bp,编码一个383个氨基酸的酶,其推测的分子量大小为44.5KDm; Jcω3的编码筐大小为1341bp,编码一个446个氨基酸的酶,其推测的分子量大小为51KDm Jcd8的编码筐大小为1344bp,编码一个447个氨基酸的酶,其推测的分子量大小为51KDa;Jcdagat的编码
论文目录:
中文摘要
英文摘要
Part 1 麻疯树种子的长链脂肪酸组成及其在TAG中的分配研究
1 引言
2 材料与方法
2.1 材料与试剂
2.2 方法
2.2.1 麻疯树总脂肪酸分析样品制备
2.2.2 麻疯树种仁中TAG的分离
2.2.3 样品的甲酯化
2.2.4 脂肪酸的气相色谱分析
2.2.4 硅胶柱分离TAG效果的评价
3 结果
3.1 硅胶柱分离TAG效果
3.2 麻疯树种仁的总脂肪酸含量及各脂肪酸组成
4 讨论
参考文献
Part 2 麻疯树长链脂肪酸脱饱和酶基因的分子克隆及功能研究
1 引言
2 材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 实验菌株及载体
2.1.3 试剂
2.2 实验方法
2.2.1 麻疯树叶片总RNA的提取
2.2.2 麻疯树18s rRNA基因的克隆
2.2.3 麻疯树脂肪酸脱饱和酶基因cDNA中间片段的克隆
2.2.4 几个麻疯树脂肪酸脱饱和酶基因全长cDNA克隆
2.2.5 麻疯树脂肪酸脱饱和酶基因的功能鉴定
2.2.6 麻疯树脂肪酸脱饱和酶基因在基因组的拷贝数分析
2.2.7 麻疯树脂肪酸脱饱和酶基因的瞬时表达分析
3 结果
3.1 麻疯树脂肪酸脱饱和酶基因全长cDNA的分离
3.1.1 麻疯树△12脂肪酸脱饱和酶基因全长cDNA的分离
3.1.2 麻疯树△15脂肪酸脱饱和酶基因全长cDNA的分离
3.1.3 麻疯树△8脂肪酸脱饱和酶基因全长cDNA的分离
3.2 麻疯树脂肪酸脱饱和酶基因在其基因组中的拷贝数
3.3 麻疯树脂肪酸脱饱和酶基因的瞬时表达
3.4 麻疯树Jcω6在转基因酵母中的表达
4 讨论
参考文献
Part 3 麻疯树二酰基甘油转移酶(DGAT)基因克隆及功能研究
1 引言
2 材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 实验菌株及载体
2.1.3 试剂
2.2 实验方法
2.2.1 麻疯树叶片总RNA的提取
2.2.2 麻疯树DGAT酶基因cDNA中间片段的克隆
2.2.3 麻疯树DGAT酶基因全长cDNA克隆
2.2.4 麻疯树DGAT酶基因的功能鉴定
2.2.5 麻疯树DGAT酶基因在基因组的拷贝数分析
2.2.6 麻疯树DGAT酶基因在各种器官内的瞬时表达分析
3 结果
3.1 麻疯树DGAT酶基因全长cDNA的分离
3.1.1 麻疯树DGAT酶基因全长cDNA的分离
3.2 麻疯树DGAT酶基因在其基因组中的拷贝数
3.3 麻疯树DGAT酶基因的瞬时表达
3.4 麻疯树Jcdgat在转基因酵母中的表达
4 讨论
参考文献
全文结论
本论文的成果及其价值
综述
在读期间发表的主要论文
声明
致谢
发布时间: 2006-05-12
参考文献
- [1].麻疯树的抗冷性和SAD基因的克隆及表达研究[D]. 罗通.四川大学2006
- [2].两种高产麻疯树（Jatropha curcas L.）适应盐胁迫的生理生化机制[D]. 陈健妙.南京农业大学2011
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