貉子生长性状部分候选基因的遗传学研究

论文摘要

貉子的生长性状是受多基因共同调控的,在人和鼠等动物的研究结果表明GH基因、GHR基因、IGF-I基因和IGF-IR基因对生长具有重要的调节作用,因此,本研究将GH基因、GHR基因、IGF-I基因和IGF-IR基因作为影响貉子生长性状的候选基因,以狗GH基因、GHR基因、IGF-I基因和IGF-IR基因序列为基础,通过PCR结合测序的方法克隆了部分貉子GH基因、GHR基因、IGF-I基因和IGF-IR基因的外显子序列;以貉子的随机群体为研究材料,采用PCR-SSCP的方法检测貉子GH基因、GHR基因、IGF-I基因和IGF-IR基因的多态性,并进行基因多态性与生长等性状的相关分析,根据相关结果选择相关好的位点进行合并基因型分析。主要研究结果如下:1.克隆了貉子GHR基因的全部CDS序列。2.在貉子GHR基因发现两个多态性位点,分别位于GHR基因的外显子5和外显子9,基因型与性状间的相关分析结果表明外显子9的多态性位点GHR9对貉子的皮长有显著影响。3.在貉子IGF-I基因发现两个多态性位点,分别位于IGF-I基因的外显子3和3’UTR,基因型与性状间的相关分析结果表明外显子3的多态性位点IGF3对貉子的皮长有显著影响。4.将貉子GHR9多态性位点与IGF3多态性位点进行合并基因型分析,结果表明合并基因型对貉子的体长有显著的影响,且合并后的两种纯合子的差要大于单位点两种纯合子的差。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 研究背景与科学意义
• 1.2 文献综述
• 1.2.1 分子育种的主要技术方法
• 1.2.2 分子遗传标记
• 1.2.3 影响貉子生长相关基因的研究进展
• 1.3 本研究的目标和内容
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 菌株和克隆载体
• 2.1.3 主要仪器设备
• 2.1.4 主要药品及试剂
• 2.1.5 主要分子生物学软件
• 2.1.6 缓冲液与常用试剂的配制
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 样品的采集及DNA 提取
• 2.2.2 基因组DNA 的浓度测定和质量检测
• 2.2.3 引物的设计与合成
• 2.2.4 PCR 扩增
• 2法）'>2.2.5 感受态细胞的制备（CaCl₂法）
• 2.2.6 DNA 片段回收
• 2.2.7 PCR 产物的T 载体连接
• 2.2.8 质粒的转化
• 2.2.9 转化菌落的PCR 鉴定与培养
• 2.2.10 质粒DNA 的小规模提取
• 2.2.11 质粒的酶切鉴定
• 2.2.12 重组质粒的测序
• 2.2.13 PCR-SSCP 检测
• 2.2.14 统计模型的建立
• 3 结果与分析
• 3.1 貉子GH 基因、GHR 基因、IGF-I 基因和IGF-IR 基因部分序列的克隆和序列分析
• 3.1.1 貉子GH 基因的克隆和序列分析
• 3.1.2 貉子GHR 基因的克隆和序列分析
• 3.1.3 貉子IGF-I 基因的克隆和序列分析
• 3.1.4 貉子IGF-IR 基因的克隆和序列分析
• 3.2 貉子GH 基因、GHR 基因、IGF-I 基因和IGF-IR 基因多态性检测
• 3.2.1 貉子GH 基因的多态性检测
• 3.2.2 貉子GHR 基因的多态性检测
• 3.2.3 貉子IGF-I 基因的多态性检测
• 3.2.4 貉子IGF-IR 基因的多态性检测
• 3.3 貉子GHR 基因、IGF-I 基因多态性与生长性状的关系
• 3.3.1 貉子GHR 基因多态性与生长性状的关系
• 3.3.2 貉子IGF-I 基因多态性与生长性状的关系
• 3.3.3 貉子GHR 基因和IGF-I 基因合并基因型与生长性状的关系
• 4 讨论
• 4.1 貉子GH 基因、GHR 基因、IGF-I 基因和IGF-IR 基因的克隆和序列分析
• 4.1.1 貉子GH 基因的克隆和序列分析
• 4.1.2 貉子GHR 基因的克隆和序列分析
• 4.1.3 貉子IGF-I 基因的克隆和序列分析
• 4.1.4 貉子IGF-IR 基因的克隆和序列分析
• 4.2 貉子GH 基因、GHR 基因、IGF-I 基因和IGF-IR 基因多态性检测及其与生长性状的相关
• 4.2.1 貉子GHR 基因多态性检测及其与生长性状的相关
• 4.2.2 貉子IGF-I 基因多态性检测及其与生长性状的相关
• 4.3 貉子GHR 基因和IGF-I 基因合并基因型与生长性状的相关
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文