论文摘要
研究背景神经病理性疼痛是由于中枢或外周神经损伤及炎症所引起的慢性疼痛,表现为痛觉过敏、痛觉超敏及自发性疼痛。虽然国内外已经进行了大量研究,但其机制仍然很不清楚。近年来的研究发现神经损伤后损伤纤维的Wallerian变性及局部炎症刺激产生的致炎细胞因子,如白介素-1（IL-1）、肿瘤坏死因子（TNF）等在病理性疼痛的产生和维持阶段发挥重要作用,而IL-1和TNF的合成,以及其作用的发挥都与核因子-kappa B（NF-kB）的激活密切相关,但目前有关NF-kB在神经病理性疼痛中的作用的研究还很不完善。目的采用腰5脊神经结扎（L5 SNL）引起的神经病理性疼痛模型,通过鞘内或腹腔注射NF-kB激活抑制剂PDTC,研究NF-kB在大鼠神经病理性疼痛中的作用;并进一步采用免疫荧光组织化学和免疫荧光双标技术观察NF-kB在L5和L4背根神经节（DRG）的激活及激活的细胞类型。方法实验动物采用成年雄性SD大鼠。首先在L5 SNL手术前后不同时间点,鞘内或腹腔注射不同剂量的NF-kB激活抑制剂PDTC,通过行为学测试观察NF-kB在神经病理性疼痛的作用。然后通过免疫荧光组织化学方法观察L5 SNL术后不同时间点NF-kB在L5及L4 DRG的激活程度,并进一步采用免疫荧光双标技术观察NF-kB激活的细胞类型。本实验中行为学测试采用up-down方法来测试大鼠的50%机械刺激撤足阈值,用热辐射测试仪测试热刺激撤足潜伏期。免疫组织化学结果通过计算NF-kB-免疫活性（IR）阳性细胞的百分比来定量分析。结果1.行为学测试结果显示:L5 SNL可引起大鼠手术同侧后肢机械刺激痛觉超敏和热刺激痛觉过敏;L5 SNL术前0.5h鞘内或腹腔注射PDTC（1ug/10ul,100mg/kg）,而后每天1次,持续7d,能完全阻断L5 SNL引起的痛觉超敏及痛觉过敏;L5 SNL术后1d开始鞘内注射PDTC（1ug/10ul）,每天1次,持续7d,也可阻断L5 SNL诱导的痛觉超敏及痛觉过敏;L5 SNL术后7d开始鞘内注射PDTC（1ug/10ul）,每天1次,至术后14d,对已经建立起来的痛觉超敏及痛觉过敏均无显著影响。2.免疫荧光组化结果显示:与假手术组相比,L5 SNL术后1d手术同侧L5及L4 DRG中NF-kB-IR阳性细胞百分比增加,3d达到高峰,并保持到术后14d左右;术前0.5h开始鞘内注射PDTC（1ug/10ul）,而后每天1次,持续3d,可以抑制L5 DRG细胞中NF-kB的激活。3.免疫荧光双标结果显示NF-kB激活于卫星样胶质细胞。结论1.L5 SNL可引起大鼠产生神经病理性疼痛,同时引起NF-kB在同侧L5和L4DRG卫星样胶质细胞的激活。2.术前应用NF-kB抑制剂能阻断L5 SNL引起的神经病理性疼痛。3.术后1d应用NF-kB抑制剂也能缓解病理性疼痛的表现,但术后7d给药对已经形成的神经病理性疼痛没有作用。以上结果提示NF-kB主要在L5 SNL引起的神经病理性疼痛的早期产生阶段发挥重要作用,而不参与病理性疼痛的维持。